Получение двумерной хроматограммы

Рис. УП.5. Схема получения двумерной хроматограммы

Для получения двумерной хроматограммы направление электрического поля при повторном хроматографировании перпендикулярно первоначальному. [c.159]

Для одномерных хроматограмм используют бумажные полосы шириной 4,5—5 см и длиной 30—50 см. Для получения двумерной хроматограммы применяют листы бумаги размером примерно 20 X 25— 40 X 45 см. Восходящие хроматограммы получают при перемещении подвижного растворителя через норы бумаги снизу вверх, а нисходящие— сверху вниз. [c.284]

Рис. 42. Схема получения двумерной хроматограммы а — хроматограмма, полученная после хроматографирования в первом растворителе б та же хроматограмма перед хроматографированием во втором растворителе в — хроматограмма, полученная после хроматографирования во втором растворителе.

Получение двумерной хроматограммы. Если при помощи одного растворителя разделить сложную смесь не удается, то последовательно применяют два растворителя, в которых [c.118]

По технике выполнения различают следующие виды бумажной хроматографии одномерную, двумерную, круговую и электрофоретическую. Для получения двумерных хроматограмм хроматографирование производят дважды во взаимно противоположных направлениях после обработки пробы одним растворителем хроматограмму поворачивают на 90° и хроматографируют вторично уже другим растворителем. [c.349]

Для получения двумерной хроматограммы применяют квадратные листы бумаги размером 20 X 20, 30 X 30 или 40 X 40 см. В начале опыта каплю исследуемого раствора наносят на бумагу в ее левом углу на расстоянии 5 см от краев (рис. 42, а). Высушив образовавшееся пятно, бумагу помещают в сосуд для хроматографирования, опуская нижний край ее в растворитель, и производят хроматографирование по восходящему методу. После того как фронт подвижной фазы достигнет верхнего края бумаги, хроматографирование прекращают, бумагу высушивают и поворачивают на 90° против часовой стрелки. При этом место нанесения капли исследуемого раствора А окажется справа, а линия, по которой происходил подъем зон анализируемых веществ,— внизу (рис. 42, б). В таком положении бумагу помещают в новый сосуд для хроматографирования, опускают ее нижний край в другой растворитель и хроматографируют по восходящему методу. После достижения фронтом новой подвижной фазы верхнего края бумаги хроматографирование прекращают, бумагу высушивают, а образовавшиеся зоны анализируемых веществ проявляют заранее выбранным раствором реагента. Получают двумерную хроматограмму, изображенную на рис. 42, в. [c.119]

Для получения двумерной хроматограммы аминокислот вначале через бумагу с нанесенными аминокислотами пропускают подвижный растворитель — н-бутанол — уксусная кислота — вода. Когда фронт растворителя [c.113]

Получение двумерной хроматограммы. Если при помощи одного растворителя разделить сложную смесь не удается, то следует последовательно применять два растворителя, обладающих различными коэффициентами распределения. Такая хроматограмма называется двумерной. [c.257]

Рис. 48. Схема получения двумерной хроматограммы (А — место нанесения капли исследуемого раствора) а — хроматограмма, полученная после хроматографирования первым растворителем, смесь, состоящая из шести компонентов, не разделилась б — та же хроматограмма перед опусканием бумаги во второй растворитель в — хроматограмма, полученная после хроматографирования во втором растворителе и проявления,

Для получения двумерной хроматограммы аминокислот вначале через бумагу пропускают смесь н-бутанола, уксусной кислоты и воды когда фронт растворителя дойдет до нижнего конца листа, хроматограмму вынимают из камеры, высушивают на воздухе в течение 1,5—2 ч или в сушильном шкафу в течение 10— Ъ мин при температуре 60 °С (см. стр. 117). Затем хроматограмму переносят в другую камеру и через нее пропускают второй растворитель—водонасыщенный 80%-ный раствор фенола, в направлении, перпендикулярном движению первого растворителя. Второй растворитель пропускают до тех пор, пока он не дойдет до конца бумаги. После удаления фенола из бумаги описанным выше способом хроматограмму проявляют 0,2%-ным раствором нингидрина в ацетоне. [c.147]

По технике выполнения различают следующие виды бумажной хроматографии одномерную, двумерную, круговую и электрофоретическую. Одномерная и двумерная хроматограммы могут быть получены в восходящем и нисходящем потоке растворителя. Двумерная хроматография открывает более широкие возможности в разделении сложных смесей, чем одномерная. Для получения двумерных хроматограмм процесс производят дважды во взаимно противоположных направлениях после обработки пробы одним растворителем хроматограмму поворачивают на 90° и хроматографируют вторично уже другим растворителем. Такая методика позволяет получить более тонкие разделения компонентов смеси. [c.166]

Получение двумерной хроматограммы для смеси аминокислот Л — хроматограмма после первой стадии разделения — хроматограмма после второй стадии (после обработки другим растворителем повернутой на 90° бумаги). [c.65]

Для получения одномерных хроматограмм используют бумажные полосы шириной 4, 5—5,0 см и длиной 30—50 см. Для получения двумерной хроматограммы используют листы бумаги шириной 20 X 25 см, длиной 40—45 см. Для получения круговой хроматограммы используют бумажные круги диаметром на 2—3 см больше, чем диаметр камеры. [c.390]

Процесс хроматографирования ведут в хроматографических камерах, представляющих собой стеклянные цилиндры или стеклянные банки для получения одномерных хроматограмм, или эксикаторы для получения двумерных хроматограмм и чашки Петри для получения круговых хроматограмм. [c.390]

Двумерная хроматография. Если одним растворителем разделить сложную смесь не удается, то надо последовательно применять два растворителя, обладающих различным коэффициентом распределения. Такая хроматография называется двумерной. Для получения двумерной хроматограммы применяют квадратные листы бумаги размером 20 X 20, 30 X 30, 40 X 40 см. В начале опыта каплю исследуемого раствора наносят на бумагу в ее левом углу на расстоянии 5 см от краев. После высушивания образовавшегося пятна бумагу помещают в сосуд для хроматографирования, опускают нижний край в один из выбранных растворителей и хроматографируют по восходящему методу. После высушивания бумагу, повернув на 90° против часовой стрелки, помещают в новый сосуд для хроматографирования, опускают ее нижний край во второй растворитель и хроматографируют по восходящему методу. Таким образом, после проявления получают двумерную хроматограмму. [c.79]

Восходящая, нисходящая и круговая хроматография по технике выполнения может быть одномерной и двумерной. Для получения двумерных хроматограмм хроматографирование производят дважды во взаимно перпендикулярных направлениях после проявления хроматограммы одним элюентом хроматограмму поворачивают на 90° и вторично проявляют другим элюентом. [c.318]

Двумерная хроматография может быть нисходящей, восходящей и многократной. Особенностью ее является применение двух различных растворителей, которые пропускают по бумаге поочередно во взаимно перпендикулярных направлениях. Для получения двумерной хроматограммы берут лист бумаги и в одном из ее углов наносят каплю анализируемого раствора, просушивают пятно и хроматографируют, применяя первый растворитель. Когда будет достигнуто нужное разделение на группы веществ, хроматограмму высушивают и снова хроматографируют со вторым растворителем, повернув хроматограмму на 90°. Этот вид хроматографирования применяют для разделения смесей, состоящих из 10—20 компонентов, имеющих близкие 7 / (например, при разделении смеси аминокислот). [c.74]

Сначала получают суспензию сорбента в специфическом для него растворителе. Для очень маленьких хроматограмм предметное стекло микроскопа покрывают слоем сорбента, погружая его в суспензию. Для хроматограмм большего размера на стеклянную пластинку наносят несколько слоев узких лент по обоим краям таким образом, чтобы во время хроматографии они были вертикальными. Число слоев определяет толщину конечного слоя сорбента. Суспензию осторожно наливают на стекло, после чего выравнивают скользящим стеклянным стержнем, который захватывает при этом всю ширину пластинки. Затем пластинку высушивают и ленты удаляют. Пластинки обрабатывают так же, как при хроматографии на бумаге. Образец наносят микропипеткой и высушивают. Пластинку ТСХ помещают в камеру, содержащую растворитель, и проявляют восходящей хроматографие (рис. 8-11). После того как фронт растворителя почти достигнет верхнего края, пластинку вынимают из камеры и сушат. Для получения двумерной хроматограммы высушенную пластинку можно повторно хроматографировать под прямым углом в другом растворителе. Положение пятен, как и при хроматографии на бумаге, определяют по окраске, по флуоресценции или при опрыскивании различными реагентами, которые реагируют с веществами в пятне с образованием окрашенных продуктов. Обычно используют следующие реагенты нингидрин для аминокислот, родамин В для липидов, хлорид сурьмы для стероидов и терпенов, серную кислоту с последующим нагреванием практически для всех органических соединений (происходит обугливание), перманганат калия в серной кислоте для углеводородов, анисовый альдегид в серной кислоте для углеводов, пары брома для оле-финов и т. д. Вещества можно элюировать путем соскребания [c.188]

Рис. 25. Установка для нисходящего хроматографирования в камере для получения двумерных хроматограмм

Для получения двумерной хроматограммы применяют квадратные листы бумаги. Каплю исследуемого раствора вначале наносят на бумагу в ее левом углу (рис. 146, а), а затем пятно высушивают. Далее нижний край бумаги опускают в один из растворителей и хроматографируют по восходящему методу. Как только фронт растворителя достигнет верхнего края бумаги, хроматографирование прекращают, бумагу высушивают и поворачивают на 90° (рис. 146, б). В таком положении бумагу помещают в другой сосуд для хроматографирования, опускают ее нижний край во второй растворитель и хроматографируют по восходящему методу, как и в первом случае. После высушивания хроматограммы ее проявляют заранее выбранным проявителем (рис. 146, в). [c.354]

Если при помощи подвижной фазы выбранного состава не удается разделить анализируемую смесь, прибегают к способу двумерной хроматограммы. Для получения двумерной хроматограммы применяют квадратные листы бумаги размером 20X20, 30X30 или 40X40 см. В начале опыта каплю исследуемого раствора наносят на бумагу в ее левом углу на расстоянии 5 см от краев (рис. 11.5, а). После высушивания образовавшегося пятна бумагу помещают в сосуд для хроматографирования, опускают нижний край бумаги в один из выбранных растворителей и производят хроматографирование восходящим способом. После того как фронт подвижной фазы достигнет заданного предела в верхней части бумаги, хроматографирование прекращают, бумагу высушивают и поворачивают ее на 90° против часовой стрелки. При этом место нанесения капли исследуемого раствора окажется справа, а линия, по которой происходил подъем зон анализируемых веществ, образует новую стартовую линию (рис. 11.5,6). В таком положении бумагу помещают снова в сосуд для хроматографирования и опускают ее нижний край в подвижную фазу иного состава и хроматографируют по восходяще.му методу. По достижении фронтом новой подвижной фазы заданной высоты хроматографирование прекращают, бумагу высушивают и проявляют. Получают двумерную хроматограмму такого типа, как изображено на рис. 11,5, в. Двумерная хроматография значительно расширяет возможности распределительной ЖЖХ. [c.219]

Получение двумерных хроматограмм. Очень часто при помощи только одного растворителя не удается разделить сложную смесь. В этом случае используют два растворителя. Для получения двумерных хроматограмм рекомендуется использовать листы размером 20Х Х25, 30X35, 40X45 см в зависимости от размера камеры. Капли исследуемого раствора наносят на расстоянии 5 см. от одного и другого края листа бумаги, бумагу подсушивают и помещают в камеру, содержащую растворитель. В простейшем случае камерой может служить цилиндр, имеющий притертую крышку, не позволяющую испаряться растворителю. [c.85]

Рис. 24. Камера для получения двумерной хроматограммы /—стеклянный цилиндр 2— крышка 3—циливдр из бумаги 4—фронт подвижного растворителя 5—подвижный растворитель.

Иногда одним растворителем не удается разделить все взятые вещества. В таких случаях подбирают второй растворитель и разделение осуществляют путем получения так называемой двумерной хроматограммы. Для получения двумерной хроматограммы берут лист фильтровальной бумаги (примерно 50x50 см), на один из углов которого наносят каплю анализируемого раствора. [c.160]

Иногда одним растворителем не удается разделить все взятые вещества. В таких случаях подбирают второй растворитель и разделение осуществляют путем получения так называемой двумерной хроматограммы. Для получения двумерной хроматограммы берут лист фильтровальной бумаги (примерно 50x50 см), на один из углов которого на-Рис. 20. Вид бумаж- носят каплю анализируемого раствора. Затем лист асл проявле стороной Опускают в растворитель (напри- [c.143]

ТСХ пептидов. Хорошие результаты были получены на пластиковых листах и стеклянных пластинках, покрытых тонким слоем порошкообразной целлюлозы, а также на пластинках и пластиковых листах с тонким слоем силикагеля. По сравнению с хроматографией на бумаге продолжительность процесса тонкослойной хроматографии весьма невелика (от 1 до 2 час), образующиеся пятна имеют четкие границы и небольшой размер, что обеспечивает высокое разрешение и чувствительность. Для ТСХ на порошкообразной целлюлозе можно использовать те же системы растворителей, что и для хроматографии на бумаге. Некоторые системы растворителей, рекомендуемые для этого вида ТСХ пептидов, а также для ТСХ на силикагеле, приведены в табл. 6. Системы С, Т, У и Ф предложены Нитецкнм. Систему С применяют для малоподвижных соединений система Т — наилучшая из всех систем и очень удобна для получения двумерных хроматограмм. Она примерно в 3 раза более устойчива, чем системы, содержащие бутанол-1. Система У — очень устойчивая полярная система, она пригодна только для ТСХ (не для хроматографии на бумаге). Система Ф обеспечивает ту же величину подвижности, что и система К, но дает лучшее разрешение и очень удобна для разделения диастереоизомеров. Для нейтральных незащищенных пептидов подвижности в этих системах (относительно обычно используемой системы К) таковы [91] С > Т > > У > К = Ф. Для очень кислых пептидов их относительные подвижности на бумаге и при ТСХ на силикагеле различны на бумаге Т>С>К = Ф У, на силикагеле С > Т > У = К. [c.140]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология