Микромоль

Определение количественного содержания ферментов в биологических объектах представляет известные трудности, поскольку, за редким исключением, ферменты в тканях присутствуют в ничтожно малых концентрациях. Поэтому о количестве ферментов судят по скорости катализируемой реакции в определенных, согласованных условиях измерения. При оптимальных условиях температуры, pH среды и полном насыщении фермента субстратом скорость катализируемой реакции пропорциональна концентрации фермента. О скорости ферментативной реакции судят или по скорости убыли субстрата, или по скорости образования продукта реакции. Для выражения концентрации фермента и количественной оценки его активности в условных единицах Комиссией по ферментам Международного биохимического союза была рекомендована стандартная международная единица (Е или Ц) за единицу активности любого фермента принимается то количество его, которое в оптимальных условиях катализирует превращение 1 микромоля субстрата или образование 1 микромоля продукта в минуту (мкмоль/мин) . [c.157]

Пробы 5 и 6 ставят для учета нарастания неорганического фосфата в процессе инкубации за счет возможного фосфатазного расщепления глюкозо-1-фосфата. Количество неорганического фосфата, определенное в этих пробах, вычитают из 1—4 проб. На основании полученных данных можно рассчитать процент превращения глюкозо-1-фосфата в гликоген под влиянием фосфорилазы а и фосфорилазы Ь в исследуемых мышцах, выражая прирост неорганического фосфата в микромолях в минуту на 1 г сырого веса ткани. [c.59]

Оно выражается числом микромолей на 1 или числом молекул на 100 А . [c.440]

В воде во время облучения устанавливается некоторая стационарная концентрация водорода и перекиси водорода, зависящая от интенсивности облучения. Концентрация эта очень мала — порядка нескольких микромолей на литр. [c.552]

ДЛЯ которого необходимо всего 0,1—0,2 микромоля пептида [c.385]

Собранный Микромоль помещают в термостат и выдерживают установленное оптимальное время. [c.155]

Инструкция к прибору Микромоль , тип ОХ-103. Будапешт, 1978. 14 с. [c.157]

Обозначим через а1 и аг полные поверхностные концентрации компонентов мономолекулярного бинарного раствора (обычно их выражают в микромолях на 1 м или числом молекул на 1 нм ). Сумма а1 + И2 — общее число молей обоих компонентов на единице поверхности адсорбента, т. е. в адсорбированном растворе рассматриваемой модели. Если мольная доля компонента 1 в равновесном трехмерном растворе составляет Хи то в отсутствие преимущественной его адсорбции, т, е. при Г1 = 0, общее содержание компонента 1 в мономолекулярном двухмерном растворе составило бы (а1-1-а2)х1. В действительности же из-за межмолекулярных взаимодействий в адсорбционной системе в поверхностном растворе общее содержание компонента 1 составляет аь Поэтому в рамках рассматриваемой модели [c.269]

После проявления нингидрином полосу хроматограммы, соответствующую каждой из аминокислот (в кислой системе растворителей — растворы № 1 или № 2 — лучше других разделяются пятна лизина, аргинина и валина), вырезают и сканируют на денситометре при 510 нм. Результаты сканирования оценивают либо по площадям полученных пиков, которые рассчитывают путем умножения высоты пика на его ширину на уровне половины высоты, либо по массам пиков. Для этого пики переводят на кальку. Пики на кальке вырезают и взвешивают. По этим данным строят калибровочный график зависимости площади пика (или его массы) от содержания аминокислоты (в микромолях). [c.137]

Количество карнозина рассчитывают с помощью калибровочного графика, построенного по стандартному раствору карнозина, содержащему от 0,05 до 0,5 мкмоль в пробе. Рассчитывают количество карнозина в микромолях на 1 г ткани. [c.192]

Практически в любом биохимическом исследовании очень важно уметь обнаруживать и точно определять ничтожные количества специфических соединений. Чаще всего для этого используют особые реагенты— индикаторы, которые при взаимодействии со специфическими соединениями определенным образом окрашиваются. Например, для выявления на хроматограмме аминокислот или пептидов, присутствующих в очень малых количествах (доли микромоля), хроматограмму опрыскивают нингидрином (дополнение 8-Е). Если выявляемое соединение находится в растворе, то по интенсивности окрашивания можно определить его количество. Фенолы и концентрированная серная кислота окрашивают сахара (в растворе или на хроматографической бумаге) в красный цвет. Эта реакция лежит в основе колориметрического анализа углеводов. Восстанавливающие сахара выявляют на хроматограммах, опрыскивая последние раствором нитрата серебра. [c.179]

Расчет активности фермента проводят на основании величин начальной скорости реакции при условии наличия прямой пропорциональной зависимости скорости реакции от количества ферментного препарата в пробе. Активность фермента выражают в микромолях окисленного НАДН за 1 мин на 1 г ткани. [c.352]

Все активности выражают в микромолях гидролизованного АТФ за [c.460]

Рассчитывают во всех пробах АТФазную активность в микромолях фосфата неорганического Фн за 1 мин на 1 мг белка. Строят график зависимости скорости реакции от концентрации магния в присутствии ДНФ и без него. [c.474]

Исследование кинетики гидролитического действия липазы поджелудочной железы. О б щ и с сведения. Скорость химической реакции определяется количеством субстрата, подвергшегося превращению в единицу времени. Единицей действия фермента называют то количество его, которое катализирует превращение одного микромоля субстрата в минуту при оптимальных условиях — соответствующей температуре, pH, концентрациях реагирующих веществ и фермента и т. д. [c.187]

МЕ — это такое количество фермента, которое при заданных условиях катализирует превращение одного микромоля субстрата [c.28]

К 1—2 мл крови добавляют равный объем 0,04 н. раствора СНзСООН, нагревают на кипящей водяной бане 2—3 мин, охлаждают я осадок белка отделяют центрифугированием. Центрифугат сливают и упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 0,1—0,2 мл смеси НСООН—СНзСООН—Н2О (7 5 13), нерастворившийся осадок отбрасывают. На хроматограмму наносят 0,01—0,02 мл полученного раствора и стандартные смеси аминокислот и хроматографируют в бута-нолуксусной смеси. После разгонки хроматограммы обрабатывают нингидрином, идентифицируют аминокислоты и проводят их количественное определение. Содержание аминокислот в сыворотке крови выражают в микромолях, миллиграмм-процентах или процентах к небелковому азоту. [c.195]

Максимальное превращение молибдата в окрашенное комплексное соединение наблюдается только при большом избытке пирокатехина [1325]. Четыре микромоля молибдата полностью не переходят в окрашенный комплекс в присутствии даже 192 мкмолей пирокатехина. При условиях фотометрического определения молибдена удается полностью перевести в комплекс с пирокатехином 7 мкмолей Мо. [c.231]

Наконец, следует подчеркнуть, что как для количественного превращения и разделения аминокислот, так и для хорошей воспроизводимости сигналов с достаточной точностью необходима в первую очередь соответствующая калибровка. При этом площади пиков можно было бы непосредственно и надежно сопоставлять с количеством микромолей аминокислот. О ценности методики можно судить только после ее применения для анализа подходящего пептидного гидролизата и сравнения с результатами, полученными другими методами. [c.337]

Способность адсорбента пог.лощать адсорбат характеризуется величиной адсорбции Г. Она определяется как отнощение массы адсорбата, поглощенного единицей массы адсорбента, к удельной поверхности последнего. Как правило, величину адсорбции выражают в мик юмолях на квадратный метр. В тех случаях, когда площадь адсорбирующей поверхности неизвестна и не может быть точно измерена, как, например, у пористых губчатых тел, адсорбцию выражают в микромолях на единицу массы (килограмм) адсорбента. [c.106]

В. Р. Ламм и другие (1970) предложили международную глюкозоизомеризующую единицу активности Ш1у — количество фермента, которое может изомеризовать 1 микромоль глюкозы во фруктозу за 1 мин в растворе, содержащем 2 М глюкозы, 0,02 М MgS04 0,001 М СоС на 1 л при pH 6,84—6,85 (буфер — 0,2 М малеат натрия) при 60 °С. Фруктозу при этом определяют поляриметрическим или цистеинкарбазоловым методом. Основные технологические процессы производства глюкозно-фруктозных сиропов сводятся к следующему рис. 26). [c.136]

Спектры поглощения восстановленной и окисленной форм пиридиновых нуклеотидов существенно отличаются спектр поглощения НАД+ имеет максимум при длине волны 260 нм, спектр поглощения НАДН — при 340 нм. Таким образом, метод сводится к количественному определению убыли или прироста восстановленного никотинамидаденинди-нуклеотида. Для этого регистрируют изменение оптической плотности реакционной смеси при 340 нм. Коэффициент молярного поглощения НАДН (НАДФН) при 340 нм равен 6,22-10 см-. При расчетах исходят из того, что при окислении—восстановлении 1 мкмоль кофер-мента при 340 нм в кювете с расстоянием между рабочими гранями 1 см в 1 мл реакционной смеси оптическая плотность меняется на 6,22 ед. Количество определяемого вещества в пробе (в микромолях) рассчитывают по формуле [c.7]

Осваивая методы определения фруктозо-1,6-дифосфата, полезно определить чистоту препарата его бариевой соли. Навеску, соответствующую 30 мкмоль, растворяют в 5 мл 0,1 н. раствора НС1. 1 мл раствора отбирают для определения фруктозо-1,6-дифосфата по фруктозе. Оставшиеся 4 мл солянокислого раствора бариевой соли фруктозодифосфата используют для получения натриевой соли, хорошо растворимой в воде (см. ниже). Раствор натриевой соли фруктозо-1,6-дифосфата нейтрализуют, доводят водой до 15 мл. В полученном растворе определяют содержание фруктозо-1,6-дифосфата по фруктозе и по фосфату в микромолях, рассчитывают чистоту препарата по фруктозе и по фосфату, сопоставляют данные. Определяют процент потери фрук-тозо-1,6-дифосфата при переводе бариевой соли в натриевую. [c.43]

На полоски хроматографической бумаги шириной 4—5 см на линию старта наносят ш,елочной гидро лизат РНК (10—20 мкл) и растворы нуклеотидов- свидетелей по 0,1—0,15 мкмоль каждого. Электрофорез проводят в течение 5 ч при силе тока 0,5 мА на 1 см поперечного сечения бумаги. Для определения времени окончания электрофоретического разделения можно использовать окрашенный маркер, например 1%-ный раствор ксиленцианола, который движется быстрее самого подвижного компонента смеси. Локализацию рибомононуклеотидов проводят в ультрахемископе. Подвижность нуклеотидов от катода к аноду возрастает в ряду цитидиловая, адениловая, гуаниловая и уридиловая кислоты. Для количественного определения участки электрофореграмм, поглощающие в ультрафиолетовой области, очерчивают простым карандашом, вырезают, измельчают и элюируют нуклеотиды 4—5 мл 0,01 н. раствора НС1 в течение 4—5 ч. В элюатах определяют поглощение на спектрофотометре при длине волны, характерной для каждого нуклеотида (см. Приложение, с. 499), рассчитывают количество их в микромолях и в процентах по отношению к сумме всех нуклеотидов в щелочном гидролизате РНК. [c.181]

При проявлении на хроматограмме карнозина и гистидина диазореактивом ее опрыскивают из пульверизатора диазотированной сульфаниловой кислотой, затем слегка влажную хроматограмму опрыскивают 20%-ным раствором ЫагСОз. Пятна карнозина приобретают интенсивно оранжевую окраску. Окрашенные участки хроматограммы вырезают и элюируют 1%-ным раствором соды. Колориметрируют при 500 нм. Пользуясь стандартным раствором карнозина, строят калибровочный график и рассчитывают содержание дипептида в микромолях на грамм ткани. [c.193]

Активность миозина в пробах рассчитывают в микромолях неорганического фосфата за 1 мин на 1 мг белка. Проводят сопоставление кривой титрования сульфгидрильных групп миозина ПХМБ и кривой изменения его активности при разной степени модификации. Отмечают полную потерю активности ферментом при 100%-ном блокировании SH-rpynn, а также 1,5—3-кратную активацию АТФазы при блокировании до 50% SH-rpynn. [c.399]

Заполнив опытную кювету указанным вышё раствором, добавляют требуемое количество гексокиназы и реакцию начинают внесением исследуемого препарата (митохондрии, митопласты, супернатант S2, внешние мембраны). Реакцию регистрируют 1—2 мин, чувствительность прибора калибруют внесением титрованного раствора H I и рассчитывают удельную активность в микромолях АДФ, превращенного за 1 мин в расчете на 1 мг белка. [c.413]

В кювету спектрофотометра помещают 2 мл среды измерения активности. Включают прибор и выводят перо самописца в крайнее положение. Убедивщись в том, что в отсутствие фермента не происходит изменения оптической плотности среды, добавляют 10 мкл разведенного препарата СУР и регистрируют восстановление СВ, сопряженное с сукцинат убихинон-редуктазной реакцией. Добавляют 0,02 мл 20 мМ ТТА, при этом активность СУР резко тормозится. Рассчитывают каталитическую активность фермента в микромолях окисленного сукцината в минуту на 1 мг белка и степень торможения реакции ТТА. [c.426]

Регистрация активности. А. Кювету спектрофотометра заполняют раствором, содержащим 25 мМ фосфатный буфер, 0,1 мМ ЭДТА, 20 мМ сукцинат калия и 40 мкМ цитохром с, pH 7,4. Устанавливают длину волны регистрации 550 нм, как описано на с. 412. Реакцию начинают внесением активированного препарата ( 2—10 мкг/мл среды измерения) фермента и рассчитывают его активность в микромолях окисленного сукцината за 1 мин на 1 мг белка. Коэффициент молярной экстинкции для восстановленного цитохрома с (vlsso— 55о)= 18. Б. В связи с тем что цитохром с служит акцептором электронов, но не протонов, сукцинат цитохром с-редуктазная активность при pH>6 может быть записана в виде [c.428]

Пять кювет полярографа заполняют раствором, содержащим ,1 М фосфатный буфер (pH 7,6) и цитохром с (100 мкг/мл). Объем раствора в каждой кювете — 2 мл. В пробы с помощью микропипеток добавляют сукцинат в конечных концентрациях 0,3 0,6 1,25 5,0 мМ. Измеряют скорость дыхания в присутствии различных концентраций субстрата. Для этого кювету устанавливают в штативе полярографа, погружают в нее электроды. После установления начального значения тока добавляют 0,05 мл суспензии препарата Кейлина—Хартри (1,5 мг/мл) и регистрируют поглощение кислорода. Во всех пробах рассчитывают скорость дыхания в микромолях поглощенного кислорода за 1 мин на 1 мг белка. [c.436]

Фаза твердого аморфного кремнезема, по-видимому, могла появиться в растворе в виде коллоидных частиц или жС как эсажденный слой аморфного кремнезема в некоторых областях поверхности кристаллического образца. Штобер использовал экспериментальное значение величины g, равное 0,011 % (110 мкг S1O2 в 1 мл). На основании известной величины поверхностной концентрации, равной 10 микромоль Si(0H)4 на [c.57]

Мэсон и Кронин 155] также изучали роль полифенолоксидазы в биосинтезе лигнина из кониферилового спирта. Они обрабатывали в аппарате Варбурга раствор 4 микромолей кониферилового спирта в 2,8 мл 0,1 н. буферного фосфатного раствора при pH 6,8 и 4 (160 катехолазных единиц) грибной полифенолоксидазы Фрейденберга. [c.819]

Деслер и БаУзр [487] удаляли перекиси из этилового и бутилового эфиров и п-диоксана пропусканием этих соединений через КОЛОНКУ, заполненную активированной окисью алюминия. При такой обработке уменьшается также содержание альдегидов. Отношение окиси алюминия к объему эфира выбирали в зависимости от содержания перекисей 82 г окиси алюминия в колонке диаметром 1,9 см и высотой ЗЗсл оказалось достаточно для полной очистки 700 мл этилового эфира, содержащего 127 микромолей перекисей на литр. [c.339]

О)вершенно очевидно, что число необходимых для превращения стадий должно быть минимальным, так как в результате многочисленных операций могут происходить большие потери и воспроизводимость экспериментов будет ухудшаться. В идеале было бы желательно производить модификацию аминокислот в одну стадию, но в случае полифункциональных аминокислот, как правило, на это рассчитывать не приходится. Большое число реакций при модификации не выгодно и с другой точки зрения обычно в аминокислотном анализе используются очень небольшие количества материала — несколько микромолей или даже меньше. Следовательно, превращение аминокислот необходимо проводить на микроуровне. С помощью газохроматографических детекторов с обычной чувствительностью определять такие небольшие количества довольно легко. К тому же вполне возможно, по крайней мере теоретически, увеличить чувствительность методов детектирования. Поэтому в настоящее время основные трудности связаны не с газохроматографическим детектированием производных аминокислот, а с микропрепаративным превращением аминокислот. [c.310]

Молекулярная масса большинства целлобиогидролаз лежит в пределах 30-70 кДа [2, 54-57]. В состав ферментов из различных источников, как правило, входит углеводная часть, основным компонентом которой является манноза [16, 57]. Целлобиогидро-лазы ингибируются целлобиозой (константа ингибирования обычно составляет десятки микромолей), а иногда глюкозой [15, 52, [c.64]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология