Хроматограммы бумажные

В зависимости от природы твердого носителя и свойств жидкой неподвижной фазы, а также способа получения хроматограмм известно три варианта распределительной хроматографии колоночная, бумажная и тонкослойная. [c.154]

Для разделения аминокислот, образовавшихся в результате гидролиза полипептида, еще Э. Фишер предложил использовать фракционную вакуумную перегонку их эфиров. Этот метод требует сравнительно большого количества вещества. В самое последнее время он, однако, вновь становится очень актуальным, так как газовая хроматография позволяет разделить ничтожные количества смеси эфиров аминокислот. Широкое применение для разделения смесей аминокислот нашла за последние годы бумажная хроматография. Если требуется определить качественный состав смеси аминокислот, то проводят двухмерное хроматографирование на листе бумаги и проявляют хроматограмму нингидрином, причем каждая аминокислота дает окрашенное пятно. [c.384]

Это так называемая тонкослойная хроматография, получившая за последнее десятилетие широкое применение в химии и особенно Б биохимии благодаря значительно большей скорости выполнения анализа в сравнении с бумажной хроматографией. Вид хроматограммы и техника выполнения при этом аналогичны. Преимущество тонкослойной хроматографии перед бумажной, кроме значительно большей скорости анализа, состоит в значительно меньших размерах аппаратуры и Б возможности разделения примерно на порядок больших количеств смесей без существенного ухудшения качества разделения. Это преимущество позволяет применять тонкослойную хроматографию как препаративный метод выделения индивидуальных продуктов из сложной смеси в чистом виде с целью дальнейшего их исследования другими методами. [c.11]

Рис. 99. Прибор для бумажной хроматографии и хроматограмма смеси веществ 1 — сосуд 2 — крышка с прорезью на внутренней стороне для крепления листа бумаги 3 — лист хроматографической бумаги, подвешенный к крышке 4 — растворитель 5 — линия старта 6 — пятна 7 — фронт растворителя

Рис. 24.1. Вид бумажной хроматограммы и определение величины Л/

В самой ранней работе Андерсона и сотр.1 хроматографирование проводили на двух бумажных полосках (ватман № 1). Пробу наносили на бумагу в виде раствора в ацетоне. Для элюирования использовали воду и четыреххлористый углерод для проявления хроматограммы — раствор фторбората л-нитробензол-диазония. Количество примеси рассчитывали, замеряя площадь ее пятна и сравнивая с площадью пятна стандартного раствора. Для определения примесей, содержащихся в количестве менее 1%, их сначала концентрировали 5— 6-кратной перекристаллизацией из горячего хлорбензола. Авторам удалось выделить и идентифицировать три примеси орто-пара-изомер дифенилолпропана, соединение Дианина и трис-фенол ]. [c.186]

Рис. 42. Получение круговой бумажной хроматограммы

Вырезают бумажные полосы шириной 2,5—3 см и длиной 20 см от точки А (см. рис. 15, стр. 113). На узкую часть вырезанных образцов бумаги наносят каплю приготовленного раствора аминокислот и полосы бумаги для получения восходящей хроматограммы помещают в камеру (см. рис. 14, стр. 113), на дно которой предварительно наливают смесь н-бутилового спирта, уксусной кислоты и воды (4 1 5). Дают растворителю подняться до верхних концов бумажных полос. По окончании развития хроматограммы бумажные полосы вынимают из камеры, сушат и проявляют, погружая в 0,2%-ный раствор нингидрина в ацетоне. Для развития окраски хроматограммы помещают в сушильный шкаф при 60 °С на 15—20 мин. Путем сравнения хроматограмм, полученных на различных образцах бумаги, и определения Rf для каждой аминокислоты решают вопрос о разделительной способности изученных образцов бумаги. [c.140]

Бумажная хроматография. Метод прост по аппаратуре и чрезвычайно эффективен для аналитических целей, что приводит к его использованию практически во всех химических лабораториях. Для получения бумажной хроматограммы небольшое количество раствора (1—3 мм ) исследуемой смеси наносят в виде пятна на расстоянии см от конца полоски хроматографической бумаги, которую затем этим концом опускают в специальный подвижный растворитель. В зависимости от применяемого метода подвижный растворитель может поступать сверху или снизу (нисходящая и восходящая бумажная хроматография). Время развития хроматограммы составляет, как правило, 8—20 мин. Бумага может быть расположена горизонтально, как, например, при использовании круглых фильтров. При этом раствор и подвижный растворитель помещаются в центр фильтра, а хроматографические зоны располагаются в виде концентрических кругов. Бумага должна нахо- [c.245]

Анализ хроматограмм. Качественный анализ. При качественном анализе хроматограмм бумажную полоску извлекают из камеры,, высушивают и, если образуются видимые зоны, проводят визуальное наблюдение. Но зачастую зоны невидимы, и хроматограммы требуется проявлять соответствующим раствором специфического реактива. По характерной окраске образующихся цветных пятен судят о составе анализируемой смеси. Например, смесь, состоящую из ионов железа (П1), меди (П) и цинка, после разделения на бумаге проявляют раствором гексацианоферрата (И) калия. Образуются окрашенные пятна железо (И1) дает синее пятно, медь (П) — коричневое, цинк проявляется в виде белого пятна на красноватом фоне. [c.112]

Рис. 3. Двумерная бумажная хроматограмма смеси аминокислот (по Крамеру)

Применялась следующая методика приготовления бумажной хроматограммы и фиксации ее на цветном снимке. Приготовляли полоски фильтровальной бумаги стандартного размера — ширина [c.487]

Как и Б случае бумажной хроматографии, положение пятна на тонкослойной хроматограмме характеризуется фактором замедления Я/. Слой сорбента может быть закреплен на пластинке при помощи вяжущих веществ. Такую пластинку с закрепленным слоем можно использовать не только для восходящей, но и для нисходящей хроматографии. [c.51]

Вещества характеризуются фактором удерживания Rf (рис. 59). Он равен отношению расстояния АС, пройденного растворенным веществом на бумаге, к расстоянию АВ, пройденному фронтом растворителя. Для качественного анализа бумажных хроматограмм используют способ свидетелей , нанося на одной и той же полосе бумаги пятно смеси исследуемых веществ и отдельно пятна набора веществ, присутствие которых в смеси предполагается. После проявления хроматограммы сопоставляют положение пятен свидетелей с положением пятен неизвестных веществ. [c.255]

В результате действия противоположных сил происходит разделение отдельных компонентов смеси. Одни компоненты движутся быстрее вслед за фронтом поднимающегося растворителя, другие в большей степени отстают, а некоторые вообще остаются на том же месте, где была нанесена капля с испытуемым раствором. Очень важно, что при некоторых постоянных условиях можно найти для каждого компонента характерную величину Я], равную отношению высоты подъема данного компонента к высоте подъема фронта растворителя. Поэтому, измерив после опыта высоту подъема растворителя, можно рассчитать места на полоске бумаги, где будут находиться разделяемые-компопенты. После разделения бумажную хроматограмму обычно проявляют . Далее полоску разрезают на куски. В отдельных кусках опреде. ляют тем или другим методом количественное содержание компонентов [c.71]

Когда фронт растворителя переместится на определенное расстояние (обычно 10 см), пластинку вынимают из камеры и высушивают. Разделенные вещества можно идентифицировать различными методами. Мерой скорости передвижения веществ, в бумажной хроматографии является — относительная величина, зависящая от условий определения. Хроматограмма дает лишь информацию о распределении пятен, так называемый рисунок пятен. [c.88]

Хроматографический анализ органических веществ развивался попутно с хроматографией неорганических веществ. В 1935—1936 гг. появились первые сообщения об успешном применении метода Цвета в анализе синтетических красителей. Из жидкофазных вариантов хроматографии наиболее широкое применение в органической и биологической химии получила бумажная хроматография. Это тонкий микрометод, позволяющий разделять смеси нескольких десятков компонентов на полоске пористой бумаги, которая выполняет роль хроматографической колонки. Хроматограмма получается в виде пятен, которые имеют окраску, соответствующую природной окраске разделяемых компонентов смеси. При анализу бесцветных веществ пятна появляются на бумаге после опрыскивания ее подходящим реактивом. Например, при анализе аминокислотного состава белков после их гидролиза бумагу опрыски- [c.10]

Круговая хроматография. Для получения круговой хроматограммы в центр круга хроматографической бумаги вносят каплю исследуемого раствора. Работу удобно проводить в эксикаторе. Диаметр бумажного круга должен быть на 2—3 см больше диаметра нижней узкой части эксикатора. Круг укладывают над узкой частью [c.75]

Проявление бумажных хроматограмм. В большинстве случаев хроматограмма на бумаге после высушивания остается бесцветной. Поэтому полученные хроматограммы проявляют. Для этой цели служат растворы различных веществ, при взаимодействии которых с компонентами анализируемой смеси образуются окрашенные соединения. Качественно обнаружить вещества в проявленной хроматограмме можно и по люминесценции в ультрафиолетовом свете. [c.76]

Аппаратура для бумажной хроматографии. Основными элементами аппаратуры для БХ являются хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки и элюирования, пульверизаторы, лампы для облучения хроматограмм, приспособления для измерения / /, планиметры и денситометры для количественных определений. [c.353]

Обнаружение зон. Для обнаружения соединений, флуоресцирующих при облучении светом, применяют физические, но чаще всего химические методы обрабатывают хроматограмму после разделения веществ газами аммиаком, бромом, иодом — или опрыскивают реагентами, которые применяют в бумажной хроматографии. Для обнаружения биологически активных соединений (витаминов, анти [c.358]

Аппаратура для БХ включает хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки, пульверизаторы, сосуды для элюента, лампы для облучения хроматограмм и др. Хроматографические камеры значительно различаются по форме и размерам, и это в большой степени зависит от характера процесса хроматографирования (восходящее, нисходящее, круговое, двумерное, препаративное), На рис. 9.15 изображена камера для восходящей хроматографии, на рис. 9.16 — аппаратура для нисходящей бумажной хроматографии. [c.239]

Рис. 9.17. Схема готовой бумажной хроматограммы

В проделанном опыте вы обнаружите, что произойдет разделение смеси вдоль бумажной полоски на ряд веществ, различающихся по цвету. Полученное изображение на бумаге называется хроматограммой, а сам метод подобного разделения смесей носит название хроматографического анализа. [c.437]

Для одномерных хроматограмм используют бумажные полосы шириной 4,5—5 см и длиной 30—50 см. Для получения двумерной хроматограммы применяют листы бумаги размером примерно 20 X 25— 40 X 45 см. Восходящие хроматограммы получают при перемещении подвижного растворителя через норы бумаги снизу вверх, а нисходящие— сверху вниз. [c.284]

Для получения круговой хроматограммы используют бумажные круги. Подвижный растворитель перемещается от центра круга к периферии. [c.284]

В качестве герметических камер могут быть использованы также стеклянные аквариумы. Различные камеры для получения бумажных хроматограмм показаны на рис. 114. [c.293]

На бумагу, содержащую в порах неподвижный растворитель— воду, наносят анализируемый раствор смеси катионов и промывают хроматограмму подвижным растворителем. Если растворимые вещества имеют в данной паре растворителей разные коэффициенты распределения, то происходит разделение анализируемых катионов и выделение их в разных частях бумажного листа. Путем проявления полученной хроматограммы специфическими реагентами определяют вещества, входящие в анализируемую смесь. [c.298]

Круг переносят в камеру так, чтобы бумажный конус был погружен в подвижный растворитель. Камеру накрывают крышкой и оставляют для развития хроматограммы на 1 — 1,5 ч. Затем хроматограмму вынимают из камеры, высушивают на воздухе и по распределению и цвету [c.303]

Получение бумажных хроматограмм. Каплю исследуемого раствора наносят на хроматографирующую бумагу и ждут, когда она впитается, после чего на бумагу наносят каплю воды для промывания и расширения зон образуется первичная хроматограмма. Первичную хроматограмму высушивают на воздухе и по цветным зонам фиксируют наличие тех или иных ионов. Для обнаружения ионов, не дающих окраску зон на первичной хроматограмме, ее проявляют соответствующими реактивами, внося их в центр хроматограммы по 1—5 капель, избегая, однако, избытка реактива. [c.201]

Описан также метод бумажной хроматографии , позволяющий определять примеси в количестве менее 0,03% без предварительного их концентрирования. Пробу дифенилолпропана (метанольный раствор) наносили на фильтровальную бумагу, пропитанную трикрезилфосфатом. В качестве элюэнта использовали водный раствор тринатрийфосфата. Для проявления окраски хроматограмму опрыскивали раствором фторбората п-нитробензолдиазония. Концентрацию каждой примеси рассчитывали, определяя ее оптическую плотность. На хроматограмме было обнаружено девять компонентов, из которых были идентифицированы ранее известные фенол, дифенилолпропан и его орто-пара-изомер, соединение Дианина и трис-фенол I. Сделано предположение о присутствии трис-фенола II и орто-орто-изомера дифенилолпропана. Однако эти компоненты выделены не были и поэтому данные об их характеристике отсутствуют. Этот метод не дает возможности определять фенол и поэтому для обнаружения фенола авторы применяли метод Коппешаара (стр. 194). [c.187]

Хроматографический анализ органических веществ развивался попутно с хроматографией неорганических веществ. В 1935— 1936 гг. появились первые сообщения об успешном применении метода Цвета в анализе синтетических красителей. Из жидкофазных вариантов хроматографии наиболее широкое применение в органической и биологической химии получила бумажная хроматография. Это тонкий микрометод, позволяющий разделять смеси нескольких десятков компонентов на полоске пористой бумаги, которая выполняет роль хроматографической колонки. Хроматограмма получается в виде пятен, окраска которых соответствует природной окраске разделяемых компонентов смеси. При анализе бесцветных веществ пятна проявляют, опрыскивая бумагу реактивом, образующим с разделяемыми компонентами окрашенные соединения. Например, при определении аминокислотного состава белков после их гидролиза бумагу опрыскивают раствором нин-гидрина, в результате чего на поверхности бумаги появляются пятна розового цвета, соответствующие индивидуальным аминокислотам (см. рис. 1.2). Если разделяемые бесцветные вещества обладают способностью к флуоресценции, бумагу облучают ультрафиолетовыми лучами (кварцевой или ртутной лампой) и тогда хроматограмма становится видимой. Этот случай можно наблюдать при разделении смеси антрахинонов, пятна которых в ультра- [c.9]

Для опыта лучше всего использовать бумагу, вырезанную в виде круга. Раствор анализируемых веществ в этом случае наносят по каплям в центр круга. Каждую следующую каплю раствора наносят после впитывания предыдущей. Раствор растекается по бумажному кругу от центра к периферии. Образующиеся осадки вследствие различной растворимости располагаются в виде концентрических колец. Каждое кольцо образуется осадком определенного вещества. Полученную хроматограмму промывают, прикасаясь к центру круга капилляром или микропипеткой, наполненной чистым растворителем. При этом вследствие действия капиллярных сил растворитель растекается от центра к периферии, что способствует перемещению осадков и приводит к их разделению. Если образуются бесцветные осадки, их проявляют, опрыскивая бумагу после ее высушивания раствором веществ, дающих окрашенные осадки. [c.168]

Большие возможности в органическом анализе представляет сочетание полярографии с хроматографией — х р о м а т о п о л я-рография — где полярографические датчики анализируют последовательно выходящие из хроматографической колонки вещества. В приложении к бумажной и тонкослойной жидкостной хроматографии этим методом можно определять вещества с близкими значениями У /, избегать проявления хроматограмм, заменяя его полярографированием вдоль линии подъема раствора. [c.279]

Важной характеристикой в бумажной хроматофафии является величина Л/ = f Jfx, где / - смещение зоны компонента Л -смещение фронта растворителя (рис. 24.1). В начальный момент времени хроматофафируемая проба Л наносится на начальную (стартовую) линию бумажной полоски, которую погружают нижним концом в подвижную фазу (растворитель). При движении по бумаге растворитель увлекает компоненты пробы, и они движутся с разной скоростью, определяемой коэффициентом распределения вещества между подвижной и неподвижной жидкими фазами. Если компоненты окращены, через некоторое время на хроматограмме можно будет увидеть отдельные цветные пятна. Компонент 1 будет иметь Л/, = / /Л. компонент 2 - [c.293]

Рис. 4. Бумажная хроматограмма аптрахи-нонов, проявленная в ультрафиолетовом свете с длиной волны 360 А .

Рис. 1.3. Бумажная хроматограмма антрахинонов, проявленная в ультрафиолетовом свете с длиной волны 36 нм

Для бумажной хроматографии применяют специальные установки. Простейшая установка представляет собой стеклянный цилиндр, в который помещают кювету с растворителем, опустив в нее один конец полосы фильтровальной бумаги. Чаще всего кювету, содержащую растворитель, располагают так, чтобы вер.хний край бумажной хроматограммы находился в этой кювете, т. е. используют нисходящий поток растворителя. Однако применяют и восходящий поток растворителя. [c.293]

Внутренние и внешние хроматограммы. Вопрос получения внутренних или внешних хроматограмм при разделении веществ имеет важное значение для последующего качественного и количественного определения веществ. Внутренние хроматограммы получают в случае разделения или идентификации веществ непосредственно на стационарной фазе. В этом случае прояви ление хроматограммы заканчивается прежде, чем подвижная фаза доходит до конца слоя сорбента. Если же элюирование продолжают до тех пор, пока вещество вместе с подвижной фазой не достигнет конца стационарной фазы, и исследуют затем небольшие порции элюата, то получают внешнюю хроматограмму при построении зависимости концентрации элюата от его объема, (мл). В случае окрашенных компонентов или при отличии свойств компонентов (различной радиоактивности, способности абсорбировать УФ- или ИК-излучение) от свойств стационарной фазы внутреннюю хроматограмму можно определить визуально или зарегистрировать на стационарной фазе. Хроматограммы такого типа получают в бумажной и тонкослойной хроматографии, отчасти и в колоночной. Бесцветные соединения можно проявлять, химическим путем. Качественный анализ веществ проводят, оценивая за медление передвижения анализируемого вещества относительно движения фронта растворителя. Для этого сравнивают путь, пройденный веществом, с путем, пройденным фронтом растворителя, и отношение между ними обозначают через [c.345]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология