нуклеозид фосфорилирующая способност

Использование дихлорфосфитов — одно из последних достижений практического полинуклеотидного синтеза [40, 41]. При этом применяется активированный фосфорилирующий агент и, таким образом, отпадает необходимость в конденсирующем агенте. Однако в качестве фосфорилирующего агента выступает ие фосфат, а фосфит, повышенная реакционная способность которого делает возможным одностадийное превращение in situ нуклеозида O свободной З -гидроксильной группой в фосфомоноэфпр, а затем в фосфодиэфир путем взаимодействия со свободной 5 -гид-роксильной группой второго нуклеозида, и наконец образуется фосфат в результате быстро протекающего окисления иодом. Реакционная способность хлорфосфита так велика, что обе реакции фосфорилирования проводят при пониженной температуре. Вся последовательность операций занимает меньше одного дня (а время имеет большое значение при синтезе длинных полинуклеотидов). Ниже приведена схема одностадийного синтеза защищенного тимидилил- (3 50-тимидина. о [c.178]

Образование фосфодиэфирной связи — термодинамически невыгодный процесс, поэтому для его осуществления необходимо сначала перевести нуклеотиды в активное состояние, а затем ввести конденсирующий агент, способный активировать фосфатную группу. Чаще всего исходными соединениями при образовании фосфодиэфирной связи служат нукле-озид-3 -фосфат и нуклеозид со свободной 5 -ОН-группой. В этом случае фосфорилируется более реакционноспособная первичная гидроксильная группа. Для фосфорилирования нуклеозида, как правило, применяют хлорфосфаты. [c.281]

Реакции со спиртами. В противоположность литературным данным об отсутствии фосфорилирующей способности нуклеотидамидов по отношению к нуклеотидам (нуклеозидам) данные, полученные в настоящей работе, свидетельствуют о том, что нуклеотидо-(Р->Ы)-аминокислоты очень легко реагируют с гидроксильной группой нуклеозидов. Эта группа, однако, должна быть удобно расположена по отношению к нуклеотидопептидному атому фосфора. [c.379]

Добавление некоторого ограниченного числа нуклеотидных единиц к концу молекулы имеющегося полирибонуклеотида не может рассматриваться как полинуклеотидный синтез. Тем не менее эта реакция близка к нему, имеет большое значение и хорошо сейчас изучена. В 1956 г. было показано, что в присутствии фосфорилирующей системы Р -аденозин-5 -мопофосфат целиком включается в РНК в цитоплазме печени крыс [149]. После гидролиза диэстеразой змеиного яда был получен меченый 5 -АМФ, а после щелочного гидролиза — меченые цитидип-2 - и цитидин-З -монофосфаты. Это говорит о том, что в РНК АМФ преимущественно присоединяется к ЦМФ. Подобные наблюдения на различных биологических объектах были проведены многими исследователями. Эти данные наряду с данными о том, что основная часть включенного аденина освобождается после щелочного гидролиза в виде нуклеозида, свидетельствуют о том, что АМФ присоединяется к концу цепи РНК. На важность этих наблюдений впервые обратили внимание Замечник, Хоглэнд и их сотрудники [150—152] в Бостоне, работавшие с растворимой, т. е. транспортной, РНК (s-PHK) цитоплазмы печени крысы. s-PHK отличается от РНК рибосом или микросом своеобразной способностью акцептировать нуклеотиды, присоединяясь к ним своей концевой группой, Такое присоединение нуклеотидов к концу цепи РНК обязательно предшествует прикреплению аминокислот в процессе биосинтеза белка. Все s-PHK из тканей животных, дрожжей и бактерий ведут себя в этом отношении одинаково. [c.251]

Нуклеотиды обычно синтезируют направленным фссфорилированием нуклеозидов. Некоторые из нуклеотидов получают конденсацией азотистого основания с фосфатом моносахарида. Основные трудности, возникающие при фосфорилировании, связаны с выбором мягкого фосфорилирующего. агента, не вызывающего изменений лабильной молекулы нуклеозида, а также с необходимостью избирательно защиты гидроксильных групп. Последнее условие объясняется малым различием в реакционной способности гидроксильных групп углеводной части молекулы. Несмотря на большую реакционную способность первичной гидроксильной группы она не может избирательно фосфорилироваться в присутствии незащищенных 2 - и З -гидроксилов рибофуранозы. Получение нуклеозид-2 - или З -фосфатов представляет еще более сложную проблему в связи с чрезвычайно большим сходством в химическом поведении 2 - и З -гидроксиль-пых групп. [c.368]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология