Тимидин трифосфат ТТФ синтез

В частности, они изучали разные этапы включения тимидина в высокополимерную ДНК. Как показывают их результаты, приведенные в табл. 1, облучение в большей степени снижает активность синтеза высокополимерной ДНК, чем реакции образования моно- или трифосфата. Авторы пришли к выводу, что в их экспериментальной модели облучение, по-видимому, в большей мере влияет на реакцию полимеризации ДНК, чем на две предшествующие реакции, в которых участвуют киназы. [c.253]

Вновь синтезированную ДНК идентифицируют по метке вводимой в ближайшую к сахарному кольцу фосфатную группу нуклеозидтрифосфата, и по метке , вводимой с тимидином. После осаждения кислотой и отмывки осадка от адсорбированных на нем растворимых радиоактивных дезоксирибонуклеоти-дов получается чистая радиоактивная ДНК. Этот продукт содержит все четыре дезоксирибонуклеотидных остатка, связанных 3 —5 -диэфирной связью, так же как в ДНК. После проведения реакции вновь синтезированная ДНК составляет более 90% всей ДНК в реакционной смеси, т. е. количество ее увеличивается в 10—20 раз. Как седиментационные и вискозиметрические исследования нативного и денатурированного материалов, так и измерения скорости увеличения поглощения после воздействия ДНК-азой указывают на то, что ДНК-затравка и вновь синтезированная ДНК очень близки по своим свойствам. В качестве затравки может быть использована ДНК животных, растений, бактерий или вирусов. РНК, денатурированная кислотой ДНК или ДНК, обработанная ДНК-азой, оказываются не эффективными. Нельзя также использовать дезоксирибонуклеозиддифос-фаты вместо моно- или трифосфатов или же рибонуклеотиды вместо дезоксирибонуклеотидов. Если в раствор добавляется рибонуклеаза, синтез проходит нормально, но добавление в раствор пирофосфата подавляет его, так как в присутствии пирофосфата процессы, обратные реакции синтеза, протекают более интенсивно. Синтез идет по следующей схеме [c.330]

Как и в случае адениновых нуклеотидов, широкое распространение имеют 5 -фосфаты, 5 -пирофосфаты и 5 -трифосфаты цитидина, гуанозина и уридина [13—16]. Они являются промежуточными соединениями при биосинтезе рибонуклеиновых кислот. Трифос-фаты участвуют также в биосинтезе ряда диэтерифицированных пирофосфатных производных кроме того, они заменяют АТФ в качестве фосфорилирующего агента или кофермента в некоторых ферментативных реакциях [17—21]. Полифосфаты дезоксинуклеозидов также выделены [22—25], и снова, помимо функции непосредственных предшественников дезоксинуклеиновой кислоты, второй нх главной функцией является, вероятно, участие в биосинтезе промежуточных соединений, таких, как тимидин-5 -пирофосфат-глюкоза и дезоксицитидин-5 -пирофосфатхолин. Строение всех этих нуклеозидполифосфатов установлено методами, аналогичными примененным для определения строения АТФ, и подтверждено синтезом. [c.189]

Из Strepto o us fae alis, выращенного на D-галактозе, выделена тимидиндифосфогалактоза синтез осуществляется под действием индуцированной пирофосфорилазы из тимидин-5 -трифосфата и гала-ктозо-1-фосфата [467]. В присутствии соответствующей эпимеразы этот ангидрид находится в равновесии с ТДФ-глюкозой [467, 468]. [c.222]

Для получения тимидин-5 -пирофосфата был использован другой метод, состоящий в синтезе защищенного нуклеозид-5 -бен-зилхлорфосфата с последующей его конденсацией с бензилфосфатом. Такой путь был применен для синтеза тимидин-5 -трифосфата, исходя из дибензилпирофосфата [359] (см. схему на стр. 239). [c.240]

Интересно было проверить наличие того же механизма нолу-консервативной редупликации в лабораторной модели — ферментативном синтезе ДНК по Корнбергу. Для этого был избран в качестве матрицы, или затравки, регулярный полимер АТАТАТ, а в качестве мономеров — смесь трифосфатов аденозина и 5-6 ром-уридина. Последний является залгенителем тимидина, так как дает водородные связи с аденином. Наблюдалась реакция, которую можно символически записать так [c.256]

Приведенные выше характеристики ферментов биосинтеза ТМФ в полной мере относятся и к киназам, фосфорилирующим его до трифосфата. Так, например, отмечено, что экстракт нормальной печени крысы почти не фосфорилирует ТМФ, хотя остальные дезоксимононуклеотиды фосфорилируются нормально. В то же время ТМФ быстро фосфорилируется экстрактом регенерирующей печени [23]. Установлено, что киназы, катализирующие биосинтез ТТФ из тимидина или его монофосфата, отсутствуют в нормальной, но появляются в регенерирующей печени крысы и в других тканях, характеризующихся быстрой скоростью роста. Изучение характера появления ферментативной активности киназ в зависимости от времени после гепатоэктомии показывает, что максимальный уровень их активности совпадает с началом синтеза ДНК [9, 15]. К этому моменту в регенерирующей печени сильно увеличивается активность ДНК-полимеразы — фермента заключительного этапа синтеза ДНК. Значительной ДНК-полимеразной активностью обладает тимус, эмбриональная и опухолевая ткань [14]. [c.121]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология