Тимидин, включение

Для определения процента бластной трансформации учитывают сумму бластов и переходных форм на 100 клеток. Аналогичный подсчет делают в контроле. При наличии специального оснащения митотическую активность определяют по интенсивности включения меченного радиоизотопами тимидина. [c.86]

Тимидин легко включается в клетки, синтезирующие ДНК. поэтому включение меченого тимидина как специфического предшественника ДНК широко используется при изучении биосинтеза ДНК. Быстрое включение N -T или С -Т непосредственно в ДНК было продемонстрировано на крысах [87], зародышах цыплят [93], клетках костного мозга [94], растущих клетках из кончика корня лука [95] и в культуре тканей [96]. При радиоавтографических исследованиях процесса воспроизведения хромосом недавно начали применять тимидин, меченный тритием [39, 97—100], обладающий особыми преимуществами. Ни/ке мы остановимся еще на использовании меченого тимидина при изучении биосинтеза ДНК в бесклеточных препаратах из тканей млекопитающих [101—105]. [c.181]

Для изучения ДНК-полимеразы чаш е всего используют вытяжки из ряда микроорганизмов, особенно из Е. соИ однако фермент этот имеется и в тканях млекопитающих. Как и следовало ожидать. ДНК-полимераза наиболее активна в экстрактах из быстро размножающихся клеток, о чем свидетельствуют приведенные ниже данные о включении Н -тимидина в ДНК в экстрактах из разрушенных ультразвуком тканей кроликов и цыплят [31]. [c.200]

В яйцах, отложенных необработанными комнатными мухами, за 8 часов развития зародыша содержание ДНК возрастает в 70 раз, а в яйцах мух, стерилизованных пищей с добавлением 0,08—0,25% афолата или 0,05 и 0,1% тиоТЭФ,—только в 3 раза [167]. Афолат подавляет синтез ДНК, препятствуя включению тимидина в ДНК клеток семенников [172], ооцитов и питательных клеток в яйцевых трубках [44]. [c.7]

Подавление включения Н -тимидина в ДНК коррелирует с подавлением-роста опухолей тиоТЭФ в живом организме [157]. Небольшое подавление синтеза РНК было показано сниженным включением НЗ-уридина. [c.173]

В частности, они изучали разные этапы включения тимидина в высокополимерную ДНК. Как показывают их результаты, приведенные в табл. 1, облучение в большей степени снижает активность синтеза высокополимерной ДНК, чем реакции образования моно- или трифосфата. Авторы пришли к выводу, что в их экспериментальной модели облучение, по-видимому, в большей мере влияет на реакцию полимеризации ДНК, чем на две предшествующие реакции, в которых участвуют киназы. [c.253]

Анализ кривых доза—эффект для клеток млекопитающих показывает, что в определенных условиях усиление летального эффекта облучения сопровождается уменьшением обоих параметров дозных кривых — 1)о и и (или Од) или одного из них. Эффект зависит главным образом от концентрации препарата и степени его включения, хотя радиочувствительность увеличивается уже при замещении 1—2% тимидина. [c.236]

Митотические клетки, только что собранные с поверхности культуральной чашки, представляют собой синхронную популяцию, которая почти сразу же вступает в фазу 01. Время между сбором клеток и началом массового включения меченого тимидина в ДНК-это и есть продолжительность фазы 01. Продолжая наблюдать за той же клеточной популяцией, можно было бы в принципе определить и длительность фазы Ог, однако с течением времени такая культура десинхронизируется. Более точно можно определить продол- [c.143]

Инкубация в среде без метки <10 мин) уменьшает количество включенного Н-тимидина [c.160]

При радиоавтографическом исследовании зараженных микоплазмой клеток включение тритированного тимидина выявляется по всей клетке, а не только в клеточном ядре. Это происходит в результате деградации тимидина до тимина и включения последнего в ДНК микоплазмы и другие клеточные компоненты. [c.118]

СТГ обладает широким спектром биологического действия. Он влияет на все клетки организма, определяя интенсивность обмена углеводов, белков, липидов и минеральных веществ. Он усиливает биосинтез белка, ДНК, РНК и гликогена и в то же время способствует мобилизации жиров из депо и распаду высших жирных кислот и глюкозы в тканях. Помимо активации процессов ассимиляции, сопровождающихся увеличением размеров тела, ростом скелета, СТГ координирует и регулирует скорость протекания обменных процессов. Кроме того, СТГ человека и приматов (но не других животных) обладает измеримой лактогенной активностью. Предполагают, что многие биологические эффекты этого гормона осуществляются через особый белковый фактор, образующийся в печени под влиянием гормона. Этот фактор был назван сульфирующим или тимидиловым, поскольку он стимулирует включение сульфата в хрящи, тимидина—в ДНК, уридина—в РНК и пролина—в коллаген. По своей природе этот фактор оказался пептидом с мол. массой 8000. Учитывая его биологическую роль, ему дали наименование соматомедин , т.е. медиатор действия СТГ в организме. [c.259]

Ионообменная хроматография обычно применяется в сочетании с другими методами биохимического и физико-химического исследования НК. С.помощью ионообменной хроматографии возможно разделение сложных смесей НК на отдельные компоненты, определение количественного соотношения основных фракций РНК, выявление гетерогенности ДНК по нуклеотидному составу и т. д. В сочетании с изотопными методами хроматографический анализ дает возможность получать профили активности включения метки в НК и непосредственно по этим профилям выявлять быстрометящиеся, т. е. вновь синтезированные компоненты в пределах отдельных фракций ДНК или РНК. Метка ДНК по тимидину и метка РНК по урацилу позволяет более точно определять локализацию этих НК на профиле. [c.76]

Включение тимидина в ДНК протекает в несколько стадий, в течение которых он подвергается с помощью ряда киназ (стр. 185) последовательному фосфорилированию до дТТФ [c.181]

Первое экспериментальное обоснование этой гипотезы могло вытекать из опытов Тейлора по включению в ДНК хромосом специфической метки в виде тимидина (нуклеозида, содержащего тимин), в состав которого был введен изотоп водорода—тритий (Н ). Тритии характеризуется низкой энергией излучения и вследствие этого, в отличие от других радиоактивных изотопов, может быть обиарунчеп достаточно четко в отдельных мелких частях клетки. Исследуемый объект — корешки конских бобов — предварительно обрабатывался тими-днпом, содержащим тритий. Тимидин быстро внедрялся в состав ДНК, причем в обе цепи в одинаковой мере. При делении клеток растущего корешка в процессе митоза каждая из этих цепей служила для образования одной из двух возникающих новых цепей ДНК. С помощью радпоаутографии можно убедиться, что в хромосомах, образовавшихся при первом делении (т. е. в первом поколении), всюду имелась метка, однако теперь она была лишь в одной из цепей. При последующем, втором, делении оказалось, что половина хромосом содержала метку, а другая была лишена ее. Можно представить себе, что распределение метки при этих двух делениях происходит так, как это показано па рис. 6. [c.61]

Далее, при исследовании in vitro включения Н -тимидина в ДНК асцитной карцинол1ы Эрлиха не удалось обнаружить угнетения синтеза ДНК после облучения [40]. В данном случае как ДНК-полимераза, так и система тимидинкиназ оказались устойчивыми к действию радиации. Выше отмечалось, что у асцитных клеток предсинтетический период G очень короткий и синтез ДНК начинается почти сразу после окончания деления. Вероятно, и в данном случае ферменты синтеза ДНК оказываются устойчивыми к радиации. [c.124]

И. В. Филиппович. Вы не совсем правы. Я имел в виду работу Леннерта и Окада, выполненную в 1964 г. Авторы изучали включение С -лн-зина в ядерные белки и Н -тимидина в ДНК ядер регенерируюш,ей печени П vivo после облучения животных в дозе 800 р. Включение лизина в гистон, а также количество гистона в расчете на ядро после облучения не отличались от контроля, а включение тимидина в ДНК сильно угнеталось, В результате, отношение гистоны ДНК увеличивается, а это, как известно, приводит к понижению затравочной активности ДНК- Авторы вовсе не считают этот вывод абсолютно неправомочным , а указывают на то, что этот механизм не является единственным, объясняющим известный факт угнетения синтеза ДНК ядерными белками. Как известно, большую роль в изменении метаболической активности ДНК играют и другие белки ядра, и, в первую очередь, остаточный белок. [c.129]

Рис. 2. Включение тимидина-2-С < в ДНК клеток, облученных в различные сроки после заражения вирусом герпес. Тими-дин-2-С 3 мккюриЬчл. Контакт с изотопом 15 мин.

Предлагаемый метод применим для выделения ДНК из некоторых грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов. Поскольку тимин очень плохо включается в клетки различных штаммов Е. соИ и В. subtilis, вместо него рекомендуется добавлять в среду моченый пукло-озид—(Н -метил)-тимидин. Однако включение тимидина также весьма ограничено, поскольку в культурах этих микроорганизмов он превращается в тимин [1, 2]. [c.171]

ДНК (включение Н -тимидина) в клетках костного мозга мышей. ОБЭ нейтронов с энергией 0.43 Мэв по этому показателю для всех клеток костного мозга оказалась равной 4.1, а для клеток-предшественников красного ряда — 3.6. Величина ОБЭ уменьшалась с ростом энергии и снизилась до 1.2 при использовании нейтронов с энергией 14.1 Мэв (включение метки во все клетки костного мозга) (Tsuya, Окапо, 1967). [c.53]

Наряду с морфологическими изменениями кишечной стенки при облучении нейтронами обнаружены биохимические нарушения, которые могут лежать в основе подавления митотической активности. Оценивая интенсивность синтеза ДНК в клетках кишечника по включению Н -тимидина, удается отметить подавление образования ДНК, причем более интенсивное, чем в органах кроветворения. Если ОБЭ HeiiTpoHOB с энергией 14 Мэв по действию на включение тимидина в клетки селезенки составляет 1.2, то по угнетающему влиянию на ДНК в кишечнике — 1.8. Естественно, что столь выраженное угнетение синтеза ДНК может явиться причиной клеточных нарушений в кишечнике (Tsuya, Окапо, 1967). [c.75]

Нейтроны подавляют синтез ДНК в клетках костного мозга мышей. ОБЭ нейтронов с энергией 0.43 Мэв по угнетаюш ему действию на включение Н -тимидина во все элементы костного мозга равняется 4.1, а в клетки-предшественники эритроцитарного ряда — 3.6. С увеличением энергии нейтронов до 14.1 Мэв их ОБЭ уменьшается до 1.2 (Tsuya, Окапо, 1967). Наблюдается и угнетение включения Fe в клетки костного мозга и селезенки у крыс. Так, через 6 час. после действия разных доз нейтронов деления со средней энергией 0.7 Мэв поглощение радиоактивного железа характеризуется следующими показателями (табл. 27). [c.92]

Рис. 18.4. Дикарион, образовавшийся при слиянии двух клеток. Родительские клетки относятся к двум линиям фибробластов Т8В и 810. Первые взяты от больного амавротической идиотией (синдром Тэя— Сакса). Ядро такой клетки окрашено черным, что отражает включение радиоактивного Н-тимидина. Фибро-

Первоначально эксперименты проводились на растениях — семенах бобовых, фасоли, кукурузы, пшеницы, клубнях картофеля и других растительных объектах. Во всех случаях было обнаружено накопление в облученных организмах радиотоксинов — хинонов, обладающих широким спектром радиомиметического действия. Введение в необлученные растения экстрактов, содержащих хиноноподобные радиотоксины, вызывало угнетение митозов, торможение роста и развития, подавление синтеза ДНК в клеточных ядрах, появление хромосомных аберраций, пикноз ядер, цитолитический распад клеток и другие морфологические и функциональные изменения, характерные для радиационного воздействия. Рассматривая возможный механизм образования и действия радиотоксннов полифенольно-хиноидной природы,. А. М. Кузин предлагает такую последовательность процессов в момент облучения в клетках образуются активные радикалы биосубстратов, инициирующие реакцию окисления внутриклеточных фенолов, в первую очередь тирозина образующиеся продукты окисления активируют тирозиназу и, возможно, другие ферменты, способствуя тем самым появлению значительного количества ор-тохинонов хиноноподобные радиотоксины сорбируются ядрами клеток, угнетают синтез ДНК, блокируют включение тимидина во вновь синтезируемую ДНК, подавляют деление, рост и развитие клеток, вызывают мутации, а при высоких концентрациях радиотоксина происходит гибель клеток и организмов (рис. VI— 14). [c.216]

Структура ДНК изменяется при включении в нее галоидиро-ванных аналогов пиримидиновых оснований. Во время синтеза ДНК вместо нормального тимидина включаются 5-хлор-, 5-бром-или 5-йод-дезоксиуридины, образованные путем замещения ме- [c.235]

Влияние концентрации трипептида СНК и его синтетических аналогов иа синтез ДНК в клетках гепатомы (определяли увеличение включения Н-тимидина, %) (по Р1скаг1, 1983) [c.40]

Стекло покрывают фотоэмульсией и синтез ДНК выявляют методом радиоавтографии. Поскольку время инкубации с меченым тимидином выбирают так, чтобы репликационная вилка успела продвинуться вдоль ДНК на несколько микрометров, реплицированные участки ДНК видны под микроскопом как линии из зерен серебра, хотя сама ДНК остается невидимой (диаметр спирали ДНК 2 нм, а разрешающая способность светового микроскопа 200 нм). Результаты такого опыта представлены на рис. 1121, А темные следы реплицированной ДНК, длина которых увеличивается с удлинением периода включения Н-тимидина, показывают, что в хромосомах эукариот ре-пликационные вилки движутся со скоростью около 50 нуклеотидов в секунду. Эта скорость в 10 раз меньше, чем у бактерий, что, возможно, связано с большей трудностью репликации ДНК, упакованной в хроматин. [c.160]

Культура клеток лейкоцитов крови человека. Венозную кровь человека, азятую с гепарином, культировали (инкубировали) на изделии Ранду-га в течение 2 суток при температуре 38 С, на соответствующей среде, как описано в работе (Кершенгольц и др., 2000). Отделяли лейкоцитарные клетки, определяли их митотический индекс (МИ), скорость включения н-тимидина в ДНК и С-лейцина в белки (с Т я>24 часов), концентрацию низкомолекулярных [c.8]

Сразу после добавления митогена клетки начинают слипаться, в связи с чем перед стимуляцией целесообразно разнести клетки по индивидуальным сосудам, так как слипание препятствует воспроизводимому отбору аликвот. В этих условиях синтез ДНК, измеряемый по включению радиоактивного тимидина в материал, нерастворимый в кислоте и этаноле (разд. 12.2), начинается через 24 ч после добавления митогена в течение последующих 2—3 дней скорость синтеза увеличивается. Мечение ДНК может производиться в течение 6-часового периода с С-тимидином (2 мкКи/мл 2- С-тимидина, 3,7 Ки/моль) или в течение 2-часового периода с Н-тимидином (6- Н-тимидин, [c.63]

Наиболее четко это было показано при изучении синтеза ДНК путем импульсного мечения асинхронной популяции клеток тритированным тимидином и последующего радиоавтографического анализа включения метки в различные участки метафазных хромосом через различные интервалы времени после мечения (Stubblefield, Mueller, 1962). [c.126]

Смотреть страницы где упоминается термин Тимидин, включение: [c.398] [c.398] [c.327] [c.91] [c.62] [c.186] [c.62] [c.127] [c.142] [c.144] [c.145] [c.146] [c.288] [c.199] [c.255] [c.72] [c.286] [c.237] [c.58] [c.117] [c.126]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология