Ротор с подвесными стаканами

Угловые роторы и роторы с подвесными стаканами [c.183]

Этими двумя типами охватываются почти все существующие препаративные роторы. На фиг. 38 показано поведение растворов в цилиндрических пробирках углового ротора и ротора с подвесными стаканами. Для сравнения показана также ячейка идеальной секториальной формы. В угловых роторах (фиг. 38, Б) происходит очень быстрое формирование осадка благодаря [c.183]

А. Ячейка секториальной формы идеальна для седиментации без конвекции. Б. В угловом роторе происходит сильная конвекция с образованием плотного слоя на стенке пробирки. Осадок образуется очень быстро, так как седиментационный путь невелик и его формированию способствует конвекция. Для раз деления частиц с близкими седиментационными свойствами такая конструкция обычно непригодна. В. В пробирках ротора с подвесными стаканами обычно осуществляются наиболее трудные разделения. В этом случае, однако, частицы также сталкиваются со стенками, на них образуется плотный слой и имеет место последующая конвекция. Направления конвекционных потоков указаны [c.184]

В роторах с подвесными стаканами (фиг. 38, В) конвекционные явления выражены в меньшей степени, чем в угловых роторах. Такие роторы также очень широко применяются для зонального центрифугирования. Более того, некоторое время назад для зональных опытов использовались роторы только такого типа впоследствии [c.184]

В такого рода опытах получили применение обладающие очевидными достоинствами угловые роторы и роторы Андерсона. В начале и в конце опыта в роторах с подвесными стаканами вследствие вибрации происходит частичное перемешивание раствора, что устраняется регулированием ускорения при разгоне и применением градиентов плотности. [c.185]

Разработка этого ротора [14] явилась большим методическим достижением. Этот ротор обычно называют зональным, хотя, разумеется, для зонального разделения можно использовать ротор любого типа. Андерсон указывает, что если дно пробирки в роторе с подвесными стаканами на.ходится на вдвое большем расстоянии от оси вращения, чем мениск, то приблизительно 25% общего количества частиц подвергнется до конца седиментационного опыта столкновениям со стенками [c.186]

Большие ускорения, роторы с подвесными стаканами [c.192]

Главным рабочим органом ультрацентрифуги является ротор. На рис. 22 показаны роторы ультрацентрифуги, УЦП-65. Угловой ротор предназначен для получения плотного осадка на дне центрифужной пробирки. При вращении ротора вещество к стенке пробирки проходит быстро (расстояние до стенки значительно меньше расстояния дет ее дна) и сползает на дно. После остановки вращения ротора пробирки вынимают и, сливая супернатант, получают осадок исследуемого вещества или фракции. Ротор с подвесными стаканами также можно использовать для полу--чения плотного осадка. Однако он чаще используется прк центрифугировании в аналитических целях. [c.105]

В роторах с подвесными стаканами также наблюдаются конвекционные явления, однако выражены они не так сильно. Конвекция является результатом того, что под действием центробежного ускорения частицы оседают в направлении, не строго перпендикулярном оси вращения, и поэтому, как и в угловых роторах, ударяются о стенки пробирки и соскальзывают на дно. [c.53]

Важным моментом в препаративном центрифугировании является выбор ротора. Для быстрого отбора тяжелых фракций удобны угловые роторы. В этом случае на стенке пробирки образуется тяжелый слой, стекающий конвекционным потоком ко дну. В результате осадок собирается на дне очень быстро, хотя из-за конвекций ухудшается разрешение близко седиментирующих фракций. Лучше всего седиментация протекает в ячейках с секториальной полостью, обеспечивающих почти полное отсутствие конвекции. Подробнее об ячейках с секториальной полостью см. в гл. IX. Седиментация в роторе с подвесными стаканами в этом смысле ближе к идеальной, но форма пробирок и здесь несекториальная. К тому же в таком роторе в начале и в конце вращения может происходить взмучивание осадка. Тем не менее такие роторы широко используются при работе с градиентами плотности. В роторах Андерсона рабочие полости имеют идеальную секториальную форму, их можно наполнять и освобождать прямо во время вращения. Такие роторы более других подходят для фракционирования больших объемов вещества в градиентах плотности в условиях, близких к идеальным. Для получения максимальных ускорений стали применять роторы, сделанные из титана. [c.35]

Штромайер [13] описал секториальный вкладыш, при помощи которого можно определять коэффициенты седиментации биологических макромолекул прямо в препаративном роторе с подвесными стаканами. [c.68]

Методы определения коэффициента седиментации в опытах с градиентами плотности описаны в работе Черлвуда [14]. Эти методы особенно удобны при использовании роторов с подвесными стаканами. Предположим, что исследуемые частицы сферические и уравнения (1.2) и (1.3) выполняются. Тогда, комбинируя эти уравнения, получаем [c.68]

В последнее время для зонального ультрацентрифугирования стали применять угловые роторы, обладающие, как оказалось, некоторыми преимуществами перед роторами с подвесными стаканами. Известный недостаток угловых роторов, связанный с происходящей в них конвекцией, компенсируется применением градиента концентрации сахарозы. В работе Фламма с сотр. [12] описано применение такого ротора для разделения и фракционирования отдельных цепей ДНК при помощи изопикнического ультрацентрифугирования. Направление градиента плотности в пробирке углового ротора после его остановки изменяется на 90°, что, очевидно, эквивалентно соответствующему изменению ориентации пробирки в подвесных стаканах [13]. В угловых роторах, как правило, используются пробирки относительно большего объема, и число пробирок в угловом роторе также больше, чем в роторе с подвесным стаканом. Толщина слоя жидкости с градиентом плотности в этом случае меньше, что уменьшает время достижения равновесия. В работе [12] исследовано зональное фракционирование нуклеиновых кислот. РНК в использованных авторами этой работы условиях быстро седиментирует и оседает на стенке пробирки, в то время как ДНК хорошо разделяется в градиенте плотности. На фиг. 39 иллюстрируется улучшение разрешения за счет применения углового ротора. [c.185]

Роторы препаративных центрифуг обычно бьшают двух типов — угловые и с подвесными стаканами. Угловыми они называются потому, что помещаемые в них центрифужные пробирки все время находятся под определенным углом к оси вращения (обычно 20— 35°). В роторах с подвесными стаканами пробирки устанавливаются вертикально, а при вращении под действием возникающей центро- [c.52]

Конвекционных явлений и эффектов завихрения удается до некоторой степени избежать, используя пробирки секториальной формы (ячейки Стромайера) в роторах с подвесными стаканами и регулируя (увеличивая и уменьшая) скорость вращения ротора перечисленных выш недостатков лишен также метод центрифугирования в градиенте плотности, [c.53]

Ротор с подвесными стаканами (слева) и угловой ротор (справа) центрифуги фирмы Be kman. Эти роторы позволяют достигать ускорений 420 000 и 368 ООО g соответствено при максимальной скорости 65 ООО об/мин. [c.281]

На рис. 11-5 показаны два типа роторов для препаративной ультрацентрифуги. Угловой ротор в первую очередь предназначен для осаждения материалов . Он очень эффективен для этой цели, так как вещество проходит до стснки центрифужной пробирки короткое расстояние накапливающийся на стенке материал быстро сползает по стенке на дно пробирки. Ротор с подвесными стаканами большей частью используют для аналитического равновесного и зонального центрифугирования (будет описано вкратце). [c.282]

Еще один метод разделения органелл основан на равновесном (изопикническом) центрифугировании в градиенте плотности. Полученный из листьев экстракт наслаивают иа градиент концентрации сахарозы и затем центрифугируют до тех пор, пока органеллы не достигнут равновесного положения в градиенте в соответствии с нх плавучей плотностью. Разделение оргаиелл в данном случае основано ие на различии в скорости нх седиментации, а на различии в их плотности. Пероксисомы имеют более высокую плавучую плотность, чем интактные хлоро-лласты, а интактные хлоропласты имеют более высокую плавучую плотность, чем интактные митохондрии. Обычно полученные из листьев экстракты наслаивают на градиент концентрации сахарозы (примерно 20—60% по весу), который затем центрифугируют в роторе с подвесными стаканами в течение 3—4 ч при 100 000 g. Равновесное положение пероксисом достигается при Ллотности 1,25, интактных хлоропластов — при плотности 1,20—1,22, а митохондрий — при плотности 1,18—1,20. Бо- лее высокая плавучая плотность пероксисом может быть юбусловлена тем, что они частично проницаемы для сахарозы. После центрифугирования градиент делят иа фракции (объемом около 1 мл весь объем стакана обычно составляет [c.416]

Проц едура. 1 мл раствора, содержащего 2 мг РНК в буфере СТЕ при pH 7,5 (40 единиц поглощения нри Е260), осторожно наслаивают на 5—20%-ный линейный градиент плотности сахарозы, приготовленный на том же буфере. Для получения лучших результатов приготовленный градиент и ротор с подвесными стаканами выдерживают несколько часов при температуре 4 и центрифугируют при той же температуре [218]. Если используются высокоскоростные роторы (8 У 39 и SW 65) с меньшим объемом пробирок (2,5—5,0 мл), то в них соответственно можно иссле-довать 150—500 мкг РНК. Время центрифугирования зависит от типа ротора при скорости вращения ротора 20 ООО об/мин время центрифугирования составляет 18 часов, при 24000 об/мин — 14 часов, при 29 000 об/мин — 8—9 часов, а при 39 000 об/мин 2,5—3 часа [260]. [c.177]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология