Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Центрифугирование препаративное

    В препаративных опытах. Необходимо учитывать также возможные изменения плотности среды. Однако плотность в меньшей мере зависит от температуры, чем вязкость. Ниже мы укажем и на другие параметры, которыми препаративный опыт может отличаться от аналитического, но в первую очередь необходим оптимальный учет изменений плотности и вязкости среды. Эти величины легко определить или найти из таблиц. Такого рода таблицы сведены вместе в прекрасном обзоре де Дюве и сотр. [4], посвященном градиентному центрифугированию клеточных компонентов. В значительной мере благодаря этому обзору препаративное ультрацентрифугирование перестало быть искусством и стало точной дисциплиной. В табл. 4 приведена часть данных из обзора де Дюве [4], позволяющих в сочетании с уравнение (IX. 3) учитывать эффекты, которые могут возникнуть при переходе от обычного буферного раствора к раствору с сахарозой при той или иной температуре. [c.175]


    В этом варианте препарат в виде тонкого слоя помещают в пробирку поверх среды, плотность которой обычно меньше плотности выделяемых частиц, и затем подвергают центрифугированию. Под действием приложенной центробежной силы частицы движутся в виде отдельной полосы через градиент, который служит лишь для того, чтобы предотвратить размывание зоны, или полосы в результате конвекции. Этот исключительно полезный метод, очень широко применяемый как для аналитических, так и для препаративных целей, используется для выделения и характеристики частиц всех размеров, начиная от таких крупных объектов, как вирусы, ядра и митохондрии, и кончая рибосомами, а также чистыми белками и нуклеиновыми кислотами. [c.250]

    Не путайте с дифференциальным центрифугированием — препаративным методом разделения тяжелых и легких фракций. — Прим. ред. [c.241]

    Аналитическое ультрацентрифугирование полимеров [1, 2, 4, 12] включает в себя три следующих экспериментальных метода скоростную седиментацию, изучение седиментационного равновесия и процесса приближения к нему. Скоростная седиментация позволяет определить константу седиментации и полидисперсность образца. Седиментация макромолекул в зоне (зонное ультрацентрифугирование) — ценный метод обнаружения гетерогенности высокомолекулярного образца. Метод приближения к равновесию позволяет рассчитать молекулярную массу М и получить сведения о неоднородности полимера, а изучение седиментационного равновесия (состояния, достигаемого транспортным переносом макромолекул, хотя сам метод и не является истинно транспортным) — молекулярную массу (надежнее, но с большей затратой времени, чем в предыдущем методе) различных типов усреднения. Метод центрифугирования в градиенте плотности заключается в исследовании седиментации, состояния равновесия и приближения к нему в условиях искусственно создаваемого в кювете градиента плотности это — широко используемый метод определения молекулярной массы, наличия неоднородности и ее типа, служащий и для препаративных разделительных целей. [c.14]

    ММР синтетического чие-полиизо-прена типа СКИ-3 (по данным аналитического и препаративного ультра-центрифугирования). [c.61]

    Препаративные ультрацентрифуги предназначены для выделения из растворов отдельных фракций. Конечно, эти фракции могут быть однородны только по одному показателю — по скорости седиментации, а по другим свойствам могут значительно отличаться. Например, гамма-глобулины человека (один из видов белков крови, широко известный в медицине как лечебное средство) при центрифугировании обычно разделяется на две фракции с константами седиментации 75 и 19S. Белки, образующие эти фракции, заметно различаются между собой и по ряду других свойств (иммунологическим свойствам, электрофоретической подвижности и т. п.). [c.148]


    Дальнейшим усовершенствованием является метод двумерной хроматографии на бумаге. Преимущество этого метода основано на том, что вещества имеют различные значения в разных растворителях. Смесь наносят сначала в угол листа фильтровальной бумаги квадратной формы, и производят хроматографирование в одном направлении. Полученные при этом пятна подвергают хроматографическому разделению в другом растворителе, повернув лист бумаги на 90° (т. е. чтобы фронт двигался в направлении, перпендикулярном движению фронта при первом хроматографировании). Для более быстрого разделения применяют метод круговой хроматографии на бумаге анализируемую смесь помещают в центр круглого листа фильтровальной бумаги, вырезают тонкую полосу по радиусу и погружают ее в растворитель. При этом полоска работает как фитиль. Вещества разделяются в виде концентрических кругов. Количество вещества, которое может быть подвергнуто разделению на круглом листе обычной фильтровальной бумаги (ватман № 1), составляет 1—50 мкг, причем скорость перемещения фронта растворителя может быть повышена центрифугированием. При работе с большими количествами веществ, бумага перегружается и образуются шлейфы и хвосты . Меньшие же количества веществ трудно обнаружить. В количествах до 1 мг вещества можно разделять, нанося смесь в виде полос параллельно краю куска бумаги при этом вместо пятен получаются полосы. Для препаративного разделения можно использовать также толстую бумагу (например, ватман № 3). [c.22]

    Новый седиментационный метод, основанный на центрифугировании в градиенте плотности, в настоящее время особенно широко распространен. Он обладает следующими двумя преимуществами во-первых, для его осуществления требуется не аналитическая, а обычная препаративная ультрацентрифуга во-вторых, фракционируемый материал довольно просто разделяется на индивидуальные компоненты. При этом используется так называемый бакет-ротор (крутящееся ведерко ), а процесс разделения на компоненты происходит в пластмассовых центрифужных пробирках. [c.417]

    ВЫХ оснований или нуклеотидов, полученных после расщепления полимера (подробнее — см. стр. 58). С нуклеотидным составом ДНК однозначно связаны два физических свойства двухцепочечных комплексов, которые часто используются для характеристики полученных препаратов 2 . 2в Одно из них — так называемая температура плавления Гщ — это температура, при которой происходит распад двухцепочечного комплекса на одноцепочечные молекулы этот процесс легко наблюдать по изменению УФ-поглощения или оптического вращения раствора (подробнее см. в гл. 4). Другая характерная константа ДНК — плавучая плотность р — может быть определена из результатов равновесного ультрацентрифугирования Такое центрифугирование проводят обычно в растворах солей, обладающих высокой плотностью чаще всего применяют хлорид или сульфат цезия. При длительном центрифугировании устанавливается градиент плотности раствора, а ДНК собирается в узкой зоне, где существует равновесие между центробежной силой и выталкивающей силой, которая определяется разностью плотности осаждаемого вещества и применяемого солевого раствора в данной зоне. Равновесное центрифугирование в градиенте плотности Сз С1 может служить не только аналитическим методом для характеристики препарата ДНК, но и полезным препаративным методом для разделения ДНК, различающихся по нуклеотидному составу. Подобным же образом препаративное ультрацентрифугирование в градиенте плотности сахарозы используется для разделения молекул ДНК, различающихся по скорости седиментации. [c.31]

    Другой метод препаративного синтеза АТР разработан недавно Уайтсадсом используется ацетилфосфат в качестве донора фосфатной группы н иммобилизованный фермент (разд. 4.7) в качестве катализатора [30]. Реакция проходит в мягких условиях (при pH, близких к нейтральной среде, и комнатной температуре) относительные (к субстрату) количества нерастворимого полимерного катализатора незначительны катализатор легко удаляется (центрифугированием), а реакция проходит более специфично, чем при неэнзиматическом синтезе (наиример, аденозинтетрафосфат в качестве побочного продукта не образуется). Суммарная реакция сводится к следующему  [c.138]

    До недавнего времени наиболее надежным средством разделения белков с разными молекулярными весами являлось скоростное центрифугирование в ультрацентрифугах, применявшееся как для определения констант седиментации (осаждения) белка в аналитических исследованиях, так и для препаративного получения некоторых белков. [c.55]

    Параллельно с электрофорезом развивался и метод центрифугирования в градиенте плотности, который оказался очень полезным для препаративного разделения веществ с большим молекулярным весом. Многие проблемы, касающиеся стабильности в поле тяжести, введения образца и т. д., являются общими для электрофореза и центрифугирования и обсуждаются в работах, [c.65]


    Для препаративного выделения зон с поверхности геля сначала срезают тонкий слой, в котором определяют положение компонентов. В соответствии с этим зоны вырезают из оставшейся части геля. Если заморозить и оттаять кусочки крахмального геля, последний приобретает губчатую структуру и жидкость из него можно просто выдавить или извлечь центрифугированием. Чтобы избежать возможной адсорбции на поверхности твердой фазы, рекомендуется производить эту операцию по возможности быстро. [c.97]

    Принципы фракционирования на активном угле, используемые в анализе органических веществ почв [20], положены в основу препаративного микрометода, дающего количественную информацию о содержании основных классов органических веществ в речных водах и обеспечивающего получение беззольных препаратов некоторых из этих веществ [21]. Органические вещества сорбируются в динамических условиях после отделения гуминовых кислот коагуляцией при подкислении и центрифугированием. [c.199]

    Определение коэффициента седиментации методом препаративного центрифугирования [c.178]

    Этот гель декстрана является в настоящее время наиболее широко распространенным носителем для гель-хроматографии. Выпускаются восемь типов сефадекса, различающихся по степени набухания (табл. 5). Области применения сефадексов различных типов определяются их пористостью и в значительной мере перекрываются между собой. Каждый тип сефадекса, выпускаемого в виде небольших шариков, подразделяется на несколько фракций. Сверхтонкая фракция предназначается главным образом для тонкослойной хроматографии (см. стр. 84), однако ее можно применять и для хроматографии на колонке, причем в этом случае достигается очень тонкое разделение. Среднюю и тонкую фракции предпочтительнее использовать для обычного препаративного разделения, т. е. там, где скорость протекания не должна быть слишком низкой. Сефадексы G-25 и G-50 выпускаются также в виде грубой фракции, которая предназначается для исследований с применением центрифугирования, а также для хроматографии на препаративных колонках. [c.47]

    Для определения плавучей плотности анализируемых частиц можно использовать центрифугирование в градиенте плотности. В этом случае после установления равновесия изучаемые частицы оказываются на том уровне, на котором их плотность и плотность раствора совпадают. Если плотность вещества несколько превышает единицу (например, для липопротеида, рч = = 1,02 г/мл), то его целесообразно сконцентрировать около мениска препаративным ультрацентрифугированием (не градиентным) в буферном растворе с плотностью, скажем, 1,15 г/мл, доведенной до такого значе- [c.180]

    Заметное оседание частиц в системе, обладающей высокой кинетической устойчивостью, можно вызвать, если использовать значительные по величине центробежные силы. Впервые это сделал А, В, Думанский (1913), применивший центрифугу для осаждения коллоидных частиц. В 1923 г. Т. Сведберг разработал специальную центрифугу с большим числом оборотов, называемую ультрацентрифугой (рис. 111). Для центрифугирования требуются приборы, которые позволяют работать при точно известных скоростях с малыми отклонениями без температурных колебаний. Современные ультрацентрифуги работают при больших ускорениях до 420 ООО zh lOOg с контролем температуры в пределах десятой градуса. Существует два типа приборов — аналитические и препаративные. Аналитические центрифуги снабже- [c.306]

    Несмотря на широкое внедрение инструментальных методов в практику идентификации полимеров, приходится признать, что не существует таких методов, которые можно гарантированно применять для анализа полимерных композиций, содержащих иногда по массе больше наполнителей и добавок, чем полимерной основы, без предварительного их отделения. Препарирование исследуемых образцов, отделение добавок и наполнителей методами экстракции, центрифугирования, препаративной и жидкостной хроматографии должно предшествовать как предварительной идентификации полимерной основы, так и последующей ее детальной идентификации инструментальными методами, если полимерная композиция является высоконапол-ненной. Проблема идентификации полимерных композиций весьма сложна, поскольку постоянно не только разрабатываются принципиально новые полимеры, ио различными способами изменяются физико-химические свойства существующих полимеров, расширяется их марочный ассортимент. Поэтому методы, предложенные для отделения определенного типа полимера от добавок и наполнителей, могут оказаться неприемлемыми для его модификаций. Методов препарирования и идентификации [c.56]

    Центрифугированием пользуются в лабораториях вместо фильтрования в тех случаях, когда необходимо без потерь отделить малые количества вещества, когда осадок забивает поры фильтра, когда осадок такой мелкий, что проходит через фильтр. Обычно в лабораториях для препаративной работы применяют седиментационные центрифуги с числом оборотов 2000—6000 в минуту. В большинстве случаев используют модели, имеющие четыре сосуда емкостью не более 150 мл каждый. Суспензию помещают в центрифужные (но не в обычные лабораторные) стаканы, точно тарируют их до одинаковой массы и только после этого запускают центрифугу. Если после центрифугирования осадок прочно удерживается на дне пробирки, то находящуюся поверх него М Идкость сливают, взмучивают осадок с небольшим количеством растворителя и повторно центрифугируют. [c.34]

    Вместо фильтрования в лабораторной практике нашло применение центрифугирование особенно это относится к случаям, если необходимо без потерь отделить малые количества осадка пли если последний забивает поры фильтра. Обычно для препаративной работы используются седимента- [c.53]

    В препаративной энзимологии чаще пользуются методом дифференциального центрифугирования гомогенатов тканей (рис. 4.26). Для этого сначала разрушают клеточную структуру с помощью подходящего дезинтегратора и полученную квазиоднородную (гомогенизированную) массу подвергают дифференциальному центрифугированию при температуре О—4°С. Обычно распределение ферментов изучают в последовательных индивидуальных фракциях, изолированных при дробном центрифугировании гомогенатов, в частности во фракции ядер, которую получают при низкой скорости центрифугирования, во фракции митохондрий, которая осаждается при средней скорости центрифугирования, во фракции микросом (или рибосом), для изолирования которой требуется высокая скорость центрифугирования, и, наконец, в оставшейся прозрачной надосадочной жидкости (супернатант), представляющей собой растворимую фракцию цитоплазмы. Следует отметить, что фракция митохондрий не является гомогенной, поскольку из нее удается изолировать частицы, известные как лизосомы, размер которьгх занимает промежуточное место между размерами митохондрий и микросом. В свою очередь микросомальная фракция также является гетерогенной, поскольку состоит в основном из элементов эндоплазматической сети неоднородного строения. [c.158]

    Выделение меченых аминокислот достигается следующим образом. Водоросли настаивают в 80% этиловом спирте, затем отделяют центрифугированием и подвергают гидролизу 6н. H I в запаянной ампуле при 105—110° С. Белковый гидролизат упаривают в вакууме и очищают от углеводов, органических кислот и гуминоподобных веществ. Раствор, содержащий смесь аминокислот пропускают через катионит КУ-2 в Н+-форме. Использование в качестве элюента соляной кислоты различной концентрации позволяет разделить смесь на отдельные группы аминокислот (рис. 14). Разделение групп аминокислот на индивидуальные соединения можно осуществить методом препаративной бумажной хроматографии. [c.57]

    Важно отметить, что степень набухания глобул, измеренная этим методом, практически совпала с результатами препаративного центрифугирования. Эти данные свидетельствуют о том, что плотность сетки химических связей в глобулярном геле фторкаучуков относительно невелика (типична для глобулярных микрогелей, полученных при эмульсионной полимеризации). Однако при умеренных температурах она возрастает вследствие влияния вклада физических узлов сетки, связанных с сильным межмолекулярным взаимодействием во фторкаучуках. Поэтому общая плотность сетки возрастает, и глобулярные образования приобретают высокую устойчивость. Близкие к приведенным в табл. 1.3 результаты получены в работе [5]. С помощью методов гель-хроматографии определена молекулярная масса высокомолекулярной фракции каучука СКФ-26, равная 2-10 и число узлов разветвления на такую молекулу , равное 5-10 Завыщен-ная степень сшивания, очевидно, связана с заниженным размером элюируемой частицы (глобулы), равным 50 нм, который определяли расчетным путем с учетом ряда допущений. На основании полученных данных авторами работы [5] разработан новый количественный метод определения гель-фракции СКФ-26 с помощью ГПХ-анализа растворов СКФ-26. [c.30]

    Вместо фильтрования в лабораторной практике нашло применение центрифугирование-, особенно это относится к случаям, если необходимо без потерь отделить малые количества осадка или если последний забивает поры фильтра. Обычно для препаративной работы используются седиментационные центрифуги со скоростью вращения 2000—3000 об/мин. Наиболее распространенные модели центрифуг имеют четыре гнезда для сосудов емкостью 150 мл каждый. Суспензию помещают в центрифужные (а не обычные лабораторные ) стаканчики и выравнивают их массу, переливая содержимое из одного стаканчика в другой. Если после центрифугирования осадок достаточно прочно удерживается на дне пробирки, то жидкость сливают затем взмучивают осадок с небольшим количеством растворителя и повторно центрифугируют. Большую часть оставшегося растворителя удаляют с помощью кусочка фильтровальной бумаги (рис. 38). Остаток растворителя откачивают, присоединив центрифужную пробирку (рис. 39) к вакуумному насосу. Эту опера- [c.55]

    Для определения молекулярного веса ДНК (обзоры — см. наиболее широко используются методы, основанные на определении скорости седиментации макромолекул. Это определение может быть выполнено по различным методикам наиболее широкое распространение в последнее время приобрела методика, основанная на зональном центрифугировании в градиенте плотности сахарозы в препаративной ультрацентрифуге В данном случае распределение веществ по скорости осаждения можно контролировать по радиоактивной метке, что обеспечивает высокую чувствительность с другой стороны, методика практически без изменений может быть применена и для препаративного разделения нуклеиновых кислот. Предложен ряд эмпирических уравнений, связывающих скорость седиментации двухцепочечного комплекса ДНК со значением молекулярного веса определенным независимыми методами. Последнее из этих уравнений охватывает пределы мол. веса 0,2— 130 108. [c.30]

    Образующиеся в результате реакщ1И двухцепочечные комплексы могут быть разделены препаративным центрифугированием в градиенте хлористого цезия после денатурации действием щелочи Полученные продукты имеют мол. вес. от 10 до 4 10 . [c.102]

    Экспериментально глобулярные образования во фторкаучу-ках СКФ-26 и СКФ-32 впервые наблюдал В. А. Каргин [36]. С помощью специально разработанного метода, состоящего в препаративном центрифугировании разбавленных растворов фторкаучука с последующим определением размера глобул электронно-микроскопическим способом [42], было показано, что содержание глобулярной фракции и размер глобул зависят от типа каучука и изменяются от партии к партии (табл. 1.3). Из промышленных каучуков наибольшее содержание глобулярной фракции наблюдается для СКФ-26, а содержание глобулярной фракции в СКФ-260 несколько колеблется от партии к партии. В каучуках СКФ-26НМ и СКФ-260НМ глобулярной и вообще гель-фракции не обнаружено (рис. 1.4). Судя по электронномикроскопическим данным, размер глобул изменяется в зависимости от типа каучука в пределах от 30—40 до 150 нм (см. табл. 1.3) и приближается к размерам латексных частиц, образующихся при эмульсионной полимеризации [36, 39]. В настоящее время можно считать установленным, что глобулярная фракция содержит глобулы полимера, сформировавшиеся при полимеризации и содержащие сшитый в частицу микрогеля фторкаучук [39]. [c.27]

    Эти изменения обусловливаются более низкими показателями вулканизатов глобулярной фракции по сравнению с показателями вулканизатов неглобу-лярной фракции. Глобулярную фракцию СКФ-26 отделяли от неглобулярной препаративным центрифугированием, к растворам этих фракций в ацетоне добавляли раствор гексаметилендиамина в тетрагидрофуране и готовили пленки на алюминиевой фольге. Вулканизацию проводили при 80 °С, что позволяло сохранять неизменной глобулярную структуру исходного образца в вулканизованной пленке. Вулканизаты неглобулярной фракции имеют условную прочность и относительное удлинение соответственно 9,3 МПа и 340%, а вулканизаты глобулярной фракции — только 5,0 МПа и 136%. Можно полагать, что сохраняющиеся в вулканизатах глобулы микрогеля способствуют увеличению дефектности и неоднородности вулканизационной сетки. [c.40]

    Обычно во время работы центрифуги — как обычные, так и угловые — немного нагреваются для некоторых определений, а также в препаративной технике это может быть очень невыгодно. В этих случаях следует употреблять центрифуги с охлаждением, позволяющие производить центрифугирование при низких температурах. [c.70]

    Важным моментом в препаративном центрифугировании является выбор ротора. Для быстрого отбора тяжелых фракций удобны угловые роторы. В этом случае на стенке пробирки образуется тяжелый слой, стекающий конвекционным потоком ко дну. В результате осадок собирается на дне очень быстро, хотя из-за конвекций ухудшается разрешение близко седиментирующих фракций. Лучше всего седиментация протекает в ячейках с секториальной полостью, обеспечивающих почти полное отсутствие конвекции. Подробнее об ячейках с секториальной полостью см. в гл. IX. Седиментация в роторе с подвесными стаканами в этом смысле ближе к идеальной, но форма пробирок и здесь несекториальная. К тому же в таком роторе в начале и в конце вращения может происходить взмучивание осадка. Тем не менее такие роторы широко используются при работе с градиентами плотности. В роторах Андерсона рабочие полости имеют идеальную секториальную форму, их можно наполнять и освобождать прямо во время вращения. Такие роторы более других подходят для фракционирования больших объемов вещества в градиентах плотности в условиях, близких к идеальным. Для получения максимальных ускорений стали применять роторы, сделанные из титана. [c.35]

    При описанном выше ультрацентрифугировании пики, наблюдаемые при помощи шлирен-системы, отвечают границам между раствором и растворителем. Первые, быстрые пики отвечают компонентам, движущимся в окружении более медленных компонентов (фиг. 8). В биохимических смесях некоторые из этих медленных компонентов (например, рибосомы при анализе бактериального экстракта) создают большую вязкость. Измеряемые коэффициенты седиментации могут при этом очень сильно отличаться от приведенного к стандартным условиям значения Поэтому полученные при помощи скоростной седиментации значения s не всегда можно непосредственно использовать при планировании и анализе данных препаративного зонального центрифугирования в градиентах плотности. При зональном ультрацентрифугировании анализируемая смесь наносится в виде слоя на раствор с увеличивающейся по направлению ко дну плотностью (что предотвращает конвекционное перемешивание) и различные компоненты седиментируют в градиенте плотности в виде отдельных зон. Для наслоения смеси можно использовать специальную аналитическую ячейку, в которой техника наслоения принципиально не отличается от обычного препаративного наслоения на градиент. Одна из таких ячеек (Be kman Instruments In .) приведена на фиг. 15. Преимущества применения такой ячейки, как отмечают Виноград и Брунер [11], состоят в том, что она требует меньше исследуемого материала, анализируемые компоненты в ней пространственно разобщены, медленные примеси отстают от быстрее движущихся зон и седиментацию последних можно осуществлять в любом растворителе, не прибегая к предварительному диализу. Растворитель должен быть более плотным по сравнению с [c.67]

    Центрифугирование в градиенте плотности основано на том же принципе. Как и в вышеуказанном случае, градиент плотности создается градиентом концентрации. В колонке градиент концентрации достигается тем, что слои с различной концентрацией помещают друг над другом, после чего начинается медленная диффузия, постепенно выравнивающая градиент. Роль сил тяготения сводится главным образом к стабилизации системы путем снижения до минимума конвекционных токов. Наоборот, при центрифугировании в градиенте плотности градиент концентрации является результатом сил, действующих в центрифуге, и достигает равновесного значения. Установленный таким образом градиент плотности достаточно стабилен. Этот эффект был использован Пикельсом [2] для снижения конвекции в опытах по центрифугированию. Такой же принцип применяли Калер и Ллойд [31 в своих опытах с так называемой стабилизированной движущейся границей в препаративной ультрацентрифуге. Другим применением градиента плотности является зонное центрифугирование —методика, разработанная Брекке [4], которая позволяет разделять компоненты смеси полимеров на дискретные зоны. Предварительно создают градиент плотности, так что ни в одной точке плотность не превышает плотности любого из компонентов исследуемого образца, раствор которого помещают сверху, а затем подвергают центрифугированию. Различные компоненты мигрируют в разные зоны, которые все более и более разделяются по мере центрифугирования. Еще до того, как движущаяся с наибольшей скоростьЕо зона достигнет дна кюветы, центрифугу останавливают и анализируют различные зоны. Очевидно, что метод основан на различиях в скоростях седиментации. Градиенту плотности принадлежит второстепенная ролы стабилизация системы и влияние плотности жидкости на скорость седиментации. [c.418]

    Зонное центрифугирование при условии, что плотность вблизи дна кюветы выше, чем плотность любого из компонентов образца, было названо Андерсоном [51 изопикническим градиентным центрифугированием . В эксперименте этого типа ни один из компонентов не достигает дна ячейки, как бы долго ни продолжалось центрифугирование. Чрезвычайно удобный для такого рода препаративной работы ротор был описан Андерсоном [61. Он представляет собой полый цилиндр, разделенный на 36 секторов. [c.418]

    Описанные до сих пор методы были в основном препаративными, причем градиент плотности устанавливали заранее. Как уже упоминалось, градиент плотности может быть получен с помощью самого поля центрифуги. Это имеет место при центрифугировании смеси двух или более жидкостей, отличающихся по плотности, молекулярному весу или по обоим показателям. При растворении макромолекулярного компонента в этой смеси растворителей он будет собираться в области, где плотность близка к плотности полимера в растворе. Мезельсон, Шталь и Виноград [8] первыми применили этот принцип к системе дезоксирибонуклеиновая кислота (ДИК)— водный раствор хлористого цезия. Они получили основные соотрюшения для распределения концентрации полимера в предположении об идеалыюсти раствора и показали, что для единичного полимерного ко.мпопента имеет место гауссово распределение концентрации (ср. нижеследующие разделы). Это предсказание теории было подтверждено опытами с ДНК, полученной из бактериофага Т4, что указывало на высокую степень монодисперсности этого полимера. Для других образцов ДНК были обнаружены несимметричные полосы вследствие композиционной неоднородности препаратов (см. раздел Ж)- [c.419]


Смотреть страницы где упоминается термин Центрифугирование препаративное: [c.129]    [c.529]    [c.44]    [c.63]    [c.23]    [c.172]    [c.173]    [c.194]    [c.289]    [c.179]   
Методы практической биохимии (1978) -- [ c.44 , c.51 , c.52 ]




ПОИСК





Смотрите так же термины и статьи:

Центрифугирование



© 2024 chem21.info Реклама на сайте