Ротор препаративные

Существуют и другие конструкции центрифуг, например центрифуги с разгрузкой при помощи пульсирующего поршня. Трубчатые центрифуги отличаются малым диаметром и большим числом оборотов. Для препаративных и аналитических работ сконструированы ультрацентрифуги (чис о оборотов 10 ) с плавающими роторами и приводом от турбины. В ультрацентрифугах можно разделять даже высокомолек>лярные вещества на фракции с различным молекулярным весом. [c.266]

Аналитическую центрифугу можно использовать как препаративную, установив в ней препаративный ротор. Однако, вероятно, очень немногие лаборатории используют такое ценное оборудование для решения простых препаративных задач. Эту работу выгоднее и лучше проводить на препаративных ультрацентрифугах, [c.37]

Аналитические ячейки обычно для препаративных целей не применяются, так как они обладают очень небольшой емкостью, однако они удобны для микрометодов. Целесообразнее начать рассмотрение именно с аналитической ячейки, поскольку ее конструкция обеспечивает почти идеальные (насколько это возможно) условия седиментации. Полость в ячейке имеет секториальную форму, что при правильной установке ее в роторе обеспечивает прямолинейное движение седиментирую- [c.182]

Этими двумя типами охватываются почти все существующие препаративные роторы. На фиг. 38 показано поведение растворов в цилиндрических пробирках углового ротора и ротора с подвесными стаканами. Для сравнения показана также ячейка идеальной секториальной формы. В угловых роторах (фиг. 38, Б) происходит очень быстрое формирование осадка благодаря [c.183]

Если коэффициенты седиментации компонентов отличаются сильно (скажем, в три раза и больше), то хорошее разделение достигается при ультрацентрифугировании в угловом роторе. Оно широко применяется на первых этапах фракционирования при больших объемах исходного раствора. Для лучшего разделения часто проводят повторное фракционирование. Когда величина коэффициента седиментации, скорректированная в соответствии с условиями препаративного эксперимента, примерно известна, возникает вопрос о выборе ротора, скорости и длительности вращения. Тротман [15] [c.189]

Новый седиментационный метод, основанный на центрифугировании в градиенте плотности, в настоящее время особенно широко распространен. Он обладает следующими двумя преимуществами во-первых, для его осуществления требуется не аналитическая, а обычная препаративная ультрацентрифуга во-вторых, фракционируемый материал довольно просто разделяется на индивидуальные компоненты. При этом используется так называемый бакет-ротор (крутящееся ведерко ), а процесс разделения на компоненты происходит в пластмассовых центрифужных пробирках. [c.417]

Усовершенствование воздушных ультрацентрифуг, у которых ось ротора находится в вертикальном положении, облегчило конструирование и эксплуатацию роторов для ячеек большой емкости, пригодных для препаративных целей. Описанные Пикель-сом [278] роторы снабжены большим числом изготовленных из пластмассы пробирок, устанавливаемых обычно под углом приблизительно 35° к вертикали. При таком устройстве для достижения внешней стенки пробирки отдельным молекулам белка необходимо пройти относительно короткое расстояние, после чего собирающийся концентрированный раствор под действием силы тяжести сползает вниз вдоль наклонной стенки пробирки на дно. [c.66]

В настоящее время в продаже имеются роторы этой конструкции самых различных размеров, пригодные для работы как при умеренных скоростях, так и при скоростях, достигающих 50 000 об/мин и выше. Роторы меньших размеров, снабженные десятью пробирками, общая емкость которых равна 130 мл, позволяют развивать относительную центробежную силу, превосходящую силу земного притяжения (g) в 94 000 раза у внутреннего конца пробирки и в 215000 раз у ее дна (наружный конец). Роторы с ячейками суммарной емкостью приблизительно 1 л, позволяют работать с максимальным ускорением, достигающим 65 000 X ё- В случае еще более крупных роторов необходимо применять металлические пробирки. Пробирки, изготовленные из пластмассы, используются наряду с пробирками из других материалов, причем для закрывания этих пробирок были сконструированы специальные приспособления, предотвращающие разрушение их при работе, с одной стороны, и позволяющие производить контроль над распространением инфекционных материалов, с другой. Стерилизацию пробирок из пластмассы можно производить при помощи ультрафиолетового излучения [276]. Для роторов, применяемых в препаративных целях, также были сконструированы ячейки с перегородками [279, 280]. [c.66]

Имеющиеся сейчас в продаже ультрацентрифуги могут работать при низких температурах, если их ротор предварительно охладить с помощью специально вмонтированного приспособления для охлаждения. В препаративных работах, в которых [c.67]

Рис. 4-41. Препаративная ультрацентрифуга. Исследуемый образец находится в пробирках, помещенных в расположенные по кругу цилиндрические гнезда в металлическом роторе При быстром вращении ротора развивается значительная центробежная сила под воздействием которой частицы исследуемого образца осаждаются. В условиях вакуума трение снижается в результате ротор не нагревается и вмонтированная в

Ультрацентрифугирование может быть препаративным и аналитическим. В качестве препаративного метода оно применяется для очистки препаратов или для разделения смесей с целью последующего анализа. При этом образец, помещенный в цилиндрическую пробирку, вращают с большой скоростью в течение заранее заданного промежутка времени, а затем извлекают из центрифуги, прежде чем приступить к каким-либо измерениям. Преимущество такого подхода состоит в том, что можно использовать большие препаративные объемы (5—100 мл), а также в том, что полученный после центрифугирования образец может быть подвергнут в дальнейшем биохимическим и физическим измерениям. Однако при остановке ротора и извлечении образца неизбежно происходит некоторое взбалтывание или перемешивание содержимого пробирки. К тому же в связи с тем, что в данном случае возможно изучение состояния образца лишь в один из моментов времени, при таком подходе теряется много информации. [c.226]

В большинстве случаев зональные роторы используют для зо-нально-скоростного центрифугирования в градиенте плотности раствора сахарозы на стадии препаративного выделения и очистки макромолекул или частиц из большого объема материала. [c.275]

Препаративные ультрацентрифуги дают предельную скорость до 75 ООО об мини максимальное центробежное ускорение 510 ООО g. Они снабжены как холодильником, так и вакуумной установкой, чтобы предотвратить перегрев ротора вследствие трения его о воздух. Роторы таких центрифуг изготавливают из высокопрочных алюминиевых или титановых сплавов. В основном применяют роторы из алюминиевых сплавов, однако в тех случаях, когда необходимы особенно высокие скорости, пользуются роторами из титана. Для уменьшения вибрации, возникающей в результате нарушения равновесия ротора из-за неравномерного наполнения центрифужных пробирок, ультрацентрифуги имеют гибкий вал. Центрифужные пробирки и их содержимое должны быть тщательно уравновешены с точностью до 0,1 г. Аналогичные требования следует соблюдать и при загрузке роторов центрифуг общего назначения. [c.52]

В отличие от препаративного центрифугирования, целью которого является разделение веществ и их очистка, аналитическое ультрацентрифугирование применяется в основном для изучения седиментационных свойств биологических макромолекул и других структур. Поэтому в аналитическом центрифугировании применяют роторы и регистрирующие системы особой конструкции они позволяют непрерывно наблюдать за седиментацией материала в центробежном поле. [c.59]

В настоящее время биохимики уделяют особое внимание исследованию функциональной деятельности субклеточных структур ядра, митохондрий, пластид, рибосом, лизосом, гиалоплазмы (основное вещество) и др. Разработаны специальные методы препаративного разделения субклеточных единиц при помощи ультрацентрифугирования, т. е. центрифугирования при очень быстром (несколько десятков и даже сотен тысяч оборотов в минуту) вращении ротора центрифуги. Развивающиеся при этом центробежные силы характеризуются фактором разделения (см. с. 36), т. е. отношением ускорения центробежной силы к ускорению силы тяжести, обозначаемой буквой g. Значения факторов разделения, при которых можно добиться осаждения из гомогената тех или иных субклеточных частиц, приведены на рис. 5. [c.20]

Осадок мембран суспендируют в воде и переносят в центрифужную пробирку ротора с откидными стаканами (бакет-ротор) препаративной ультрацентрифуги. К 1,2 мл суспензии добавляют по каплям при перемешивании 2,1 мл сахарозы с плотностью 1,34. Получают плотность смеси—1,20. На эту смесь осторожно наслаивают 1 мл раствора сахарозы с плотностью 1,18 и затем 1 мл раствора сахарозы с плотностью 1,16. Центрифугируют 75 мин при 100000 д. [c.328]

Роторы препаративных центрифуг обычно бьшают двух типов — угловые и с подвесными стаканами. Угловыми они называются потому, что помещаемые в них центрифужные пробирки все время находятся под определенным углом к оси вращения (обычно 20— 35°). В роторах с подвесными стаканами пробирки устанавливаются вертикально, а при вращении под действием возникающей центро- [c.52]

Для получения вирусй в йрейар ти ных количествах применяют центрифугирование в горизонтальных роторах препаративной центрифуги. После достижения равновесия содержимое анализируется аналогично тому, как это делается в опытах с равновесным зональным градиентом. В этом случае можно определить величину плавучей плотности с точностью до 0,01 г/мл при одновременной очистке вируса. При препаративном равновесном центрифугировании время может колебаться от 6 до 12 часов. [c.64]

Т. н. аналит. У. примен. при анализе р-ров, дисперсий и осуществляется с помощью аналит. ультрацеетрифуг, снабженных роторами с оптически прозрачными замкнутыми резервуарами и оптнч. системами для определения концентрации или градиента концентрации по радиусу ротора во времени исследуемые объемы — от 0,01 до 2 мл при массе частиц от неск. мкг до мг. Препаративное У. примен. для выделения компонентов из сложных смесей объем жидкости и масса исследуемого обра.чца могут быть на неск. порядков больше, чем нри аналит. У. Центробежные ускорения в ультрацентрифугах могут достигать 500 000 д (где д —ускорение своб. падения). [c.605]

Т. наз. аналит. ультрацентрифугарование применяется при анализе р-ров, дисперсий и производится посредством аналит. ультрацентрифуг, снабженных роторами с оптически прозрачными замкнутыми резервуарами и оптич. системами для определения концентрации или ее фадиента по радиусу ротора во времени исследуемые объемы - от 0,01 до 2 мл при массе частиц от неск. мкг до мг. Препаративное ультрацентрифугарование используют для вьщеления компонентов из сложных смесей объем жидкости и масса исследуемого образца м.б. на неск, порядков больше, чем при аналит. ультрацентрифугаровании. Центробежные ускорения в ультрацентрифугах достигают 5 10 . Первая аналит. ультрацентрифуга бьша создана Т. Сведбергом (1923 5-10 ). [c.343]

Некоторые препаративные ультрацентрифуги сконструированы по принципу турбины (рис. 205). Собственный ротор ультрацентрифуги с косыми отверстиями для пробирок подвешен на проволоке и вращается в вакууме. Проволока проходит через вакуумное уплотнение, на ее верхнем конце прикреплена движущая турбинка, приводимая в движение сжатым воздухом. Сжатый воздух тоже подводят под диск турбинки так, что при достаточно высоких оборотах весь ротор поднимается и вращаета на подушке сжатого воздуха, не требуя специальных подшипников. [c.193]

Пробирки такой препаративной центрифуги имеют суммарный объем 100—200 мл. За числом оборотов следят при помощи стробоскопа. Если для низкоскоростных центрифуг с угловым ротором оптимальное отклонение пробирок от оси вращения составляет около 45 , то для максимальных оборотов ультрацентрифуги более подходит меньший угол (в некоторых конструкциях 20° или даже 10 ). Сами пробирки изготовлены из целлулоида их не нужно уравновешивать — достаточно отобрать при помощи пипетки одинаковые объемы, так как вес ротора настолько велик, что ошибкой при отборе пробы пипеткой можно пренебречь. Препарати ная ультрацентрифуга М8Е с охлаждением, приводимая в движение электромотором, изображена на рис. 206. [c.193]

Впервые идея о применении значительной центробежной силы для осаждения и определения размеров коллоидных частиц была высказана и опробована на практике еще в 1913 г. Думан-ским. Однако потребовались долгие годы теоретических и практических изысканий, прежде чем Сведбергрм (1940 г.) были разработаны теоретические основы данного метода и создана первая ультрацентрифуга со скоростью вращения ротора до 65 ООО об1мин. К настоящему времени методы аналитического и препаративного ультрацентрифугирования получили широкое применение в исследованиях белков и нуклеиновых кислот и при изучении структурных элементов клетки. [c.142]

Важным нововведением является установка измерителя температуры в середине ротора этой ультрацентрифуги. Это оказалось возможным благодаря успешной разработке надежной системы передачи сигнала, позволяющей регистрировать изменения температуры вращающегося ротора. Во время работы центрифуги заданная температура поддерживается с точностью 0,ГС, что достигается применением системы термоэлектрического охлаждения с батареями Пельтье. В температурном интервале от —5 до +25° С, характерном для основной массы препаративных и аналитических работ, температура ротора сохраняется постоянной с точностью 0,05° С. Скорость вращения может регулироваться непрерывно в диапазоне от 1500 до 60 000 об/мин. Ультра-центрифуга hrist оснащена шлирен-системой, интерференционной и ультрафиолетовой системами. Интерференционная система позволяет работать с сильно разбавленными растворами. Интерферограммы могут быть представлены в виде кривых распределения Гаусса. Переход от шлирен-системы к интерференционной осуществляется поворотом рычага. Ультрафиолетовая система устанавливается на центрифуге независимо от других оптических систем. Оптическая плотность в ультрафиолетовой области регистрируется автоматически при помощи самописца или фотографируется. Градиенты концентрации во время седиментации регистрируются самописцем. Наряду с самописцем можно одновременно пользоваться фоторегистрирующей системой. За ходом седиментации можно следить и по изображению на матовом экране. Для фотографирования используются пластинки размером 5 X 25 см, рассчитанные на 6 снимков. Пластинки сменяются автоматически. На ультрацентрифуге hrist можно установить приставку для измерения диффузии, рассчитанную на большое количество ячеек. [c.34]

Важным моментом в препаративном центрифугировании является выбор ротора. Для быстрого отбора тяжелых фракций удобны угловые роторы. В этом случае на стенке пробирки образуется тяжелый слой, стекающий конвекционным потоком ко дну. В результате осадок собирается на дне очень быстро, хотя из-за конвекций ухудшается разрешение близко седиментирующих фракций. Лучше всего седиментация протекает в ячейках с секториальной полостью, обеспечивающих почти полное отсутствие конвекции. Подробнее об ячейках с секториальной полостью см. в гл. IX. Седиментация в роторе с подвесными стаканами в этом смысле ближе к идеальной, но форма пробирок и здесь несекториальная. К тому же в таком роторе в начале и в конце вращения может происходить взмучивание осадка. Тем не менее такие роторы широко используются при работе с градиентами плотности. В роторах Андерсона рабочие полости имеют идеальную секториальную форму, их можно наполнять и освобождать прямо во время вращения. Такие роторы более других подходят для фракционирования больших объемов вещества в градиентах плотности в условиях, близких к идеальным. Для получения максимальных ускорений стали применять роторы, сделанные из титана. [c.35]

При выборе препаративной ультрацентрифуги необходимо учитывать ее стоимость, ассортимент прилагаемых роторов, точность регуляции температуры и плавность хода (отсутствие вибрации). Температура должна устанавливаться очень точно и воспроизводимо, [c.35]

Аналитические и препаративные ультрацентрифуги изготовляются также специальным конструкторским бюро биофизической аппаратуры (Москва). Аналитические ультрацентрифуги (УДА) имеют электрический привод с питанием от генератора повышенной частоты, скорость вращения ротора до 65 000 об/мин, диапазон рабочих температур от —5 до 25° С. Улырацентрифуги снабжены несколькими современными оптическими системами. Препаративные ультрацентрифуги рассчитаны на скорость вращения ротора до 40 000 об/мин (УПР-8) и до 60 000 об/мин (УЦП-60) и снабжены несколькими роторами, в том числе и с подвесными стаканами. Конструкции отечественных ультрацентрифуг постоянно совершенствуются в соответствии с возникающими новыми задачами. — Ред.] [c.38]

Штромайер [13] описал секториальный вкладыш, при помощи которого можно определять коэффициенты седиментации биологических макромолекул прямо в препаративном роторе с подвесными стаканами. [c.68]

Это уравнение приводит полученные данные к температуре и вязкости воды при 20° С. Однако при использовании градиента концентрации сахарозы плотность р и вязкость т] меняются в радиальном направлении. Если можно считать, что осмотические явления отсутствуют и что форма и размер частиц от концентрации сахарозы не зависят, то значение го, и можно получить, рещая уравнение (IX.4). При этом использование изокинети-ческого градиента упрощает расчеты. Нолль [1] подробно описывает методику получения таких градиентов и приводит ряд соответствующих таблиц для различных типов препаративных роторов. [c.178]

Другой подход предложен Гиблером [16]. Для выбора условий препаративного ультрацентрифугирования он использует индекс характеристики ротора Ри определяемый равенством [c.191]

Зонное центрифугирование при условии, что плотность вблизи дна кюветы выше, чем плотность любого из компонентов образца, было названо Андерсоном [51 изопикническим градиентным центрифугированием . В эксперименте этого типа ни один из компонентов не достигает дна ячейки, как бы долго ни продолжалось центрифугирование. Чрезвычайно удобный для такого рода препаративной работы ротор был описан Андерсоном [61. Он представляет собой полый цилиндр, разделенный на 36 секторов. [c.418]

Пикельс [281] развил теорию седиментации для центрифуги с наклонным расположением пробирок и показал, что, зная седи-ментационную константу, можно предсказать условия, необходимые для успешного разделения при помощи препаративного ротора. Пикельс установил также, что в связи с наложением конвекционных явлений на процесс седиментации невозможно достигнуть полного разделения всех, тяжелых компонентов. [c.66]

Бимс и Пикельс [47] показали, что этот метод получения высоких скоростей вращения может быть использован в конструкции высокоскоростных центрифуг для химических и биологических исследований. Система пустотелого ротора, содержащего раствор и приводимого во вращение прямым воздушным приводом, оказалась непригодной для достижения необходимых скоростей седиг ментации. Поэтому Пикельс и Бимс [48] разработали конструкцию, в которой ротор, несущий кюветы центрифуги, подвешен в вакуумной камере к оси воздушной турбины, укрепленной над камерой. Подвеска осуществляется с помощью струнной проволоки, проходящей через масляный сальник. Эта установка постепенно совершенствовалась, и в настоящее время центрифугирование производится с помощью большого дюралюминиевого ротора с диаметром, примерно равным диаметру ротора Сведберга (180 мм), и с использованием аналогичных оптических систем для фотографирования хода седиментации белковых молекул и вирусов. Воздушная угловая ультрацентрифуга применялась для препаративного выделения вирусов (см., например, [49]). [c.503]

На 5 мл сыворотки, оставшейся после выделения подфракции липопротеидов с S( 100—400 S, наслаивают буферный раствор с плотностью 1,0055 г/см до верха пробирки объемом около 13 мл. Центрифугируют 2 ч при 105 000 g и температуре 4°С. Для этой цели удобен ротор типа 40 препаративной ультрацентрифуги Бэкман— Спинко , имеющий пробирки объемом 13,5 мл. Верхний слой объемам около 5 мл, содержащий подфракцию липопротеидов с Sf 50—100 S, осторожно отсасывают и [c.251]

Так, для препаративного разделения рибосомных субъединиц в зональный ротор Т1-15 подавали экспоненциальный градиент сахарозы [8урЬег(1, 1гетап, 1974]. В смесителе постоянного объема (700 мл) находился раствор сахарозы с концентрацией 7,4%, а в резервуаре —50%-ный раствор. Объем градиента был небольшим (всего 700 мл), что обеспечивало в роторе диапазон концентраций 7,4—38%. Вместе с подушкой из 45%-ной сахарозы градиент занимал лишь половину объема ротора — слой в [c.275]

На рис. 11-5 показаны два типа роторов для препаративной ультрацентрифуги. Угловой ротор в первую очередь предназначен для осаждения материалов . Он очень эффективен для этой цели, так как вещество проходит до стснки центрифужной пробирки короткое расстояние накапливающийся на стенке материал быстро сползает по стенке на дно пробирки. Ротор с подвесными стаканами большей частью используют для аналитического равновесного и зонального центрифугирования (будет описано вкратце). [c.282]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология