Агароза альбумин

РАЗДЕЛЕНИЕ О, Е-ТРИПТОФАНА АФФИННОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ НА КОЛОНКЕ С ИММОБИЛИЗОВАННЫМ НА АГАРОЗЕ БЫЧЬИМ СЫВОРОТОЧНЫМ АЛЬБУМИНОМ [c.367]

А. Иммобилизованные гидрофобные лиганды Бычий сывороточный альбумин—агароза + + [c.378]

Иммобилизация альбумина и IgG на агарозе [c.135]

Количество цельной сыворотки, которое удается разделить в препаративном ИЭФ, весьма незначительно из-за избытка альбумина. Не следует наносить более 10—20 мг сывороточных белков при фокусировании в широком диапазоне pH и 80—100 мг — в узком диапазоне. Поэтому лучше предварительно очистить антитела, например, путем осаждения сульфатом аммония, препаративным электрофорезом в блоке агарозы, аффинной хроматографией или комбинацией этих методов (см. гл. 2). [c.141]

Хроматографические исследования проводились в колонках (90X16 мм) с гелями 4%-ной агарозы, содержащими 5,5 мкэкв/мл каприлата. Гели промывались 0,05 М. Ыа-ацетатным буфером (pH 6,0). Введение белков (5—10 мг) указано стрелками. Скорость потока постоянна и равна 43 мл/ч. Регистрировалась оптическая плотность элюатов при 280 нм. Для целей сравнения были осуществлены три отдельных хроматографирования. ЯА — яичный альбумин. Л Г — лактоглобулин, БСЛ — бычий сывороточный альбумин, ОиС1 — гуанидинхлорид. [c.154]

Хроматография на альбумин — агарозе проводилась на колонках (20X0,9 см), уравиовешенных фосфатным буфером (0,02 М фосфат натрия, pH 7,4, 0,15 М хлорид натрия) яри комнатной температуре. Образец интерферона (5 мл), содержащий 125000 интерфероновых единиц (14 000 ед. в 1 мл образца), наносился на колонку и колонка промывалась уравновешивающим буфером. В первом пике элюировалась большая часть белка, но небольшая часть ин-терфероновой активности. Активность элюировалась только при подаче на колонку 0,02 М раствора фосфата натрия (pH 7,4), содержащего 1 моль/л хлорида [c.377]

Считается, что сефароза устойчива в области pH 4—9 с ней не рекомендуется работать при температурах иже 0°С или выше 40 °С. Сефароза устойчива к действию концентрированных растворов солей или мочевины. Куатреказас [14] указывает,, что на частицы агарозы существенно не влияет продолжительное воздействие 6М раствора гуанидинхлорида или 7М раствора мочевины. Поэтому агарозные аффинные сорбенты можно отмывать от белков этими денатурирующими растворами. В течение 2—3 ч при комнатной температуре на агарозу не действуют 0,1М гидроксид натрия или 1М хлорная кислота. Ни 50%-ный (по объему) водный диметилформамид, ни 50%-ный (по объему) водный этиленгликоль не меняют структуру агарозы. Эти растворители полезны при аффинной хроматографии относительно плохо растворимых в воде соединений, например тироксина и стероидов. Аффинные сорбенты на основе сефарозы можно хранить при 4° С в виде водной суспензии с до бавкой антибактериального агента. Длительность хранения определяется лишь стабильностью связанного аффинного лиганда. Однако агарозные аффинные сорбенты полностью разрушаются при высушивании или замораживании. Согласно данным Аксена и Эрнбека )[3], эти сорбенты можно лиофилизовать, если добавить к ним декстран, глюкозу и сывороточный альбумин. Химическая стабильность биогеля А такая же, как у сефарозы. [c.16]

Как уже отмечалось, ацетат целлюлозы является вполне подходящей средой для иммунопреципитации, поэтому его можно использовать также для электроиммуноанализа и в меньшей степени для перекрестного иммуноэлектрофореза. Существенное различие между ацетатом целлюлозы и агарозой состоит в том, что в первом практически отсутствует электроэндосмос. В результате при pH 8,6 большинство антител будет двигаться в электрическом поле к аноду. При анализе антигенов, подвижность которых лишь ненамного превышает подвижность антител, последние будут мигрировать в сторону, противоположную от зоны нанесения антигенов, что приведет к образованию пиков преципитации, лишенных базовой линии. Чтобы свести к минимуму подвижность антител, необходимо снизить pH буферного раствора. Электроиммуноанализ альбумина был осуществлен при pH 6,5 [717], а лактоферрина — при pH 7,4 [1125]. Белки сыворотки крови, обладающие подвижностью ог и ог-глобули-нов, удалось успешно разделить при pH 8,6, но для разделения трансферрина и иммуноглобулинов пришлось снизить pH до 7,4. [c.262]

В настоящее время при разделении белков плазмы на основные фракции альбуминов и глобулинов метод электрофореза на фильтровальной бумаге заменяется электрофорезом на ацетате целлюлозы или в агарозных гелях (рис. 101), (Лучше ис-пользовать агарозу, а не агар, поскольку сильно заряженный агаропектиновый компонент взаимодействует с рядом белков и [c.329]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология