Поляризационный флуоресцентный

ПОЛЯРИЗАЦИОННЫЙ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ ИММУНОАНАЛИЗ [c.140]

Таблица 10.4. Клинические характеристики некоторьк методик поляризационного флуоресцентного иммуноанализа

ПОЛЯРИЗАЦИОННЫЙ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ ИММУНОАНАЛИЗ 138 [c.277]

ПОЛЯРИЗАЦИОННЫЙ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ ИММУНОАНАЛИЗ 140 [c.277]

Введение в положение 9 акридина ароматических или непредельных алифатических заместителей оказывает очень малое влияние на полосы, обусловленные переходами в незамещенном акридине. Тщательное изучение спектральных свойств 9-замещенных акридина методами абсорбционной и флуоресцентно-поляризационной спектроскопии показало, что в невозбужденном состоянии группировка акридина и заместитель значительно повернуты относительно друг друга. Копланарность возникает лишь в возбужденном состоянии [c.120]

Флуоресцеины 840, 851, 852, 1417 Флуоресцентная спектроскопия 59 Флуоресцентное беление 722 Флуоресценция 201, 852, 1428, гашение 1390 и сл. красителей 1389—92 поляризационная 411 спектры 1390 Формальдегид 238, 242, 675—678, 680, 763, 806, 820, 836, 837, 839, [c.1624]

Для измерения слабых интенсивностей флуоресценции были использованы фотоэмиссионные ячейки типа фотоумножителя, в особенности чувствительные к голубой области спектра (тип 931 А) или к красной области (тип 7102). При этом требуются довольно дорогие высоковольтные стабилизаторы напряжения и измерительные приборы, имеющие большой импеданс. Следует отметить, что фотоумножитель 931 А имеет различную чувствительность в зависимости от направления плоскости поляризации падающего пучка. Следовательно, при поляризационных измерениях рядом с баллоном фотоумножителя нужно ставить рассеиватель из матового стекла или сам баллон должен быть обработан карборундом до появления матовой поверхности. Детектор не должен реагировать на возбуждающий свет, отраженный или рассеянный от образца или от других предметов. Поэтому перед детектором помещают фильтр, пропускающий флуоресцентное излучение, но не пропускающий возбуждающее излучение. В промышленности выпускается много недорогих цветных фильтров ограниченной полосы, однако большинство из них сами флуоресцируют при возбуждении светом в области ближнего ультрафиолета. В том случае, когда введение поправки на фон является нежелательным, в качестве фильтра можно использовать раствор каких-либо нефлуоресцирующих веществ (например, бихромата калия) или некоторых окрашенных нефлуоресцирующих пленок. [c.175]

Основным неизотопным методом во Франции является ИФА, который применяется с 1985 г. В ближайшее время следует ожидать значительного расширения использования этого метода. "Анализы с помощью ФИА не проводятся вообще, хотя ситуация в ближайшем будущем, по-видимому, изменится. Интересно, что мониторинг лекарственных препаратов, обычно осуществляемый с помощью флуоресцентного поляризационного иммуноанализа, во Франции выполняется с помощью ИФА. Этот факт наглядно показывает, что часто выбор метода определяется не его преимуществом, а наличием готовых реагентов. [c.18]

К физическим методам относятся методы экстракции, поляризационная микроскопия, флуоресцентная микроскопия, окрашивание жирорастворимыми красителями. [c.146]

С помощью флуоресцентной микроскопии можно увидеть компоненты, которые трудно увидеть при применении других методов, локализовать вещество путем специфического связывания и определить ориентацию с помощью поляризационной флуоресценции. Как это делается, видно из следующих примеров. [c.54]

Пример 15-Р. Определение ориентации молекул хлорофилла в хлоропластах с помощью поляризации собственной флуоресценции. Поляризацию красной флуоресценции хлорофилла в отдельном хлоропласте можно измерить с помощью флуоресцентного поляризационного микроскопа (см. гл. 2). Путем измерений, выполненных с искусственно иммобилизованным хлорофиллом, были определены углы между плоскостью поляризации флуоресценции и осями хлорофилла. Следовательно, зная из эксперимента плоскость поля ризации флуоресценции хлоропластов, можно определить ориентацию молекул хлорофилла в хлоропластах. [c.443]

Пример 15-С. Определение ориентации ДНК в хромосомах с помощью поляризации внесенной флуоресценции. В примере 15-П было показано, что флуоресцирующий хромофор акридиновый оранжевый интеркалирует между парами оснований ДНК и что его плоскость перпендикулярна оси спирали. Этот краситель также связывается внутри клеток с хромосомами эукариотов, С помощью флуоресцентного поляризационного микроскопа была измерена поляризация флуоресценции акридинового оранжевого относительно оси вытянутых хромосом, и эти данные были [c.443]

Прежде чем перейти к поляризационному флуоресцентному иммуноанализу (ПФИА), полезно обсудить некоторые теоретические основы метода. Так как эти вопросы хорошо освещены в литературе, то здесь мы рассмотрим только основные принципы [6-9]. [c.140]

Хотя стоксов сдвиг флуоресцеина невелик (23 нм) и поэтому флуоресцеиновая метка весьма чувствительна к рассеянию света, ее чаще всего применяют для определения соединений, циркулирующих в организме в концентрациях порядка мкмоль/л (например, лекарственных препаратов и наркотиков). Как показано на рис. 10.2, флуоресцеин характеризуется также большим изменением поляризации излучаемого света и в силу этого особенно пригоден для поляризационного флуоресцентного иммуноанализа (ПФИА). Известны несколько методов сшивки флуоресцеина с [c.142]

Таблица 103. Характеристики некоторых безразделительных методик поляризационного флуоресцентного иммуноанализа

Пример 2-И. Поляризационно-флуоресцентная микроскопия. Известно, что акридиновый оранжевый способен интеркалиро-вать между парами оснований ДНК. Плоскость поляризации флуоресценции акридинового оранжевого известна, а отсюда известен и угол поляризации флуоресценции относительно оси спирали ДНК. Акридиновый оранжевый прочно связывается с хромосомами, как полагают, за счет связывания с ДНК. Поэтому поляризация флуоресценции хромосом дает возможность установить ориентацию молекулы ДНК относительно хромосомы. [c.55]

Измерения поляризации требуют применения поляризационных материалов, таких, как призма Николя или поляроидный дихроичный фильтр. Последний особенно удобен, но эффективен только для видимого света. Поэтому дихроичный фильтр может быть использован для флуоресцентного излучения, но не для возбуждающего света с длиной волны в ультрафилетовой области . [c.175]

Р И С. 103. Прибор для изучения люминесценции полимерных систем. Свет от ртутной лампы среднего давления АН4 (А) фокусируется с помощью конденсора на небольшом отверстии Д и с помощью коллиматора направляется в виде параллельного пучка. Пучок может прерываться периодически сектором Ви приводимым в движение синхронным мотором Бх или затвором Е. Параллельный пучок монохроматизируется фильтром Жь падает на зеркало Зх, отражающее большую часть пучка, и затем отражается зеркалом Зг- Часть падающего пучка проходит через З1 и отражается З3 по направлению к кремниевому фотоэлементу Их или при необходимости по направлению к стандартному образцу флуоресцирующего вещества К, снабженного подходящим фильтром Жг- Пучок отражается от З2 и, проходя через поляризатор Л1, падает на образец О под углом 45°. Ось поляризации должна быть параллельна поверхности образца. Флуоресцентное свечение образца фокусируется на детекторе — кремниевом фотоэлементе — Яг с помощью линзы Гз и подходящего фильтра Жз. поглощающего любое возбуждающее излучение. Излучаемый образцом пучок света может периодически прерываться сектором В , приводимым в движение мотором Б . Для измерения фосфоресценции соотношение фаз секторов В1 и В2 должно быть таким, чтобы проходило только фосфоресцирующее излучение. При поляризационных измерениях В2 заменяют циркулярной пластинкой поля-роидиого дихроичного фильтра Л2. [c.176]

Этот метод был развит Джилмором, Гибсоном и Мак-Клюром [106], приложившими максимум усилий для разрешения дополнительных трудностей низкотемпературных измерений были сделаны поправки на поляризационные эффекты, показатель преломления [107] и т. д. Неопределенности в большинстве этих измерений автоматически исчезают, если поместить рассеивающую поверхность сравнения и флуоресцентную поверхность в интегрирующую сферу [108], но при этих измерениях трудно обеспечить регулирование температуры в широких пределах. [c.636]

При использовании в каналах флуоресцентного света поляризационных фильтров в качестве анализаторов можно провести определение вертикального и горизонтального компонентов поляризации флуоресценции. Выпускается также РАС5440 с двухлазерной оптической скамьей. Эта модификация позволяет одновременное использование двух лазерных лучей для двойного рассеяния и тройного возбуждения флуоресценции и сортировки. В этом случае требуется добавление третьего канала регистрации флуоресценции. [c.191]

Флуоресцентный поляризационный анализ может быть использован для количественного определения коэффициентов враща-тельной диффузии. Применение для этой цели стандартного метода измерения поляризации флуоресценции имеет два неудобства 1) с его помощью измеряется усредненная величина, что нежелательно, когда молекула имеет два вращательных коэффициента (например, палочкообразная молекула может вращаться вокруг своей длинной оси или переворачиваться так, что вверху оказывается то один конец, то другой), и 2) он требует измерения собственной поляризации, что выполняется путем изучения поляризации в растворах с возрастающей вязкостью и экстраполяции к бесконечной вязкости. Такая экстраполяция часто не имеет успеха, потому что вещества, добавляемые для увеличения вязкости, иногда оказывают влияние на конформа- [c.444]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология