также единица инфекционности для

В предыдущих разделах настоящей главы рассмотрены методы определения количества вируса, основанные на его биологических свойствах способности размножаться в культуре клеток и куриных эмбрионах, а также агглютинировать эритроциты. Очевидно, что эти методы не пригодны для определения числа физических частиц вируса. Соотношение между единицами гемагглютинации или инфекционности и числом вирусных частиц в очень большой степени зависит от штамма вируса, и поэтому часто возникает необходимость определения числа вирусных частиц с помощью электронной микроскопии. Наиболее распространенный метод подсчета вирусных частиц состоит в том, что образец исследуемого вируса смешивают с равным объемом суспензии шариков латекса с известной концентрацией эти шарики имеют примерно такой же диаметр (около 100 нм), что и вирионы вируса гриппа. Полученную смесь после негативного контрастирования (например, фосфорно-вольфрамовой кислотой) наносят на сеточки для электронной микроскопии и сравнивают число шариков латекса и вирусных частиц в одних и тех же полях (рис. 6.4). Зная концентрацию шариков латекса в исходной смеси, нетрудно подсчитать концентрацию вирусных частиц [15]. [c.181]

Время бляшкообразования под бентонитовым покрытием для различных вирусов неодинаково. Результаты образования бляшек для энтеровирусов, например, учитывают через 36 — 48 ч. Культуральные сосуды переворачивают монослоем вверх, смывая средой дегенерировавшие клетки. Бляшки, образуемые различными типами энтеровирусов, отличаются по величине, интенсивности развития и характеру краев. Поскольку одна вирусная инфекционная частица (вирион) образует одну бляшку, метод бляшкообразования позволяет точно определить количество инфекцио чных единиц в материале, а также измерить нейтрализующую активность вирусных антител. [c.268]

Мы отметили также, что для превращения неорганического фосфора в вирусную ДНК необходимо минимум 12 минут. Таким образом, любой атом фосфора, который должен войти в состав новых вирусов, должен быть усвоен бактериями не позднее, чем к концу первой половины 24-минутного периода, в течение которого в клетке образуются вирусы. И действительно, А. Дорман обнаружил, что 24-минутный скрытый период делится на две 12-минутные фазы. В опытах, проведенных в Колд Спринг Харбор, он вскрывал зараженные бактерии на разных стадиях. В первую половину скрытого периода в бактериальной клетке не было полностью сформировавшихся инфекционных вирусных частиц. Даже вирус, заразивший бактерию, исчезал. Затем, через 12 минут, появлялась первая инфекционная частица, за ней другие, пока число их не достигало 200, как раз перед тем, как клетка разрывалась. Объясняется все это просто. Исходный, заразивший бактериальную клетку вирус сбросил свою белковую оболочку при вхождении в клетку и потому перестал быть инфекционной единицей. Ни одна вирусная частица не может появиться в клетке до тех пор, пока не будет изготовлена и не соединится с ДНК по крайней мере одна новая белковая оболочка. Этот процесс занимает, очевидно, около 12 минут. [c.144]

Бензер решил установить, не обусловлен ли фенотип гП-мутантов из его коллекции повреждениями более чем в одной функциональной единице. То обстоятельство, что два г11-мутанта при разнообразных экспериментальных условиях проявляют один и тот же фенотип, само по себе вовсе не гарантирует, что соответствующие мутационные изменения затрагивают одну и ту же функциональную единицу. Мы уже упоминали, например, что стерильные пятна типа г на обычных штаммах Е. соИ образуются при разных мутациях, удаленных друг от друга настолько сильно, что вряд ли они затрагивают одну и ту же функциональную единицу. И если разные гП-мутанты неспособны размножаться на непермиссивных штаммах К, то это не обязательно означает, что всем им свойствен один и тот же функциональный дефект генетического материала. Для выяснения принадлежности двух различных мутаций гП к одной и той же функциональной единице Бензер воспользовался так называемым цис-транс-те-стом, или тестом на комплементарность (фиг. 153), приспособив его для-работы с фагами. Этот тест был разработан ранее применительно к высшим организмам стой же целью, т. е. для изучения природы функциональной единицы. Комплементационный тест Бензера был основан на том, что на штамме К, зараженном одновременно гИ-мутантом и фагом дикого типа г, оба типа размножаются нормально. Это означает, что нормальный ген родительского фага дикого типа способен обеспечивать функцию, необходимую для размножения на штамме К не только фага дикого типа, но и дефектного гП-мутанта. На языке генетики можно сказать, что при смешанном заражении штамма К двумя фагами ген дикого типа г доминирует над мутантным аллелем гН. В тесте на комплементарность клетки штамма К заражают двумя гИ-мутантами (каждый из которых в одиночку не способен размножаться на штамме К), чтобы выяснить, смогут ли они при смешанном заражении помогать друг другу и образовывать инфекционное потомство. Если два мутанта способны к такому совместному размножению, то это означает, что две мутации этих мутантов локализованы в разных функциональных единицах фагового генома. Неспособность одного из мутантов размножаться на штамме К (иными словами, его фенотип гН) свидетельствует о том, что этот мутант неспособен осуществлять какую-то определенную функцию или вызывать синтез какого-то определенного белка, необходимого для размножения фага в зараженной клетке. Фенотип гП второго мутанта также свидетельствует о неспособности осуществлять какую-то необходимую функцию, но только другую, т. е. [c.310]

Самоочищение водоемов в известной мере зависит от интенсивности солнечной радиации и температуры окружающей среды. Прямая солнечная радиация снижает биологическую активность микроорганизмов, в том числе и вирусов [28]. Губительные ее свойства связываются с действием ультрафиолетовой части солнечного спектра. Авторами [1], например, установлено, что ультрафиолетовые лучи обладают выраженным инактивирующим действием на вирус гриппа. Для разрушения его инфекционных свойств ультрафиолетовой частью спектра при концентрации вируса гриппа APR8 по реакции ге-магглютинации от 512 до 2048 гемагглютинирующих единиц в 1 мл суспензии, а также при высоте облучаемого слоя не более 1,4 мм и бактерицидной облученности равной 37 бактам на 1 кв. м достаточно экспозиции в одну минуту. Более низкое стояние солнца над горизонтом (определенная часть ультрафиолетовых лучей рассеивается атмосферой) вызывает уменьшение общей дозы ультрафиолетового облучения. В этот период года пасмурных дней больше. Облачность, как известно, также рассеивает ультрафиолетовую часть солнечного спектра. От солнечной радиации защищает водоемы также ледовый и снежный покров. Логично предположить уменьшение дозы ультрафиолетовой радиации, получаемой водоемом в осенне-зимние сезоны года. [c.75]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология