Альдолаза растворимость

Выделение альдолазы из скелетных мышц кролика и изучение ее свойств в растворимом и иммобилизованном состоянии. [c.503]

При некрозах отдельных участков мышц, например при инфаркте миокарда, наблюдается, как уже указывалось, выход из тканей легко растворимых ферментов (креатинкиназы, дегидрогеназ, трансаминаз, альдолазы и др.) в плазму крови. [c.455]

Методическую основу работы составляет получение иммобилизованного препарата альдолазы, на котором адсорбируется добавленный извне растворимый белок. После удаления несвязанного белка при промывании увеличение концентрации белка в суспензии иммобилизованной альдолазы, а также появление в ней активности ГАФД позволяют сделать заключение о взаимодействии растворимого белка с иммобилизованным (т. е. об образовании комплекса альдолаза—ГАФД). [c.389]

Определение количества иммобилизованной альдолазы и числа субъединиц, вступивших в реакцию, проводят описанными выше методами (с. 386). Для растворимой альдолазы из мышц кролика используют значение Лгсм при 280 нм, равное 9,1. [c.390]

Используют следующие конечные концентрации реактивов фруктозо-1,6-дифосфат — 2 мМ, арсенат Ыа — 5 мМ, НАД — 2 мМ иммобилизованная альдолаза — 100 мкл суспензии (удобно разводить осевшую агарозу буфером в соотношении 1 1 и после этого отбирать иммобилизованную альдолазу в пробу на активность). Количество ГАФД, необходимое для полного сопряжения, подбирают экспериментально, внося в пробу нарастающие объемы растворимого препарата. Если двукратное увеличение количества фермента в пробе не приводит к росту активности альдолазы, в работе используют его предшествующий объем. Оптическую плотность измеряют с интервалом 15 с непосредственно после заполнения кюветы. Определяют величины удельной активности, Кт, 1 тах ДЛЯ иммобилизовзнного фермента и сравнивают их с соответствующими значениями этих параметров растворимой альдолазы. [c.390]

Растворимость белков обычно увеличивается с повышением температуры, если это повышение не вызывает денатурации. Однако нередко повышение температуры приводит к резкому уменьшению растворимости. Так, например, альдолаза мышц и карбокснгемоглобин человека при повышении температуры от О до 20° выпадают в кристаллическом виде. [c.16]

Что же касается влияния температуры на растворимость белка, то здесь такого общего правила нет. Так, растворимость таких белков, как, например, глобулины семян, фос-форилаза мышц и пепсин, растет с повышением температуры. При этом увеличение растворимости зависит от окружающей среды. Для некоторых белков растворимость возрастает с повышением температуры в том случае, если они находятся в разбавленном солевом растворе, тогда как для других необ ходимы крепкие растворы солей или водно-спиртовые смеси. В то же время растворимость белка часто резко убывает с повышением температуры, и это уменьшение растворимости можно наблюдать как в водных, так и в солевых растворах. Примером подобных белков могут быть альдолаза мышц, сульфат инсулина и различные формы гемоглобина. Интересно, что на растворимость последнего белка температура оказывает двоякий эффект. Так, при повышении температуры от О до 25° происходит уменьшение растворимости оксигемоглобина, метге-моглобина и карбоксигемоглобина. Однако при дальнейшем увеличении температуры до 40° растворимость снова начинает увеличиваться. [c.181]

Альдолаз а—расщепляет гексозодифосфат на две фосфотриозы диоксиацетоифосфат и глицеринальдегидфосфат. Она широко распространена в тканях животных и растений, а также в микроорганизмах. Количество ее в скелетных мышцах кролика достигает почти 5% от всего растворимого в воде белка. Выделенный из мышц Барановским миоген А оказался альдолазой. Она кристаллизуется. Альдолазная активность миогена мышц установлена Энгельгардтом. Мышечная и дрожжевая альдолазы, называемые также зимогексазой, отличаются одна от другой только в средствах инактивации. [c.389]

Общего правила, выражающего влияние температуры на растворимость белка, нет. Растворимость многих белков растет с повышением температуры. В случае одних белков растворимость увеличивается в разбавленном, а в случае других — в концентрированном растворе соли, а также в водно-спиртовых смесях. К числу белков, очищенных или выделенных в кристаллическом состоянии путем использования различия в растворимости, относятся глобулины семян [32], фосфорилаза мышц [23] и пепсин [14]. В то же время растворимость белка часто резко убывает с повышением температуры, что изображено на рис. 6. Альдолаза мышц [96] и карбокоигемоглобин человека [29] были выделены в кристаллическом состоянии из концентрированных растворов (NH4)2SO4 или фосфатов калия путем повышения температуры насыщенного раствора от 0 до 20°. Указанное явление, невидимому, чаще наблюдается в условиях, при которых происходит высаливание, однако оно не ограничивается этими случаями. Согласно опубликованным данным [9г], сульфат альбумина плазмы и сульфат инсулина обнаруживают отрицательный температурный коэффициент растворимости в воде. [c.49]

Рис. 3.6. Растворимость альдолазы из мышц кролика в растворе сульфата аммония при pH 7,0. Светлыми кружками обозначена растворимость чистого фермента lg (растворимости) =6,30—2,84Х (конц. соли). Черные кружки означают растворимость смеси ферментов из мышц кролика — альдолазы, пируваткиназы, глицеральдегидфосфатдегидрогеназы и лактатдегидрогеназы в соотношении 3 3 3 1. (Неопубликованные результаты автора.)

Справочник химика 21

Химия и химическая технология