Альдолаза выделение

Выделение альдолазы из скелетных мышц кролика [c.248]

Выделение альдолазы из скелетных мышц кролика и изучение ее свойств в растворимом и иммобилизованном состоянии. [c.503]

Альдольная конденсация глицеринового альдегида с 1-фосфатом диоксиацетона легко протекает под влиянием фермента альдолазы [23, 24] или 0,001 н. раствора гидрата окиси бария [25] с образованием о-фруктозо-1-фосфата, выделенного из смеси углеводов. Вопрос об энзиматических методах синтеза моносахаридов подробно освещается в обзорной статье [26]. [c.7]

Совершенно другой тип альдолаз (альдолазы класса И) выделен из микроорганизмов. Ферменты этого типа проявляют субстратную специфичность. [c.288]

Для получения связанных с матрицей мономерных форм ферментов используют, как правило, прием, предложенный Чаном в 1970 г. [12]. Метод заключается в обработке олигомерных белков, ковалентно иммобилизованных через одну из субъединиц, в жестких условиях, приводящих к полной денатурации всех субъединиц и разворачиванию всех полипептидных цепей. Несвязанные с матрицей ковалентной связью полипептидные цепи переходят в раствор, а последующее удаление денатурирующего агента должно приводить к постепенной ренатурации иммобилизованной субъединицы. Основным недостатком метода является наличие. стадий денатурации и ренатурации иммобилизованного мономера, поскольку последний процесс никогда не протекает со 100%-ной эффективностью. С помощью описанного подхода авторам, предложившим его, удалось получить активные мономеры альдолазы и трансальдолазы, однако удельная активность изолированных мономеров была значительно ниже, чем исходных олигомерных форм [13, 14]. В большинстве же случаев активность выделенных таким способом мономеров ферментов полностью отсутствовала или была крайне низкой. Следует также отметить, что выделение мономерных форм с низкой удельной активностью практически не позволяет прийти ни к какому конкретному выводу о роли [c.83]

Для опытов использовался хлористый аммоний особой чистоты А-Г, растворы готовились на свежеперегнанном тридистилляте. Исследование проведено с кристаллическим бычьим сывороточным альбумином фирмы Ko h-Light Laboratories, Ltd. и отчасти с кристаллическим препаратом альдолазы, выделенным из мышц кролика по методу, описанному в работе [6]. Гомогенность белковых препаратов проверялась с помощью гель-фильтрации на сефадексе G-100 и электрофореза в полиакриламидном геле. [c.229]

Первая стадия брожения состоит в том, что из гексозодифосфата под влиянием фермента гексокиназы , ( альдолазы ), который может быть выделен в кристаллическом виде, образуются две молекулы три-сзофосфата, а именно фосфат диоксиацетона и фосфат глицеринового альдегида. [c.120]

Кристаллы отделяют центрифугированием, когда в супернатанте остается меньше 25% альдолазной активности (определение см. на с. 246). Чем полнее отделена альдолаза, тем лучше удается выделение глицерол-З-фосфатдегидрогеназы. Если глицерол-З-фосфатдегидрогеназа начинает кристаллизоваться на этом этапе (ее кристаллы имеют форму игл или пластинок), нужно быстро и на малой скорости от-центрифугировать осадок альдолазы так, чтобы более легкие кристаллы дегидрогеназы остались в супернатанте. Контроль за формой кристаллов осуществляют с помощью микроскопа. [c.268]

Выделение гомогенной альдолазы (фруктозо-1,6-дифосфат — о-глйцеральдегид-З-фосфат-лиазы) из грудной мышцы цыпленка состоит из шести стадий и включает ионообменную хроматографию на целлюлозе и дробное осаждение суль(ратом аммония [c.25]

Ферменты, молекулы которых состоят из нескольких полипептидных цепей, диссоциируют на субъединицы под влиянием тех же агентов, какие обычно используются для денатурации белков. Для некоторых белков хорошо исследован процесс ассоциация — диссоциация. Рассмотрим два наибо-,п ее подробно изученных в этом отношении белка — глутаматдегидрогеназу и альдолазу. Молекула глутаматдегидрогеназы обладает тремя типами организации на уровне четвертичной структуры. Непосредственно после выделения ее молекулярный вес составляет от 1,0-10 до 1,3-10 (определения по скорости седиментации и диффузии). В результате диссоциации фермента, которая стимулируется восстановленным НАДФ, некоторыми пуриновыми нуклеотидами или просто разбавлением фермента, получаются субъединицы [c.116]

Первые этапы этого пути сходны с апотомическим путем наиболее характерным отличием является образование 2-кето-3-дезокси-6-фосфо-глюконата (выделенного в виде кристаллической натриевой соли) и его расщепление фзрментом типа альдолазы [c.212]

Альдолаз а—расщепляет гексозодифосфат на две фосфотриозы диоксиацетоифосфат и глицеринальдегидфосфат. Она широко распространена в тканях животных и растений, а также в микроорганизмах. Количество ее в скелетных мышцах кролика достигает почти 5% от всего растворимого в воде белка. Выделенный из мышц Барановским миоген А оказался альдолазой. Она кристаллизуется. Альдолазная активность миогена мышц установлена Энгельгардтом. Мышечная и дрожжевая альдолазы, называемые также зимогексазой, отличаются одна от другой только в средствах инактивации. [c.389]

Общего правила, выражающего влияние температуры на растворимость белка, нет. Растворимость многих белков растет с повышением температуры. В случае одних белков растворимость увеличивается в разбавленном, а в случае других — в концентрированном растворе соли, а также в водно-спиртовых смесях. К числу белков, очищенных или выделенных в кристаллическом состоянии путем использования различия в растворимости, относятся глобулины семян [32], фосфорилаза мышц [23] и пепсин [14]. В то же время растворимость белка часто резко убывает с повышением температуры, что изображено на рис. 6. Альдолаза мышц [96] и карбокоигемоглобин человека [29] были выделены в кристаллическом состоянии из концентрированных растворов (NH4)2SO4 или фосфатов калия путем повышения температуры насыщенного раствора от 0 до 20°. Указанное явление, невидимому, чаще наблюдается в условиях, при которых происходит высаливание, однако оно не ограничивается этими случаями. Согласно опубликованным данным [9г], сульфат альбумина плазмы и сульфат инсулина обнаруживают отрицательный температурный коэффициент растворимости в воде. [c.49]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология