Альбумин плазмы сульфат

Плазма крови. Общее количество крови у взрослого человека в норме составляет примерно 5 л. Из них на долю плазмы приходится 2,75 л, а на долю эритроцитов —2,22 л. Лейкоциты занимают объем 0 мл, тромбоциты — около 20 мл. Основным компонентом плазмы являются белки. В плазме всего идентифицировано более 70 различных белков. В основе классификации белков лежат их растворимость и методы выделения. Например, если к плазме добавить равный объем насыщенного раствора сульфата аммония, выпадают глобулины. Если затем удалить глобулины и добавить твердый сульфат аммония, выпадают альбумины. Хотя этот метод классификации кажется произвольным, белки, находящиеся в этих фракциях, близки не только по растворимости, но и по функции. [c.438]

Альбумин можно легко выделить в кристаллическом виде из плазмы крови лошади методом высаливания, сходным с методом, описанным для яичного альбумина. Большинство глобулинов осаждается при полунасыщении раствора сернокислым аммонием (т. е. (Приблизительно при 2 М его концентрации см. ниже) [30] увеличение концентрации соли вызывает осаждение кристаллического альбумина (ом. табл. 2). Однако осажденный альбумин не является гомогенным [30, 108, 237, 245] и разделяется на несколько четко различимых фракций. Одна из них не содержит углевода и, если судить по растворимости, ведет себя, как гомогенное вещество эту фракцию можно выделить при рН 4 в виде нерастворимого в воде сульфата альбумина [106], а также с по- [c.55]

Разделение сложной смеси белков на индивидуальные белки осуществляется при помощи растворителей и (или) электролитов при этом выделяют различные белковые фракции в зависимости от их растворимости. Это свойство белков лежит в основе так называемых методов высаливания, часто используемых в клинических лабораториях. Белки плазмы осаждают при различных концентрациях сульфата натрия или сульфата аммония. При этом белки разделяют на три основные группы фибриноген, альбумин и глобулин. [c.319]

Жидкость крови, свободная от клеток, носит название плазмы крови. На долю плазмы приходится около 55% общей массы крови. В ней растворены сахара, гормоны, витамины, соли и прочие низкомолекулярные вещества, а также многочисленные белки крови. Иммунологи, как правило, имеют дело не с плазмой, а с сывороткой крови. Так называют плазму, освобожденную от фибриногена. Ее очень просто получить, если дать крови в пробирке свернуться в отсутствие антикоагулянтов и удалить образовавщийся сгусток центрифугированием (предварительно его надо отделить от стенки стеклянной пробирки, к которой он прилипает). Основную массу белков сыво тки составляют альбумины и глобулины. Это грубое деление белков сыворотки на два класса было первоначально введено, исходя из различия в их растворимости. Глобулины осаждаются полунасыщен-ным раствором сульфата аммония (- 2 М), а альбумины в нем растворимы. По растворимости же глобулины иногда подразделяют на эуглобулины ( истинные глобулины), нерастворимые в дистиллированной воде, и псевдоглобулины — в ней растворимые. [c.83]

Общего правила, выражающего влияние температуры на растворимость белка, нет. Растворимость многих белков растет с повышением температуры. В случае одних белков растворимость увеличивается в разбавленном, а в случае других — в концентрированном растворе соли, а также в водно-спиртовых смесях. К числу белков, очищенных или выделенных в кристаллическом состоянии путем использования различия в растворимости, относятся глобулины семян [32], фосфорилаза мышц [23] и пепсин [14]. В то же время растворимость белка часто резко убывает с повышением температуры, что изображено на рис. 6. Альдолаза мышц [96] и карбокоигемоглобин человека [29] были выделены в кристаллическом состоянии из концентрированных растворов (NH4)2SO4 или фосфатов калия путем повышения температуры насыщенного раствора от 0 до 20°. Указанное явление, невидимому, чаще наблюдается в условиях, при которых происходит высаливание, однако оно не ограничивается этими случаями. Согласно опубликованным данным [9г], сульфат альбумина плазмы и сульфат инсулина обнаруживают отрицательный температурный коэффициент растворимости в воде. [c.49]

Выше было уже упомянуто об образовании слабо растворимых солей (например, хлоридов и сульфатов) белковых катионов з кислой по отношению к изоэлектрической точке области [195, 202] и об использовании этого явления, например, для выделёнйя кристаллического сульфата альбумина плазмы [106]. Было получено также несколько кристаллических солей лизоцима [204]. Белковые соли, содержащие тяжелые комплексные анионы, например воль-фрамат-, фосфовольфрамат-, трихлорацетат- или метафосфатионы, а также соли, содержащие катионы тяжелых металлов — цинка, меди или ртути, — известны уже давно и применялись для освобождения раствора от белков перед некоторыми анализами [10, 78]. Предполагалось, что эти реагенты при их применений действуют на белки сильно денатурирующим образом. Вслед з-а кристаллизацией цинковой соли инсулина [205, 206] и метафос-фата яичного альбумина [207] недавно последовало приготовление серии кристаллических производных инсулина [208] и сывороточных альбуминов человека [209, 210]. Последние были получены в присутствии ионов, концентрация которых была недостаточна для высаливания (если не добавлять в количестве 5—30% органического растворителя и во избежание денатурации не вести процесс при низких температурах). В этих условиях многие из указанных солей менее растворимы, чем свободный белок или соли с такими катионами, как натрий или калий, и, следовательно, могут найти применение при выделении белков [51] (4). Были получены также кристаллические додецилсульфатпроизводные Р-лактоглобулина [211]. [c.51]

Альбумины растворимы в воде, выпадают в осадок при пасы-щенпи раствора сульфатом аммония, легко подвергаются тепловой денатурации. Эти белки встречаются как у животных, так и в расте-]шях, например альбумин яйца, альбумин плазмы крови, лакталь-бумин молока, растительные альбумины. [c.24]

Первые попытки разделения белков плазмы были основаны на фракционном осаждении их сульфатом аммония или спиртом. Фибриноген легко может быть получен методом высаливания. Электрофоретический анализ кровяной сыворотки показывает наличие в ней четырех основных фракций, названных альбумином и а-, р- и Y- Глoбyл и нa-ми. С улучшением техники разделения было показано, что эти фракции являются не индивидуальными белками, а группами белков, обладающими одинаковылш подвижностями. Дальнейшие успехи, достигнутые в период второй мировой войны Коном и Эдсоллом , были стимулированы большим спросом на пла шу, необходимую для предотвращения шока, зависящего от поддержания осмотического давления белками сыворотки. Цельная плазма содержит протеолитические ферменты, которые в большой мере расщепляют белки плазмы, поэтому получение белковой фракции крови в сухом виде сулило большие преимущества. [c.670]

Белки удалось фракционировать методом высаливающей хроматографии на сефадексе 0-50 в качестве неподвижной фазы. Сефадекс представляет собой поперечносшитый декстран с ионогенными группами. Сарджент и Грэхэм [25] вымывали плазму человеческой крови через 14-сантиметровую колонку с сульфатом натрия, забуференным при pH 5,5. После прохождения 300 мл 1,50 М промывного раствора постепенно понижали его концентрацию, так что при /=1250 она стала 0,64 М. На выходной кривой получилось шесть пиков. Первый относился к альбуминам, следующие три к различным компонентам а-глобулинов, а последние два к другим глобулинам. [c.248]

Интересно, что во всех до сих пор изученных гликопротеинах моносахаридом, через который осуществлялась связь, неизменно оказывался N-aцeтил-D-гeк oзaмин. Это справедливо для яичного альбумина [4, 9, 23, 24], овомукоида [10, 25], ai-кислого гликонротеина плазмы крови человека [12], у-глобулина человека [26, 27], гликонротеинов подчелюстных желез овцы и быка [28, 29]. В гликопротеинах яичного белка и плазмы моносахаридом, через который осуществляется связь, служит К-ацетил-в-глюкозамин, в гликопротеине подчелюстных желез — К-ацетил-в-галактозамин. Однако полученных данных еще недостаточно для достоверных обобщений. Так, имеются сообщения [30—32], что в хондроитин-4-сульфате и гепарине связь между полисахаридом и пептидом осуществляется через ксилозу. [c.280]

Впервые ферментативное расщепление гликопротеипа плазмы в целях изучения его строения было использовано, по-видимому, Римингтоном [7]. Из крови лошади осаждением сульфатом аммония автор получал фракции альбуминов и глобулинов, подвергал их денатурации этанолом и обрабатывал трипсином в течение 4 недель. Полученный им углеводный остаток содержал 2-амино-2-дезоксиглюкозу и маннозу. Аналогичные результаты были получены Хьюиттом [135] при обработке серогликоида пепсином (КФ 3.4.4.1) и трипсином (КФ 3.4.4.4). [c.92]

Скиталось, что многие фракции, выделенные из сыворотки, являлись результатом изменения сыворотки в процессе их выделе-ВИЯ. Хотя работы с ультрацентрифугой и дали много ценных сведений (см. т. II, гл. XX) относительно природы сыворотки и ее белков в нормальных и патологических условиях, лишь Тизелиусу удалось найти простой и точный метод разделения и отбора фракций сыворотки. Тизелиус обнаружил, что необработанная человеческая сыворотка без добавления осаждающих солей начинает разделяться в электрическом поле на четыре компонента. Было найдено, что наиболее быстрый из этих компонентов является альбумином, а три более медленных компонента соответственно а-, р- и 7- глобулинами. Фибриноген появляется в плазме между 8- и 7- глобулинами. Было обнаружено, что сыворотки ряда животных дают похожие, хотя и специфические, электрофоретические изображения [39, 40]. После электрофоретического выделения отдельные компоненты сыворотки при повторном измерении проявляют те же электрические подвижности, которые были обнаружены и в. цельной сыворотке. Это является важным доказательством того, что в сыворотке находятся индивидуальные компоненты и что сыворотка не является равновесной смесью компонентов. Невозможно, однако, переоценить значение состава буферного растворителя для получаемых электрофоретических изображений, так как число, относительная величина и подвижность компонентов, а также контуры и симметричность изображений возрастающих и убывающих границ являются функцией применяемого электролита. На рис. 168 представлены результаты электрофоретического анализа фракций, полученных из патологической и нормальной сывороток. Фильтрат после добавления 13,5% сульфата натрия представляет собой фракцию, полученную после удаления эуглобина, 17,4%-ный фильтрат—фракцию лосле удаления псевдоглобулина I, 21,5%-ный фильтрат—фракцию после удаления всех белков за исключением альбумина. Значительные количества а-и р-глобулина остаются с альбумином. Подобг яые же результаты были получены Коном и другими исследователями [42] при применении различных солей. Мур и Линн [43] определили соотношения альбумина и глобулина А С для 25 [c.375]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология