Цитохромоксидаза мышц

Работа 34. Обнаружение цитохромоксидазы в мышцах Принцип метода [c.125]

Выполните лабораторную работу Цитохромоксидаза мышц . Результаты внесите в таблицу и сделайте выводы о роли цитохромоксидазы в дыхательной цепи. [c.371]

Водный экстракт мышцы не дает окрашивания с реактивом надй , так как цитохромоксидаза удерживается тканью. Окраска появляется толь"ко при добавлении к водному экстракту из мышцы кроме реактива надй несколько капель раствора перекиси водорода (пероксидазное действие см. работу 35). [c.58]

Токсическое действие. При остром отравлении токсическое действие СО обусловлено как уменьшением доставки кислорода, так и нарушением тканевого дыхания и снижением потребления тканями кислорода. СО соединяется с железосодержащими биохимическими системами тканей, не только с гемоглобином, но и с миоглобином. Сродство СО к миоглобину меньше, чем к гемоглобину, но сродство миоглобина мышц млекопитающих к СО в 25-50 раз выше, чем к кислороду. При тяжелых отравлениях около 25 % миоглобина может быть связано с СО, а содержание карбоксимиоглобина в мышцах достигает 35 %. СО соединяется с цитохромом и цитохромоксидазой, с восстановленной формой пероксидазы (давая соединение, напоминающее карбоксигемоглобин) и с каталазой угнетает активность тирозиназы и сукцинатдегидрогеназы в печени, сердце и в мозге. В ряде острых отравлений СО смерть наступала при относительно невысоком содержании СОНЬ (45-55 %). Хроническое отравление СО может развиваться без аноксемии. СО влияет на углеводный обмен, усиливая распад гликогена в печени, нарушая утилизацию глюкозы, повышая уровень сахара в крови и в ликворе и вызывая появление сахара в моче. Особо чувствительны к интоксикации СО молодые люди и беременные женщины. Тяжело переносят отравление алкоголики, курящие и лица с заболеваниями системы кровообращения и др. При резкой анемии возможна смерть даже при действии относительно невысоких концентраций СО. [c.505]

Для контроля такую же порцию мышечной кашицы промывают кипящей водой, инактивируя таким образом цитохромоксидазу. Кусочек мышцы, отмытой горячей водой, также помещают на фильтровальную бумагу. [c.65]

Реакция НАДИ. Растирают в ступке с водой кусочек мышцы. Часть полученной кашицы переносят в пробирку и тщательно кипятят. Затем кусочки мышцы, оставшиеся в ступке, и кусочки из пробирки отделяют от избытка воды фильтрованием. Фильтры с кусочками мышцы развертывают и наносят на кусочки по 2—3 капли реактива НАДИ. Ненагретая мышца постепенно окрашивается в сине-фиолетовый цвет, а нагретая, где цитохромоксидаза разрушена, окраски не дает. [c.123]

В организме СО связывается с ионом Fe + гемоглобина. При остром отравлении около 13 % СО соединяется в скелетных мышцах и миокарде с миоглобином, образуя СОМЬ часть СО (при хроническом отравлении до 25—30 %) связывается с негёмоглобиновым железом, содержание которого в плазме возрастает при повторных подострых и хронических отравлениях. СО обнаруживается также в ткани печени, почек, мозга, в спинномозговой жидкости, 0,1—3,3 % общего количества СО, поступающего в организм, окисляется до СОг. Этот процесс катализируется цитохромоксидазой, активность которой, в свою очередь, ингибируется СО. [c.320]

Клетка регулирует функции митохондрий и более обычными способами. У млекопитающих главным метаболическим путем переработки азотсодержащих продуктов обмена служит цикл мочевины. Образующаяся при этом мочевина выводится с мочой. Ферменты, кодируемые ядерным геномом, катализируют несколько этапов этого цикла в митохондриальном матриксе. Мочевина образуется лишь в некоторых органах, таких как печень, и ферменты цикла мочевины синтезируются и переходят в митохондрии только в этих органах. Кроме того, дыхательные ферментные комплексы, входящие в состав внутренней митохондриальной мембраны, у млекопитающих содержат несколько тканеспецифических субъединиц, которые кодируются ядром и, вероятно, действуют как регуляторы переноса электронов. Например, > некоторых людей с наследственным заболеванием мышц одна из субъединиц цитохромоксидазы дефектна поскольку эта субъединица специфична для скелетных мышц, волокна сердечной мышцы у этих людей функционируют нормально, что позволяет таким больным выживать Как и следовало ожидать, тканеспецифические различия свойственны и хлоропластным белкам, кодируемым ядерными генами [c.497]

Ход работы. I. Для получения препарата, содержащего цитохромоксидазу вместе с цитохромами, сердечную мышцу или скелетные мышцы хорошо измельчить и извлечь четырех-пяти-кратным объемом дистиллировацной воды. Профильтровать, повторить извлечение и снова профильтровать и промыть водой остаток ткани. Получается почти неокрашенная кашица, содержащая цитохромоксидазу, цитохромы а , Ь и с , наряду с некоторыми дегидрогеназами (рис. 9). [c.57]

Животные. Длительное введение крысам хлорида К. с питьевой водой в дозе 5 мкг/мл привело к снижению уровня SH-rpynn в крови, активности цитохромоксидазы и сукцинатде-гидрогеназы в тканях печени, почек и скелетных мышцах. В надпочечниках активность этих ферментов повышалась, равно как и количество аскорбиновой кислоты и восстановленного глютатиона (Соловьев и др.). При внутримышечном введении 1—3 мг/кг развивались соединительнотканные опухоли. [c.165]

К оксидазам относится также фермент, окисляющий цито-хром за счет кислорода воздуха — цитохромоксидаза. Этот фермент является важнейшим звеном кислородного дыхания почти всех живых тканей. Цитохромоксидаза прочно связана с водонерастворимой структурой мышцы. В состав цитохромоксидазы входит железосодержащая группировка геминового типа. Прежде, когда дыхательные процессы еще не были достаточно изучены, цитохромоксидазу называли дыхательным ферментом Варбурга. [c.63]

К сожалению, менадион не в состоянии помочь, если повреждение цепи находится в цитохромоксидазной области. Пример подобной патологии был описан М. А. Джонсоном и сотрудниками, показавшими, что определенные виды миопатии коррелируют с исчезновением цитохромоксидазы из некоторых типов скелетных мышц. [c.241]

Острое отравление. Животные. Для всех видов высших животных симптомы одни и те же первоначальное учащение дыхания, переходящее в затруднение и остановку его, паралич, боковое положение, судороги, кратковременное возобновление дыхательных движений, вторичная остановка дыхания, смерть. У кошек, собак и обезьян обычно наблюдается рвота. Сердце останавливается на 5—10 мин позже, чем дыхание. Вследствие блокады цитохромоксидазы миокарда наступает острая сердечная недостаточность. Повышается тонус парасимпатической нервной системы при одновременном повышении чувствительности мышцы сердца к влияниям блуждающего нерва резко падает общий тонус симпатической нервной системы. Прогрессивно увеличивается уровень глютатиона крови, возрастает секреция гипертепзивных гормонов и адреналина. Если животное не погибает от острого отравления, отмечаются симптомы поражения ЦНС. При вскрытии кроликов, кошек, собак, погибших в первые минуты, нет никаких изменений, кроме светлой окраски жидкой крови, розовой окраски органов и запаха горького миндаля. В случае смерти через 5—15 мин отмечается, кррме этого, полнокровие. и отек слизистой трахеи, пенистая, иногда кровянистая жидкость в полости трахеи, нередко кровоизлияния под плеврой, реже в самих легких, под эндокардом и перикардом. В мозгу животных, переживших острое отравление, наблюдались общее диффузное поражение нервных клеток и симметричные некрозы в коре головного мозга. [c.333]

Водный экстракт мышцы разделить на две части. В первой части водного экстракта открыть присутствие белка (в водный экстракт переходят миоген, глобулин X и миохром), определить высаливаемость белка и проделать цветные реакции на белковые аминокислоты. Затем установить присутствие в водном экстракте каталазы и пероксидазы (с реактивом надй ) и отсутствие цитохромоксидазы (с реактивом надй см. работы 35 и 36). Цитохромоксидазу открыть в остатке мышечной ткани после извлечения водой. [c.236]

Цитохромоксидаза — конечное звено цепн — является ее единственным компонентом, который способен восстанавливать кислород. На основании спектров поглощения препаратов из дрожжей и сердечной мышцы, обработанных СО или СЫ и восстановленных субстратом, ранее был сделан вывод о том, что два отдельных ци-тп.чрпма а и аз, вероятно, находятся в конце цепи. Считалось, что цито.чром Оз способен самоокисляться ири низком парциальном давлении Ог и соединяться с СО и СЫ , а цитохром а — нет. Поэтому цитохром аз рассматривался в качестве истинной оксидазы. Однако в действительности митохондрии содержат лишь один ком- [c.491]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология