Трансформация эукариот

Таким образом, было получено первое прямое доказательство генетической роли ДНК у бактерий. В дальнейшем предпринимались многочисленные попытки трансформации низших эукариот — дрожжей, водорослей, а также многоклеточных животных и растений. Эти попытки оставались безуспешными до конца 70-х годов XX в., когда стала развиваться технология генной инженерии и были разработаны методы так называемой векторной трансформации (см. гл. 11). В настоящее время проблема трансформации эукариот решена и роль ДНК как универсального носителя генетической информации не вызывает сомнения. [c.114]

Генно-инженерное конструирование у дрожжей пошло по пути создания кольцевых плазмид с центромерами, а затем искусственных мини-хромосом, имеющих центромеру, теломеры и репликаторы (см. гл. 6). Таким образом, трансформация эукариот облегчается созданием векторов с репликаторами, специфичными [c.278]

Хотя по причинам исторического характера описываемые нами опыты на эукариотических клетках были названы трансфекцией, они в точности соответствуют трансформации у бактерий. В этих экспериментах было не только установлено, что ДНК является у эукариот генетическим материалом, но и была доказана возможность переноса генов между разными видами с сохранением их [c.23]

Перенос и экспрессия генов у эукариот. Для микроорганизмов известны два основных способа введения чужеродного генетического материала в клетку. При трансформации чистая ДНК при некоторых, не до конца ясных условиях проникает в микробную клетку и встраивается в генетический материал. При трансдукции генетическая информация от одной бактериальной клетки к другой передается с помощью бактериофага. Эксперименты по трансформации бактерий сьп-рали важную роль в истории генетики с их помощью установили, что именно ДНК является генетически активным материалом [220]. [c.167]

В то же время в последние годы в связи с развитием генной инженерии широко применяется плазмидная, или векторная, трансформация, которая заключается во введении в клетки бактерий, а также эукариот генов, интегрированных в естественные или искусственные плазмиды (см. гл. И). [c.209]

Применение методологии генетики бактерий к изучению эукариот (клонирование клеток, применение трансформации, использование рестриктирующих эндонуклеаз и т. д.) стало основой нового синтетического направления в биологии — генетической инженерии, о которой подробнее сказано в гл. 11. [c.224]

Трансформация (химическая. электропорация, ускоренными частицами, липосома-ми), микроинъекция в ядра эукариот [c.9]

В клетках эукариот дыхание, сопряженное с трансформацией энергии, локализовано во внутренней мембране митохондрий. [c.76]

Итак, генная и клеточная инженерия целиком возникла благодаря исключениям, наблюдавшимся в ряде биологических экспериментов. Эти исключения сами стали основными правилами игры в новой области. Широкое использование трансформации эукариот, элементы парасексуального цикла в генетике эукариот. [c.287]

Генетическая трансформация заключается главным образом в переносе чужеродных или модифицированных генов в эукариоти- [c.144]

Клонирование в клетках животных. Проблема клонирования в клетках животных имеет большое значение для исследования функционирования геиов высших эукариот. Предварительно клонированные гены вводят в клетку животных различными путями. Один нз путей включает в себя кон-трансформацию клеток требуемым геном, соединенным с одним нз генов, для которых осуществляется селекция. Примером являются клетки мыши, дефектные по синтезу тимидинкиназы (ТК -клетки). Клетки трансформируются фрагментами ДНК вируса герпеса (HSV), содержащего ген тими-динкниазы, и после трансформации приобретают способность к синтезу фермента, т. е. становятся ТК -клетками. Клетки ТК легко отличаются от ТК. поскольку они способны расти на средах с ами- [c.440]

В литературе имеются сообщения о трансформации и трансдукции у эукариот. Такие примеры есть как для растений [2315], так и для культивируемых клеток животных. В некоторых случаях удавалось достигнуть экспрессии генов прокариот в клетках эукариот. ДНК прокариот в большинстве случаев принадлежала вирусам, но иногда была бактериального происхождения. Наиболее известный пример-перенос и экспрессия Gal-оперона Е. соИ в фибробласты человека, осуществленный в 1971 г. [2341]. У человека галактоза мета-болизируется так же, как у Е. соИ, и известны мутации, связанные с недостаточностью каждого из трех участвующих в метаболизме ферментов. Самой распространенной является галактоземия (23040), обусловленная дефектом P-gal-уридил-трансферазы. Инкубация таких клеток in vitro с лямбда-фагами, несущими Gal-one- [c.167]

Дыхательное фосфорилирование было открыто в начале тридцатых годов В. А. Энгельгардтом. Позднее были обнаружены дыхательные цепи. Было показано, что существуют дыхательные цепи, сопряженные и несопряженные с трансформацией энергии. В этом разделе мы рассмотрим дыхательную цепь, сопряженную с трансформацией энергии. В клетках эукариотов дыхательная цепь расположена во внутренней мембране митохондрий у дышащих бактерий — в цитоплазматической мембране и в специализированных мембранных структурах — мезосомах или тилакоидах. Дыхательная цепь включает четыре ферментных комплекса, катализирующих окисление НАДН кислородом НАДН-СоР-редукта-зу (комплекс I), сукцинат-СоР-редуктазу (комплекс П), СоРНг-цитохром-с-редуктазу (комплекс Ьс , или комплекс П1) и цито-хромоксидазу (комплекс IV) (рис. 46). [c.127]

Полученные результаты неизбежно приводят к ряду соображений, касаю1дихся не только молекулярных механизмов трансформации, но и теоретических вопросов относительно перехода от оперона одного типа (у прокариот) [91] к оперону другого типа (у эукариот) [55,92] и возможной инволюции отдельных оперонов в раковых клетках [1]. [c.74]

Настоящее руководство основано на материалах курса, прочитанного 1В декабре 1986 года в Лестероком университете. Это был пятый из проводившихся в университете курсов, посвященных генетической инженерии. Участники всех предыдущих курсов по клонированию генов выразили желание выйти за рамки основных приемов клонирования генов и особенно интересовались молекулярной биологией и генетической инженерией эукариот. Таким образом. Курс генетической трансформации растений и экспрессии генов представляет собой нашу первую попытку организовать программу, посвященную определенной группе организмов, отвечающую этой потребности. Как Курс, так и это Практическое руководство не были бы созданы, если бы не самоотверженность и энтузиазм преподавателей и неоценимые организаторские способности технической дирекции и администрации. Приносим благодарность и многим научным сотрудникам, ассистентам, аспирантам и техническому персоналу, которые не только потратили много сил, чтобы наладить большинство методик, демонстрируемых во время Курса, но и отдали свое время и энергию, чтобы помочь организовать научную программу. Поддержка профессора Харри Смита (возглавляющего Отдел ботаники) также не осталась незамеченной, поскольку инициатива проведения этого Курса исходила в значительной степени от него. [c.6]

Каждая трансформация обусловливалась упорядоченностью, заданной исходной организацией минеральных компонентов клетки и сохранением нескольких нуклеотидных последовательностей ДНК от прокариот и эукариот до человека (см. Lima-de-Faria, 1983). [c.297]

Методология генетической трансформации клеток млекопитающих позволяет осуществлять интеграцию чужеродных генов в геном различных типов кзотьтивируемых клеток и в разные хромосомы клеток одной линии. Это оказывает неоценимую услугу при изучении цис- и /иранс-зависимой регуляции фзшкциони-рования генов, дает возможность исследовать влияние тканеспецифических факторов на экспрессию генов, процессинг мРНК и белков и др. В конечном счете все это способствует более глубокому пониманию основных закономерностей организации генетической информации у высших эукариот. [c.347]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология