Дрожжи, протопласты

Т. у дрожжей м. б. осуществлена только искусственным путем. Для этой цели используют протопласты шш обрабатывают клетки солями щелочных металлов. ДНК проникает в дрожжевые протопласты также под действием электрич. разрядов (т.наз. электропорация). [c.626]

Органические загрязнения находятся в сточных водах в растворенном, коллоидном и нерастворенном состоянии. Ряд микроорганизмов и, в частности бактерии, вирусы, дрожжи, плесени, могут использовать питательные вещества лишь в виде относительно небольших молекул в водном растворе. Крупные частицы загрязнений перерабатываются бактериями первоначально вне клетки. Бактерии выделяют во внешнюю среду в значительных количествах пищеварительные ферменты, где они контактируют с крупными частицами веществ и осуществляют гидролитический распад сложных органических веществ до более простых, небольших по размеру молекул, которые затем проходят через оболочку клетки и поступают в протопласт. [c.332]

Внедряются новые методы селекции продуцентов, их поддержания в активном состоянии и хранения. Например, для получения активных продуцентов у дрожжей и плесневых грибов применяют метод слияния протопластов, когда после удаления клеточной стенки и воздействия полиэтиленгликоля клеточная мембрана частично растворяется и может произойти слияние протопластов двух штаммов и последующая рекомбинация генетического материала. После регенерации клеточной стенки микроорганизм будет иметь другие свойства. Такие микроорганизмы менее стабильны, чем дикие , поэтому необходимо применять соответствующие методы сохранения их активности. Из относительно новых можно назвать лиофилизацию и хранение под жидким азотом. [c.311]

Рис. 68, Гетерокарион дрожжей и куриного эритроцита и его родителей . Вверху куриный эритроцит. В середине протопласт (голая нитка) дрожжей, Внизу гетерокарион. Стрелка показывает ядро дрожжей.

В последние годы в генетико-селекционной работе все чаще используются микробные протопласты. С помощью слияния протопластов можно получать генетические рекомбинанты у тех видов и щтаммов микроорганизмов, у которых не обнаружены собственные системы обмена наследственной информацией и которые в естественных условиях никогда не скрещиваются между собой. Трансформация протопластов, по-видимому, является универсальным способом введения молекул ДКК в клетки бактерий, актиномицетов, дрожжей и грибов. [c.124]

К настоящему времени способы получения и слияния протопластов описаны для многих десятков видов бактерий, актиномицетов, грибов и дрожжей. Как уже отмечалось, с помощью этого метода можно получать гибридные формы у тех видов микроорганизмов, у которых не обнаружены природные механизмы обмена наследственной информацией, но которые имеют важ- [c.129]

Дрожжи, как и грибы-внутриклеточные паразиты, мицелия не имеют. Вегетативное тело дрожжей состоит из одиночных почкующихся или делящихся клеток, а у внутриклеточных паразитов—из голого протопласта без клеточной стенки. Такое вегетативное тело обычно недолговечно, через несколько дней оно превращается в зооспорангий с подвижными спорами, которые снова заражают подходящего хозяина. [c.135]

Электропорация — физический, а не химический метод, и это, по-видимому, обусловливает его широкое применение. Электропорация может успешно использоваться для введения молекул ДНК в разные типы клеток, такие как культивируемые клетки животных, простейшие, дрожжи, бактерии и протопласты растений- [c.33]

С солевой методикой конкурирует метод электропорации клеток дрожжей. Эта процедура чрезвычайно проста и при правильном подборе условий обеспечивает примерно такой же уровень плазмидной трансформации, как и обработка клеток солями лития. Процедура электропорации выполняется в течение 10 мин, в то время как солевой метод занимает 2 ч, а метод протопластов — 3 ч. [c.293]

Для трансформации дрожжей обычно используют три способа. В первом случае экзогенную ДНК добавляют к клеткам дрожжей, клеточные стенки которых удалены химически или энзиматически (протопласты) (1). В других случаях клетки перед добавлением чужеродной ДНК обрабатывают ацетатом лития (2) или подвергают электропорации (3). Трансфекцию культур животных клеток осуществляют инкубацией клеток с ДНК, осажденной фосфатом кальция или ДЕАЕ-декстраном (1), либо электропорацией в присутствии очищенной трансфицирующей ДНК (2). Как уже упоминалось в гл. [c.136]

Для получения протопластов у микроорганизмов (этот процесс называют протопластированием) используют несколько методов. Одни из них основаны на подавлении синтеза клеточной стенки структурными аналогами ее компонентов и антибиотиками. С этой целью используют пенициллин и фосфомицин или высокие концентрации аминокислот глицина, метионина, треонина и др. Указанные соединения так или иначе нарушают синтез пептидогликана — основного компонента ригидной оболочки бактерий. У дрожжей для получения протопластов применяют 2-дезоксиглюкозу — аналог глюкозы, препятствующий образованию у них клеточной стенки. В настоящее время эти методы в основном утратили самостоятельное значение. [c.124]

Передача компонентов цитоплазмы при слиянии протопластов у дрожжей иногда ведет к появлению таких форм, как гетеро-плазмоны , или цибриды , которые содержат ядерный геном одного из исходных штаммов и объединенный цитоплазматический материал обоих родителей (А. Morgan et al., 1982 A. Good-ney, E. Revan, 1983). С другой стороны, можно выделять ядра из [c.130]

Стеролы — высокомолекулярные циклические спирты — производные фенаитрена. Типичным представителем стеролов является эргостерол (С28Н43ОН), который имеется в дрожжах, зерне пшеницы, плесневых грибах, спорынье. Наиболее распространенный стерол растительного происхождения — сито-стерол (С29Н43ОН), содержащийся в значительных количествах в листьях, пыльце и плодах растений. Стеролы входят в состав протопласта и образуют с липопротеидами сложные комплексные соединения. [c.370]

Первые гибриды Е. oli-S. typhimurium и другие бактериальные межродовые и межвидовые гибриды получали традиционным генетическим методом — конъюгацией. Однако при этом обмен генами между клетками, относящимися к разным семействам, практически не происходит. Неограниченные возможности для объединения геномов, включая и геномы эволюционно далеких организмов, открывает техника слияния протопластов в присутствии полиэтиленгликоля. При межвидовой и межродовой гибридизации бактерий и дрожжей таким способом удается [c.438]

Генно-инженерные манипуляции на S. erevisiae стали реальны лишь после того, как экспериментально была доказана возможность генетической трансформации дрожжевых клеток. Клеточная стенка дрожжей препятствует проникновению экзогенной ДНК в клетку. Поэтому бьша разработана процедура получения протопластов клеток S. erevisiae. Она состоит в том, что дрожжевые клетки инкубируют в осмотически стабилизирующем растворе, содержащем [c.292]

До 1983 г. все генно-инженерные эксперименты проводились на протопластах S. erevisiae. Однаш X. Ито с соавторами обнаружили, что плазмидн)оо трансформацию клеток дрожжей можно осуществить и без удаления клеточной стенки. Для этого клетки обрабатывают полиэтиленгликолем в присутствии катионов щелочных металлов (Li+, s+, Rb+, К+, Na+). Особенно хорошие результаты дает использование солей лития. Интересно отметить, что компетентность клеток дрожжей индуцирует в основном ПЭГ, а перечисленные катионы лишь повышают эффективность плазмидной трансформации. [c.293]

Многочисленные эксперименты показали, что в зависимости от штамма S. erevisiae и типа векторной плазмиды оптимальные условия трансформации как протопластов, так и обработанных солевыми растворами клеток могут существенно различаться. В целом следует отметить, что наивысшего уровня плазмидной трансформации уцается достичь в системе протопластов дрожжей. Поэтому в тех случаях, когда необходимо получить представительную клонотеку гибридных плазмид и выявить в ней редко встречающиеся последовательности, предпочитают использовать протопласты. Эффективность плазмидной трансформации с помощью солевых методов на 1-2 порядка ниже, зато эти методы гораздо проще и дают высоковоспроизводимые результаты. Колонии трансформантов образуются на поверхности агаризованной среды, что позволяет осуществлять их перепечатку и т. п. Поэтому, когда не требуется максимальный уровень трансформации (например, при введении индивидуальной плазмиды, когда достаточно выделить несколько клонов), предпочитают проводить обработку клеток дрожжей растворами полиэтиленгаиколя и солей лития. [c.293]

Смотреть страницы где упоминается термин Дрожжи, протопласты: [c.506] [c.310] [c.390] [c.412] [c.70] [c.37] [c.310] [c.390] [c.57] [c.57] [c.125] [c.131] [c.132] [c.176] [c.151] [c.90] [c.293] [c.294] [c.294] [c.298] [c.299]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология