Бляшкообразующие единицы

Этот метод используется для количественного учета энтеровирусов в культурах ткани. Термин бляшкообразующая единица , или БОЕ, соогветствует наименьшей концентрации вирусов, которая образует 1 бляшку на монослое клеток. [c.279]

Для изучения кривой роста вирусов проводится одноэтапный цикл роста. Применяется высокая множественность заражения. (МЖ), чтобы быть уверенным в заражении всех клеток. Обычно бывает достаточным применять 10 бляшкообразующих единиц (БОЕ) на клетку. Для получения вирусов фазу инфицирования удлиняют в условиях, обеспечивающих вторичное заражение в этом случае рекомендуется низкая МЖ, особенно когда имеет место тенденция к образованию дефектных вирусных частиц. [c.199]

Более точным количественным методом учета от-дега>ных вирусных частиц является метод бляшек (рис. 33). Культуру клеток заражают вирусом и покрывают тонким слоем агара. После инкубирования посевов в течение нескольких суток на агаровом покрытии появляются просветленные участки определенной формы (бляшки), представляющие собой участки погибших клеток в сплошном монослое клеточной культуры. Каждая бляшка образуется при размножении одной вирусной частицы и хорошо заметна в виде круглого светлого участка на красном фоне клеток, прижизненно окрашенных нейтральным красным. Титр вируса, установленный этим методом, выражают числом бляшкообразующих единиц (БОЕ) в 1 мл. Размеры, морфология и сроки появ- [c.59]

Этап 2) суспензию фага следует обрабатывать мутагеном так, чтобы сохранялось всего лишь около 0,1% бляшкообразующих единиц. Так как при этом практически все мутации, имеющиеся в популяции, были индуцированы мутагеном в свободных фаговых частицах, то все выявленные в скрещиваниях трансдуктанты с мутациями могут считаться результатом независимых актов мутагенеза. В этом эксперименте мы исходим из того, что температурочувствительные мутанты будут образовывать колонии при 30°С, но не будут [c.34]

БОЕ —бляшкообразующая единица БСА —бычий сывороточный альбумин ВВС — вирус везикулярного стоматита ВПГ — вирус простого герпеса ВПМ —вирус пневмонии мышей ГА — гемагглютинин ГАЕ —гемагглютинирующая единица ГЛ — гемолизин ДДС-Na—додецилсульфат натрия [c.10]

Новорожденных мышей инфицировали вирусом в дозах 0,3 или 1000 бляшкообразующих единиц (БОЕ) и изучали действие цитотоксических Т-лимфоцитов (Тц) на инфицированные вирусом клетки-мишени. Одновременно определяли продукцию ИФу (Тх1-цитокин) и ИЛ-4 (Тх2-цитокин) в ответ на заражение вирусом. У мышей, инфицированных низкой дозой вируса, возникали Тх1-ответ и защита от инфекции. Результаты представлены в относительных единицах. [c.238]

Соотношение между числом частиц и числом бляшкообразующих единиц [c.284]

Как показывает анализ соотношения между оптической плотностью суспензии вируса и содержанием вирусных белков, 260= 1 соответствует 2,Ы0 2 вирусных частиц, или 185 нг белка [283]. Отношение числа частиц к числу бляшкообразующих единиц обычно составляет 50 1—200 1, хотя иногда удается получить величины 1 1—2 1, используя, например, активацию химотрипсином [291, 325]. [c.284]

Наиболее чувствительным вариантом PH является подавление вирусного бляшкообразования под действием вирусспецифической антисыворотки (реакция редукции вирусных бляшек). При постановке этой реакции к вирусосодержащему материалу (50 — 100 БОЕ — бляшкообразующих единиц) добавляют антисыворотку (в разведении, соответствующем титру) и после инкубации в термостате в течение 30 — 60 мин смесь наносят на монослой чувствительных культур клеток. Бляшкообразование выявляют вышеописанными методами (с применением агарового или бентонитового покрытия). Соответствие вируса антителам сыворотки проявляется подавлением бляшкообразования (в сравнении с контролем). PH позволяет определить видовую и типовую (вариантную) принадлежность вируса. [c.271]

Рис. 4.11. Определение скрытого периода и урожая фага (на примере экспериментов с размножением фага Т2 в клетках Es heri hia oli В). Молодую культуру бактерий заражали суспензией фага, а затем свободные (не адсорбировавшиеся) фаговые частицы инактивировали добавлением антифаговой сыворотки. После сильного разведения через определенные интервалы времени брали пробы и высевали на агар вместе с избытком бактерий, чувствительных к данному фагу. ]В течение 25 мин число бляшкообразующих единиц оставалось неизменно равным 5 (скрытый период), а затем возрастало до 235 (плато). Согласно этим данным, выход фага на одну инфицированную клетку бактерии (урожай фага) составлял в среднем 47 частиц.

Ф и г. 58. Репликаций пнфекциошюй РНК фага QfS in vitro [464]. Реакционная смесь содержит четыре нуклеозидтрифосфата, примерно 1 мкг РНК фага QP в качестве матрицы и фагоспецифичную репликазу QP. На левой оси ординат отложено число бляшкообразующих единиц в 1 мл, на правой — концентрация РНК (мкг/мл). [c.239]

Таким образом, стало возможным опреде.дять, с какой частотой вирусная инфекция приводит к гибели клеток, а с какой — к их трансформации. Создается впечатление, что в оптимальных условиях при инфицировании вирусом полиомы в количестве около 1000 бляшкообразующих единиц около 5% инфицированных эмбриональных клеток хомячка и 0,5% инфицированных эмбриональных клеток крысы претерпевают трансформацию изменяется внешний вид клетки, изменяются ее поверхностные свойства и, наконец, клетка становится транснлантабельной [555]. В частности, трансформированные фибробласты цыпленка или клетки почки новорожденного хомячка (два наиболее часто используемых типа клеток) теряют свои характерные контактные ингибиторные свойства, удерживающие [c.268]

Концентрацию вирусных частиц можно рассчитать исходя из результатов спектрофотометрических измерений [273] высо-коочищенных препаратов вируса. Оптическая плотность 1,00 при длине волны 260 нм соответствует концентрации 9,4-10 2 частица/мл. Если концентрация частиц известна, не составляет труда определить число частиц, соответствующих одной бляшкообразующей единице (БОЕ) в стандартном тесте. Величина, полученная при подсчете бляшек на чашке, показанной на рис. 18.5, составляет 200 частица/БОЕ это отвечает инфекционности только 0,5%. [c.206]

Делбекко и Фогт неоднократно подчеркивали, что одну вирусную частицу, достаточную для образования бляшек и обозначаемую ими как бляшкообразуюшая доза, нельзя отождествлять с одной корпускулой вируса. Бляшкообразующая единица имеет характер частицы, которая остается неизмененной при разведениях. В состав этой частицы может входить как одно элементарное тельце, так и их конгломерат при условии, что такой гипотетический конгломерат может существовать достаточно долго. Нужно также иметь в виду, что при внесении в культуры очень больших доз вируса возможна множественная инфекция клеток и, следовательно, формирование одной бляшки в результате размножения нескольких частиц. Однако в тех условиях опыта, результаты которых анализировали Делбекко и Фогт и с которыми имеют дело экспериментаторы, а именно заражение примерно миллиона клеток 50—100 вирусными частицами практически исключается возможность множественного заражения одной клетки и получение бляшки за счет размножения нескольких частиц. [c.185]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология