Фаг выход фага

Рассмотрим пример. Бензольный раствор содержит бензофенон в концентрации, достаточной для поглощения всего излучения от источника монохроматического света. Концентрация тушителя достаточно велика для того, чтобы все образующиеся триплеты бензофенона были потушены. Для бензофенона Фят =1, и если эффективность переноса энергии равна 100% Ет, акцептор < < Ер, бензофенон), ТО ЧИСЛО образовавшихся триплетных молекул акцептора равно числу фотонов, поглощенных бензофеноном. Допустим, что триплетные молекулы акцептора (например, циклогексадиена) вступают в реакцию димеризации [65], выход которой равен единице. В этом случае каждый поглощенный фотон даст одну молекулу димера. Чтобы измерить величину исследуемого донора, нужно вновь создать такие условия, чтобы он поглощал весь падающий свет и чтобы все триплеты донора тушились стандартным акцептором (например, циклогексадиеном). Далее нужно облучить в одинаковых условиях два образца — раствор с бензофеноном и раствор с исследуемым донором — так, чтобы каждый из них поглотил одно и то же количество света. Теперь, для того чтобы оценить выход интеркомбинационной конверсии, необходимо сосчитать (например, при помощи метода газовой хроматографии) число или процент димеров, получившихся в обоих образцах. Так, если с бензофеноном образуется 20% димеров, а с исследуемым донором— 10%, то для последнего можно рассчитать выход Фаг [но уравнению (5-46)] [c.157]

Таким образом, латентный период — это время, которое проходит с момента заражения бактериальной культуры фагом до начала лизиса первых зараженных клеток, из которых потомство фага выходит в окружающую среду. Период лизиса — это промежуток времени, в течение которого лизируются все новые и новые зараженные клетки, пока все они в конце концов не подвергнутся лизису и не будет достигнут конечный инфекционный титр (плато на кривой) после этой стадии уже не происходит дальнейшего размножения фага, так как потомство фага и оставшиеся н( зараженными клетки не могут прийти в контакт из-за сильного разведения культуры, проведенного сразу же после заражения. Выход фага соответствует среднему числу образовавшихся частиц-потомков на одну зараженную бактерию в опыте, результаты которого представлены здесь, выход фага был равен примерно 100 фаговым частицам на зараженную клетку. [c.260]

Только после завершения латентного периода и выхода фага из клет ки-хозяина в окружающую среду каждая из фаговых частиц способна образовать на поверхности агара особый инфекционный центр. Термин инфекционный центр применяется для обозначения единицы, которая образует одно стерильное пятно. Следовательно, инфекционный центр может представлять собой либо отдельную свободную фаговую частицу, либо зараженную фагом клетку. [c.261]

Мелкие РНК-содержащие фаги прикрепляются к так называемым F-фимбриям (число которых на одну мужскую бактерию составляет примерно 4). Затем РНК прикрепившегося фага через эти фимбрии проникает внутрь клетки [458—487]. Как и в случае вирусов, поражающих животные клетки, адсорбция этих фагов может происходить на холоду, но внедрение их протекает с затратой энергии и нуждается в повышенной температуре (37° С). ДНК-со-держащие фаги fd тоже инфицируют лишь мужские бактериальные клетки, присоединяясь к кончику фимбрий. Оба способа прикрепления отчетливо видны на электронных микрофотографиях (фиг. 55). Прикрепившись к фимбрии, фаг, согласно некоторым работам, впрыскивает в нее свою ДНК [64]. По другим же данным, фаг входит в клетку целиком [509]. Поскольку это единственные из всех известных фагов, выход которых из клетки не сопровождается ее гибелью, можно думать, что частицы таких фагов проникают в клетку целиком, используя тот же механизм, с помощью которого осуществляется и выход фага. [c.227]

Этап 7) критериями успешного скрещивания служат выход фага (должен быть выше 20), равная передача родительских маркеров и хорошая адсорбция внесенного [c.80]

Вначале меня иногда мучила совесть при мысли, что я занимаюсь с Оле обычными исследованиями фагов, тогда как стипендию мне дали для того, чтобы я изучал биохимию под руководством Германа, — строго говоря, я нарушал это условие. Не прошло и трех месяцев после моего приезда в Копенгаген, как мне предложили представить план работы на следующий год. А это было не так просто, поскольку никаких планов у меня не было. Оставался единственный безопасный выход попросить о продлении стажировки у Германа еще на год. Объяснять, что я так и не сумел воспылать любовью к биохимии, было бы рискованно. К тому же я не видел причин опасаться, что мне не разрешат изменить мои планы после того, как стажировка будет продлена. Поэтому я написал [c.22]

Регуляция транскрипции генома фага X существенно богаче. Этот вирус принадлежит к числу умеренных он либо вызывает типичную продуктивную инфекцию, либо встраивает свой геном в клеточную хромосому (переходит в состояние профага), сохраняя при этом способность при некоторых условиях высвободиться из плена . Система регуляции транскрипции фага к обеспечивает, во-первых, разную степень экспрессии разных генов, во-вторых, избирательное усиление илн ослабление работы генов по ходу фаговой репродукции и, в-третьих, перестройку транскрипционного аппарата, необходимую для перехода в состояние профага или, наоборот, для выхода из этого состояния. [c.291]

Описанные выше бактериофаги, как правило, лизируют зараженные ими бактерии, и потому их называют вирулентными. Некоторые фаги, однако, заражают бактерий-хозяев, но не размножаются в них автономно и не вызывают лизиса. Такие фаги называются умеренными. Видимо, их размножение происходит синхронно с размножением бактерии. Лишь очень редко, в одной из 10 -10 таких лизогенных бактерий, фаг начинает спонтанно размножаться и клетка подвергается лизису. В этом случае для того, чтобы обнаружить выход инфекционного фага, в качестве индикатора нужен другой бактериальный штамм, для которого этот фаг вирулентен. Если смешать лизогенные бактерии с избытком бактерий-индикаторов и посеять смесь на агаризованную среду, то будут расти также и колонии лизогенных бактерий. Время от времени некоторые клетки будут лизироваться и выходящие из них фаговые частицы будут заражать находящиеся по соседству чувствительные (индикаторные) бактерии. Это приведет к появлению бляшек в сплошном бактериальном газоне. Однако в середине каждой такой бляшки сохранится колония лизогенной бактерии (рис. 4.12). [c.147]

Эффективность очистки воды была изучена при ее коагулировании и пропускании через контактный осветитель. Воду с исходной мутностью 4,5 мг/л коагулировали АЬОз в концентрации 6,75 мг/л при мутности воды 35 мг/л доза коагулянта увеличивалась до 12,6 мг/л. При последующем пропускании воды через контактный осветлитель содержание фага в воде снижалось в среднем на 99,7%, содержание кишечной палочки —на 90% (при дозе 6,75 мг/л) и 99% (при дозах 11,6 и 12,6 мг/л) и содержание вируса —на 99%. В воде, взятой сразу у выхода из контактного осветлителя, содержание кишечной палочки снижалось менее значительно, чем содержание вируса полиомиелита. Таким образом, при данном методе обработки степень очистки воды от вируса и кишечной палочки можно считать одинаковой. Уменьшению содержания в воде микроорганизмов во всех случаях сопутствовало снижение мутности и цветности воды. [c.39]

Подобный процесс происходит спонтанно в любой лизогенной культуре, но не в очень больших количествах с вероятностью порядка 10 или меньше на поколение. Выход вегетативного фага из клетки не влечет за собой никакой катастрофы для остальных клеток, так как лизогенная культура не подвержена инфекции фагом она, как принято выражаться, имунна. Конечно, частицы бактериофага адсорбируются на оболочке лизогенных клеток и даже производят инъекцию ДНК, однако процесс не сопровождается заболеванием клеток, т. е. развитием в них новых частиц фага. В некоторых случаях лизогенная культура может дать начало вегетативной форме фага под воздействием ультрафиолетового света, рентгеновских лучей или химических мутагенов. Это явление носит название индукции лизогенной культуры. Достаточной является сравнительно небольшая доза ультрафиолетового света (например, доза даюш ая 20% гибели клеток), чтобы практически во всех (более 90% всех выживших клеток) К12 (л) произошла индукция профага до состояния вегетативного фага. [c.382]

Рис. 4.11. Определение скрытого периода и урожая фага (на примере экспериментов с размножением фага Т2 в клетках Es heri hia oli В). Молодую культуру бактерий заражали суспензией фага, а затем свободные (не адсорбировавшиеся) фаговые частицы инактивировали добавлением антифаговой сыворотки. После сильного разведения через определенные интервалы времени брали пробы и высевали на агар вместе с избытком бактерий, чувствительных к данному фагу. ]В течение 25 мин число бляшкообразующих единиц оставалось неизменно равным 5 (скрытый период), а затем возрастало до 235 (плато). Согласно этим данным, выход фага на одну инфицированную клетку бактерии (урожай фага) составлял в среднем 47 частиц.

Разрыв клетки во время фаговой инфекции не связан непосредственно с концентрацией вновь образованных фагов-потомков. Опыты по изучению одиночных выходов фага показывают, что в количсстиепном отионгситги эти выходы весьма различны. — Прим. ред. [c.259]

Чтобы ответить на этот вопрос, пришлось перейти к микроорганизмам, у которых в каждом скрещивании можно получить большое число потомков. Бактериофаг Т4-ЭТ0 вирус, инфицирующий и затем убивающий бактерию Es heri hia соИ. Заражение одной бактерии ведет к образованию примерно 100 потомков фага менее чем за 30 мин. Фаги высвобождаются из клетки при лизисе бактерий (выход фага). [c.17]

Чтобы получить специфически трансдуцирующие лизаты, нужен штамм донора, лизогенного по отношению к трансдуцирующему фагу. В зависимости от конкретной системы лизат можно приготовить индукцией штам-ма-лизогена ультрафиолетом или митомицином С еще лучше, если у этого штамма имеется профаг, индуцируемый тепловой обработкой, для которого лизогения стабильно поддерживается при 30 °С, а литическая реакция индуцируется обработкой при температуре 37 °С [19]. Чтобы получить лизаты для общей трансдукции, инфицированные бактерии-доноры обычно выращивают в жидкой среде или высевают в чашки методом наслоения мягкого агара, где наблюдается сплошной лизис [2]. Для обеспечения максимального выхода фага и в том и [c.82]

Агар для приготовления и определения титра фаго-лизатов нужно разливать в чашки, находящиеся на выставленной по уровню горизонтальной поверхности. Выход фага и размер стерильных пятен увеличиваются, [c.124]

Некоторые бактериофаги дают столь высокий конечный выход, что могут представлять интерес как источники выделения чистой, гомогенной по составу и размерам ДНК например, выход фага 0 Kz Р. aeruginosa с одной чашки Петри составляет около 10 частиц, при молекулярной массе ДНК одной частицы около 210 Мд). ДНК ряда бактериофагов, выпускаемых на коммерческой основе, используется в молекулярной биологии в качестве стандарта молекулярной массы. [c.215]

II. 1. Тест на комплементацию в жидкой среде проводят почти так же, как и скрещивания, за исключением того, что в качестве клеток-хозяев при этом выступает непермиссивный штамм бактерий. Здесь также важно заражать клетки равным количеством фагов (множественность заражения 5—10), определять количество неадсорбированного фага и число клеток в момент инфицирования, а также и выход фага, что в данном случае и составляет цель эксперимента. Чтобы понизить фон неадсорбированного фага, часто пользуются сывороткой против него. При комплементации в жидкой среде очень важно ставить в качестве контроля заражение каждым из родительских фагов по отдельности, а также определять частоту реком- [c.80]

Число молекул Х-репрессора в лизогенных клетках Е. oli строго регулируется. Снижение количества репрессора (даже кратковременное) переводит клетку на литический путь. С другой стороны, избыток репрессора затруднит выход фага, если условия его существования в бактерии станут неблаго- [c.123]

В то время Луриа занимался в основном размножением бактериальных вирусов (бактериофагов, или, короче, фагов). Уже в течение нескольких лет среди наиболее прозорливых генетиков бытовало подозрение, что вирусы — это нечто вроде чистых генов. В этом случае для того, чтобы узнать, что же такое ген и как он воспроизводится, следовало изучать свойства вирусов. А так как простейшими вирусами были фаги, то в 40-х годах стало появляться все больше ученых, которые изучали фаги (так называемая фаговая группа), надеясь в конце концов узнать, каким образом гены управляют наследственностью клеток. Во главе этой группы стояли Луриа и его друг, немец по происхождению, физик-теоретик Макс Дельбрюк, который в то время был профессором Калифорнийского технологического института. Но если Дельбрюк продолжал надеяться, что проблему помогут решить чисто генетические ухищрения, то к Луриа все чаще начинала приходить мысль, что верный ответ удастся получить только после того, как будет установлено химическое строение вируса (гена). В глубине души он понимал, что невозможно описать поведение чего-то, если неизвестно, что это такое. Не сомневаясь, что он никогда не заставит себя изучить химию, Луриа избрал, как ему казалось, наиболее мудрый выход из положения и отправил к химику меня, своего первого серьезного ученика. [c.21]

Инфицирование клетки Е. соИ бактериофагом происходит следующим путем фаг впрыскивает свою ДНК через клеточную стенку в цитоплазму. Приблизительно через 20 мин после этого клетка лопается, и из нее выходит около 100 полностью готовых копий исходной вирусной частицы. Такая высокая скорость размножения позволяет проводить в пробирке в течение 20 мин генетические эксперименты, для которых потребовалось бы все население земного шара, если бы эти опыты проводились на людях. Главные принципы, лежащие в основе этого метода, были ясно изложены Бензером [130], который впервые составил карту тонкого строения гена. Частицы бактериофагов, подобно бактериям, можно посеять в чашке с агаром. Отличие заключается лишь в том, что агар должен содержать однородную суспензию бактерий, чувствительных к вирусу. В какой бы участок чашки ни попали вирусные частицы, они заражают какую-либо бактерию. Вокоре инфекция распространяется на соседние бактерии и в результате образуется стерильное пятно (рис. 15-20). Число основных вирусных частиц, содержащихся в суспензии, можно легко определить, сосчитав число стерильных пятен, образовавшихся в результате посева. [c.248]

Ф-ции Т.к. в бактериальной клетке связаны с ионным обменом и регуляцией работы автолитич. ферментов (катализируют гидролиз сложного биополимера, составляющего каркас клеточной стенки), к-рые активны при росте и делении клеток. Мутантные клетки бактерий, лишенные Т.к., оказываются нежизнеспособными. К вторичньпи ф-циям Т. к. относят их антигенные св-ва и связывание фагов. Стрептококковые, стафилококковые и др. бактериальные инфекции человека и животных сопровождаются выходом Т.к. в органюм, что приводит к развитию постинфекц. осложнений в виде эндокардитов, нефритов, артритов и др. [c.510]

С помощью плазмид можно также осуществить Т. протопластов (клетки с удаленной клеточной стенкой), к-рые затем регенерируют в полноценные клетки. ДНК, проникая в них, почти не повреждается и остается двунитевой. Плаз-мидная Т. во многом близка к т.наз. трансфекции, когда бактерии поглощают ДНК фага (вирус бактерий), предварительно выделенную из фаговых частиц. Эта ДНК в бак-терщ1 кодирует образование новых частиц фага, к-рые разрушают затем бактериальную клетку и выходят наружу. [c.626]

Вспомним, что двухнитевая ДНК — это очень жесткая цепь, один ее сегмент содержит около 300 пар оснований. Поэтому оценивать вероятность образования узла в двух-нитевой ДНК можно с помощью графика, приведенного на рис. 28 и основанного на машинных расчетах. По нему выходит, что около половины молекул ДНК фага А. при замыкании должны образовать узлы. Беда состоит в том, что для такой длинной ДНК очень трудно отличить нетривиальный узел от тривиального. Во всяком случае, пока это сделать не удалось. Липкие концы нужны ДНК фага % как раз для того, чтобы замыкаться в кольцо, попадая в клетку-хозяйку. Если она не замкнется, то не сможет реплицироваться и вообще нормально работать (если, конечно, можно назвать работой тот разбой, который она учиняет, попав в кишечную палочку). [c.115]

Вирусы, поражающие бактерии, называются бактериофагами (буквально —пожирателями бактерий) или просто фагами. Они имеют округлую или многогранную головку и отросток в виде белковой трубочки. Головка окружена белковой оболочкой и содержит ДНК или РНК. Прикрепляясь к клеточной стенке бактерии, фаг как бы просверливает ее, и ДНК фагё через отросток поступает в клетку. Фаговая ДНК так перестраивает механизм обмена бактерии, что в ней начинают синтезироваться частицы фа а. Через несколько минут все содержимое клетки превращается в зрелые фаговые частицы, оболочка бактерии растворяется и фаги выходят наружу. [c.47]

Лизогенные клетки легко подвергаются отбору при заражении чувствительной к фагу культуры и могут быть выращены и размножены. Как уже говорилось, в них происходит непрерывно и спонтанно переход отдельных профагов в вегетативное состояние, причем соответствующие клетки подвергаются лизису, а фаги выходят наружу. Поэтому лизогенная культура бактерий пе ли-зируется в целом, но все время понемногу образует вирулентные фаги. У профага Я вероятность спонтанного лизиса порядка 10" на поколение, а множественность потомства фагов порядка 10 . Это дает в растущей лизогенной культуре стационарное соотношение числа фагов к числу клеток, равное —10 . С другой стороны, известно, что профаг Я, подвергается индукции умеренной дозой ультрафиолетового света. При такой индукции практически все профаги утрачивают устойчивость и дают начало вегетативным фагам, а культура в целом подвергается лизису. Способность к индукции также генетически детерминирована и зависит от специального локуса внутри области с хромосомы фага. [c.384]

Смотреть страницы где упоминается термин Фаг выход фага: [c.24] [c.260] [c.451] [c.58] [c.61] [c.66] [c.70] [c.187] [c.236] [c.440] [c.258] [c.92] [c.160] [c.161] [c.503] [c.54] [c.146] [c.145] [c.249] [c.311] [c.363] [c.369] [c.382]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология