Уреаза обнаружение

Активная уреаза находится во многих высших растения и у бактерий . Одним из источников для ее получения служат бобы сои. Гидролиз мочевины, катализируемый уреазой, приводит к образованию углекислого аммония, который может быть обнаружен или по изменению реакции среды (на фенолфталеин), или пробой на аммиак с реактивом Несслера. [c.51]

Для количеств, определения М. гидролизуют в присут. H2SO4 или уреазы и определяют NH3. Для обнаружения М. используют появление желто-зеленого окрашивания при взаимод. р-ра М. с и-диметиламинобензальдегндом в присут. НС1 ниж. предел определения М. в фотометрируемом объеме 2 мг/л. [c.145]

При комнатной температуре уреаза вызывает быстрое и полное разложение мочевины на аммиак и двуокись углерода. Поэтому для обнаружения уреазы достаточно в приборе, изображенном на рис. 26 (стр. 76), смешать каплю исследуемого раствора с каплей 10%-ного раствора мочевины. Воронкообразную насадку аппарата накрывают кружком фильтровальной бумаги, пропитанной раствором нитратов марганца и серебра (стр. 126). В присутствии уреазы в течение 10 мин. или менее выделяющийся аммиак вызывает почернение бумаги. [c.594]

Описываемая ниже реакция обнаружения уреазы основана на таком демаскировании никеля. Рекомендуемый прием может выполняться в щелочных растворах. Большие количества аммонийных солей вызывают осаждение диметилглиоксимата никеля из равновесного раствора. Такое же действие оказывают протеины и, конечно, все кислотные вещества, связывающие ионы ОН-. [c.595]

Выполнение реакции. Ткань, предположительно загрязненную мочой, рассматривают в случае необходимости в ультрафиолетовом свете и обнаруженное пятно обводят карандашом. На пятно наносят 2—4 капли раствора уреазы, которому в течение 5— [c.678]

ЖЕЛУДОЧНЫЙ СОК. Пищеварительный сок, вырабатываемый железами желудка. У жвачных животных под Ж. с. понимают сок, выделяемый собственно желудком — сычугом. Имеет очень кислую реакцию вследствие высокого содержания соляной кислоты, вырабатываемой клетками дна желудка. Реакция (pH) Ж. с. животных колеблется в пределах 1,5—3,8. В составе Ж. с. обнаружены ферменты пепсин, липаза, химозин. В желудке животных под влиянием Ж. с. преимущественно расщепляются белки под действие.м пепсина, активатором которого является соляная кислота. У некоторых с.-х. животных (крупный рогатый скот) в желудке обнаружен фермент уреаза, расщепляющий мочевину на углеокислый газ и аммиак. Новорожденный молодняк животных, находившихся в плохих условиях ор.мления и содержания, нередко страдает недостаточным выделением Ж. с. Такому молодняку вместе с кормом приходится давать желудочный сок, получаемый на биостанциях. [c.99]

Большое количество фермента обеспечивает полное превращение мочевины и постоянство характеристик колонки в течение по меньшей мере месяца ее эксплуатации, несмотря на неоптимальное значение pH буферного раствора [5]. Анализ выполняли в 0,05 М Трис-НС (pH 8,1), тогда как уреаза проявляет максимальную активность при pH 7,0. Градуировочная кривая для проб объемом 0,2 мл линейна вплоть до концентрации 40 мкМ, а предел обнаружения равен 0,2 мкМ (рис. 27.10). В течение часа можно проанализировать 20 проб сыворотки, разбавленной в 500 раз, с погрешностью около 2%. Очевидно, скорость выполнения анализов недостаточна для обработки крупных серий проб и должна быть повышена, например за счет использования нескольких параллельных сенсоров (а возможно, и ферментных колонок) и соответствующего автоматического переключателя. Однако и имеющаяся в настоящее время проточная система великолепно обрабатывает ограниченное число проб, а в силу высокого постоянства характеристик и короткого стартового периода является вполне удовлетворительной дублирующей системой. [c.436]

На этом хорошо известном факте основан метод обнаружения уреазы. Наличие такого гидролиза может быть доказано отрицательной про ой на связывание щелочного раствора никеля в биурето-вый комплекс. [c.594]

В соевой муке содержится энзим уреаза, каталитически ускоряющий гидролитическое разложение мочевины и биурета на аммиак и двуокись углерода, которые образуют карбонат аммония. Чувствительная реакция обнаружения уреазы и, следовательно, соевой муки, описана на стр. 594. Реакция основана на демаскировании уреазой никеля, связанного в растворе с биуретом в комплексный анион. Реакцию можно выполнять на капельной пластинке. Для этого достаточно нескольких миллиграммов соевой муки. Лучше всего обрабатывать каплю нейтральной или слегка щелочной суспензии исследуемого образца каплей щелочного раствора биуретного комплекса. После 10—15 мнн. стояния смесь обрабатывают каплей раствора диметилглиоксима. В присутствии уреазы выпадает красный осадок. [c.688]

В другом варианте используют электроды для определения ЫНз (который образуется при подщелачивании раствора по реакции ОН" + МН -> NHз + Н2О) или СО2 (образуется при подкислении раствора Н + НСО3 СО2 + Н2О). Лучшим сенсором является NHз-элeктpoд, характеризующийся высокой специфичностью и низким пределом обнаружения (10 М, а в случае СО 2-электрода-5-10 М). Недостатком этого электрода являются большие времена отклика (2-4 мин) и возвращения к нулевой линии (5-10 мин). Так, показано [18], что при химическом связывании уреазы с полипропиленовой мембраной, являющейся составной частью газопроницаемой мембраны NHз-элeктpoдa, при помощи одного электрода можно выполнить 200-1000 [c.122]

Термоанализ можно применять также и для эпизодического или непрерывного наблюдения за окружающей средой [7] как своего рода антитоксический контроль. При необходимости детектирования определенного токсического соединения в ферментной колонке термистора можно иммобилизовать определенное количество фермента, который ингибируется данным соединением. Тяжелые металлы, например Hg(lI), можно обнаружить уже при содержании до 0,2-10 % по их ингибирующему действию на иммобилизованную уреазу [7]. Концентрацию тяжелых металлов в пробе определяют сравнением температурного отклика на импульсный ввод субстрата (с избытком мочевины) до и после введения пробы. Затем специальной промывкой полностью восстанавливают активность уреазы, что позволяет проводить повторные анализы на той же ферментной колонке. В некоторых случаях можно применять ферменты, которые действуют непосредственно на определяемое вещество. Так, цианид определяют с пределом обнаружения 10 М, используя фермент родаминазу. Возможно даже прямое определение пестицидов и ингибиторов ацетитхолинэстеразы [c.470]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология