Глутамин, идентификация

Амиды кислот, часто получаемые в препаративных и аналитических работах для идентификации карбоксильных и нитрильных групп, встречаются также в природе (аспарагин, глутамин, мочевина и т. д.). Амиды кислот могут реагировать в двух таутомерных формах [c.528]

Рис. 9.7.6. Изображение пространствениого строения центральной части участка 3-структуры ОПИТ. Десять остатков аминокислоты обозначены следующими буквами С — цистеин, F — фенилаланин, I — изолейцнн, Q — глутамин, R — аргинин, Т — треонин, V — валин, Y — тирозин. Водородные связи между группами NH и СО обозначены щтриховкой. Отметим, что протоны NH л-го остатка и протоны С"Н (п - 1)-го остатка, обозначенные стрелками, расположены очень близко. Наблюдаемые NOE позволяют провести последовательную идентификацию резонансных сигналов. (Из работы [9.31].)

Система 1 является двухфазной. Верхняя фаза этой системы применяется непосредственно для хроматографии. Нижнюю фазу используют для предварительного насыщения слоя силикагеля на пластине. Для этого пластину со слоем силикагеля оставляют в течение ночи в закрытом сосуде, в который налита нижняя фаза системы 1. Основным приемом для идентификации эфирорастворимых ДНФ-аминокислот является двумерная хроматография в системах 1 и 2 (рис. 13), 1 и 4 (рис. 14), 1 и 5 (рис.15). Валц, Фами и др. [25] улучшили разделение эфирорастворимых ДНФ-аминокислот, заменив систему 1 однофазной системой 1-а толуол—пиридин—этиленхлоргидрин—25 %-й водный аммиак (50 15 35 7), пропуская ее два раза через пластинку. Для разделения ДНФ-производных аспарагина, глутамина, аспарагиновой и глутаминовой кислот использовали двумерную хроматографию в системах 1-а (трехкратно) и 5-а хлороформ—метанол—уксусная [c.310]

Методика анализа свободных аминокислот описана Шустером [79]. На колонке, заполненной лихросорбом ЫНг (размер-частиц 5 мкм), используя градиентное элюирование смесью ацетонитрил— фосфатный буферный раствор, он за 30 мин разделил около 20 аминокислот, входящих в состав растворов для внутривенного введения. Обнаружение свободных аминокислот проводилось по их поглощению при 200 нм, а их идентификация — по времени удерживания. Чтобы подтвердить отнесение пиков, спектры поглощения всех выделенных компонентов сравнивались со спектрами чистых препаратов аминокислот. В этой статье, как и в работах, посвященных анализу аминокислот в виде их производных, содержится утверждение, что картина разделения очень сильно зависит от температуры колонки, а также от условий ее эксплуатации. Согласно данным Шустера, снижение эффективности колонки может привести к тому, что аспарагину, глутамину и глицину на хроматограмме будет соответствовать один пик. Авторы работ [54, 80] исследовали влияние различных факторов на время удерживания компонентов смеси и на разрешающую способность колонки более детально. [c.51]

Методы выделения и идентификации мономеров дают информацию о молекулярной массе олигомера и его субъединиц, их количестве и свойствах, позволяют получать препараты для определения первичной структуры. Если удается получить белок в виде кристаллов, изучение первичной структуры удобно вести параллельно с помощью секвенирования и физических методов (например, рентгеноструктурного анализа), поскольку сопоставление получаемой информации существенно ускоряет ход анализа [158]. Однако такая возможность представляется редко. Часто именно получение достаточно чистых препаратов белка или субъединиц, пригодных для проведения аминокислотного анализа, и составляет одну из главных проблем, поскольку исследуемый белок может присутствовать лишь в незначительных количествах в сложной смеси сопутствующих белков и продуктов их деградации или же исходная смесь может содержать белки с очень близкими свойствами. Если белок плохо растворим и требует более жестких условий для солюбилизации, гетерогенные препараты могут быть получены уже на начальном этапе выделения. Причиной появления гетерогенности можег быть, по-видимому, изменение суммарного заряда из-за дезамидирования амидных групп аспарагина и глутамина, карбами-лирование е-аминогрупп некоторых остатков лизина ионом цианата, присутствующим в растворах мочевины [38], неспецифическая модификация остатков метионина и гистидина при алкилировании цистеина. [c.16]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология