Фосфатаза щелочная, активный центр

Точно такая последовательность обнаружена и в щелочных фосфатазах млекопитающих (причем для этих ферментов характерна такая же потребность в ионах металла) [50]. Эта последовательность аналогична последовательности аминокислот в активных центрах сериновых протеиназ с той лишь разницей, что у щелочных фосфатаз вместо остатка глицина стоит аланин. Возможно, эти две группы ферментов эволюционировали от общего белка-предшественника [51]. [c.119]

Изложенные выше предположения были полностью подтверждены экспериментальными исследованиями субстратной специфичности многих ферментов. Целый ряд ферментов, как оказалось, проявляет лишь очень широкую групповую специфичность. Например, щелочная фосфатаза Е. соИ катализирует гидролиз разнообразных эфиров фосфорной кислоты, не проявляя видимой селективности в отношении этих субстратов [4]. Возможно, что в этом случае образование комплекса фермента с эфиром фосфорной кислоты происходит в основном за счет ионного взаимодействия, поскольку все эти эфиры яляются анионами и в активном центре фермента существенную роль играет катион Zn -. [c.96]

Как следует из изложенного выше, в описании щелочной фосфатазы и ее действия остаются неясными некоторые ключевые моменты, которые подчас трактуются взаимоисключающими способами. Не приходится сомневаться в том, что дальнейшие исследования, в том числе рентгеноструктурный анализ кристаллов фермента, прояснят положение. Однако сейчас остается только гадать о деталях процессов, происходящих в активном центре. [c.641]

Рис. 17.1. Модель активного центра щелочной фосфатазы. а —фосфорилирование фермента б — перенос фосфата на воду и другие нуклеофилы.

Субъединицы, несущие активный центр, как правило, сами по себе не активны. Это показано на опытах по необратимой денатурации, диссоциации лактатдегидрогеназы [38, 46], щелочной фосфатазы [45] и других ферментов, приведенных в табл. 9. [c.125]

Рентгеноструктурные исследования карбоангидразы свидетельствуют о том, что активный центр состоит из трех имидазольных лигандов, которые искажают тетраэдрическую координацию иона 2п(П). Среди предложенных молекулярных моделей следует отметить аналогичную геометрию для производного трис-(имидазолил)-метана. Бреслоу и сотр. [218] синтезировали трис[4(5-имидазолил]карбииол (4-ТИК) и трис[2-имидазолил]карбинол (2-ТИК) в качестве моделей цинк-связывающего центра в карбоангидразе и щелочной фосфатазе. [c.344]

Многие белки в противоположность приведенным выше примерам связывают ионы металлов либо временно, либо в течение всего времени их существования в организме. Ранее уже упоминался пример временного связывания Са + в связи с протеолитической активацией протромбина и других компонентов системы свертывания крови (см. разд. 24.2.1.2). Иной случай представляют щелочные фосфатазы и фосфокиназы, где, по-видимому, для экранирования отрицательных зарядов фосфатной группы для облегчения атаки атома фосфора нуклеофилом требуется ион двухвалентного металла типа Mg + или Zn +. Более постоянное связывание ионов металлов белками может служить для выполнения одной из указанных ниже целей. Ионы Са + предохраняют трипсин от автолиза. Конкавалин А (см. ниже) не связывает производных глюкозы до тех пор, пока не свяжет предварительно один ион Са + и один ион Мг 2+ на субъединицу. В данном случае катионы, по-видимому, осуществляют подгонку конформации молекулы, образуя центр связывания глюкозы. Ионы металлов принимают также участие в формировании активных центров ферментов. По- [c.561]

В то же время цикламы очень слабо захватывают щелочные и щелочноземельные металлы, а из переходных металлов заметно взаимодействуют лишь с Со и Ациклические полиамиды вообще не проявляют никакой избирательности. Таким образом, специфичность к Си достигается на низкомолекулярном уровне. Следует отметить, что в большинстве металлсодержащих ферментов (таких, как карбо-ангидраза, щелочная фосфатаза, карбоксипептидаза и т. д.) имеются соединения (типа имидазола, цистеина, аспарагиновой кислоты, глутаминовой кислоты и т. д.), создающие в целом активные центры для удерживания ионов металлов. Для придания полимерам избирательной способности к захвату ионов Си " могут использоваться два следующих метода [c.97]

То, что колоколообразные рН-зависимости скоростей реакций и другие изгибы на этих зависимостях могут возникать как в результате смены скорость определяющей стадии, так и в результате ионизации реагентов, означает, что нельзя все эти кривые объяснять ионизацией реагентов. Этот вывод особенно важен для ферментативных реакций, в которых точки перегиба на колоколообразных рН-зависимостях скоростей принято приписывать ионизации групп активного центра фермента, если их нельзя приписать ионизации субстратов. Уменьшение скорости гидролиза фосфатных эфиров, катализируемого щелочной фосфатазой из Е. соИ с улгеньшением pH, можно объяснить ионизацией группы активного центра с рК 7, однако в действительности это вызвано заменой скорость определяющей стадии фосфорилирования фермента при высоких значениях pH на скорость определяющую стадию дефос-форилхтрования при более низких значениях pH [141. Вероятно, в дальнейшем будут обнаружены и другие ферментативные реакции, в которых изменение скорости при изменении pH скорее связано со сменой скорость определяющей стадии, а не с ионизацией групп активного центра это особенно вероятно ввиду многостадийности ферментативных реакций. [c.366]

Таким образом, все разнообразие функций цинка в растении, его роль в углеводном, фосфорном и белковом обмене определяется его наличией во многих ферментных системах. Цинк входит в состав активных центров карбоангидразы, карбооксипептидазы, щелочной фосфатазы, является металлом-активатором эно- [c.144]

Структура. Продажными препаратами щелочной фосфатазы являются фермент из кишечника телят и из Е. соЫ. В качестве метки в иммуноферментном анализе обычно используют первый из них, так как он обладает более высокой удельной каталитической активностью. Молекула щелдчной фосфатазы представляет собой димер с 100 ООО. В состав каждой из субъединиц входят два сильно связанных атома цинка, один из которых существен для поддержания структурной целостности молекулы, а второй входит в состав активного центра и принимает участие в каталитическом аКте. [c.73]

Антитела против ферментов не направлены к структурам непосредственно в активном центре, однако они могут полностью (в случае лецнтиназы) пли частично (в случае уреазы, каталазы, папаина, рнбон клеазы) экранировать его. В некоторых случаях антитела к ферментам вообще не оказывают никакого влияния на функцию последних (щелочная фосфатаза, дифенолоксидаза). [c.267]

В настоящее время в ряде лабораторий ведутся опыты по сопоставлению химического строения мутированных белков, т. е. повреждений в полипептидной цепи белка, с положением соответствующего мутанта на генетической карте. Первый опыт подобного рода выполнен Левинталем, Гереном и Ротманом. Объектом являлась щелочная фосфатаза Е. oli. Мы уже рассматривали выше цистрон фосфатазы и говорили о том, что были получены многочисленные мутанты Р , т. е. не синтезирующие активный фермент. Интересно, что некоторые из этих мутантов производили белок, иммунологически идентичный со щелочной фосфата зой дикого штамма, но лишенный ферментативной активности. То были мутанты, в которых генетическое повреждение относилось к самому центру функциональной активности. Можно было бы воспользоваться этими белками, утратившими ферментативную активность, выделяя их с помощью того или иного физико-химического метода 27 с. Е. Бреслер [c.417]

Последовательные стадии костеобразования в культуре. При эксплантации в органные культуры фрагментов костно го мозга, выделенных из медуллярной полости бедренной кости мыши, за 20—25 сут культивирования может происходит полная дифференцировка стромальной ткани — образование кости. Новообразованная кость рас -лагается в виде плоской пластины, которая занимает центральные участки эксплантата и часть примыкающей к ним зоны роста. Морфологическое изучение культур последовательных сроков позволяет судить о динамике костеобразования in vitro. В культурах костного мозга мыши очаги остеогенеза появляются на 16—20-е сутки в центре эксплантата и участках с наибольшей клеточной плотностью. Здесь обнаруживаются тонкие костные балки, ориентированные вдоль мил-липорового фильтра. Лежащие на их поверхности остеобласты пр -являют высокую активность щелочной фосфатазы и имеют морфологию, характерную для остеобластов in situ. По мере культивирования происходит разрастание костной ткани (утолщение кости) и к 26—30-м суткам слияние костных балок в единую пластину с замурованными остеоцитами. В присутствии глицерофосфата происходит минерализация основного вещества новообразованной костной ткани. [c.280]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология