РНК минус-цепь

Рис. 5-73. Примеры, иллюстрирующие разнообразные способы репликации вирусных геномов. В двух случаях, как мы видим, к концам цепей ДНК ковалентно присоединены терминальные белки, эти белки играют важную роль в соответствующем пропессе репликапии. Обратите внимание на главное различие между РНК-вирусами с позитивными и негативными геномами оно заключается в том, что вирусы с минус -цепью, прежде чем образовать вирусные белки, должны синтезировать плюс -цепь. Для этой цели капсид РНК-вируса должен нести в себе одну или несколько молекул вирусной РНК-зависимой РНК-полимеразы (репликазы). Справа в рамке показан для каждого случая конечный РНК- или ДНК-продукт,

Двухцепочечная репликативная форма, содержащая плюс -и минус -цепи, образуется и в растениях под действием вируса табачной мозаики [193, 201, 210] и вируса ЕМС [216] и является, очевидно, обязательной промежуточной стадией при воспроизведении всех РНК-содержащих вирусов. [c.251]

ДНК-лигазы, которая превращает минус-цепь в замкнутую кольцевую молекулу (рис. 57). Полученная двунитевая структура называется репликативной формой I (КГ-1). Эта двунитевая ДНК может слу- [c.195]

Эти мутанты возникают спонтанно, а также могут быть индуцированы аналогами оснований во время внутриклеточного развития фага f2 в этом случае мутации возникают в результате ошибок копирования либо во время синтеза минус -цепей РНК при образовании РФ, либо во время синтеза плюс -цепей на РП. Мутанты могут быть также индуцированы путем обработки зрелых вирусных частиц или выделенной из них инфекционной РНК химическими мутагенами, такими, как азотистая кислота. [c.475]

На основании фенотипов, наблюдавшихся при росте в ограничивающих условиях, эти мутанты были разбиты натри группы. Мутанты группы I неспособны синтезировать минус -цепи и, следовательно, не могут образовывать ни РФ, ни РП. Такие фаги, вероятно, содержат мутацию в гене, определяющем первичную структуру фаговой РНК-репликазы. В отличие от них мутанты группы II не только характеризуются нормальной репликацией РНК в ограничивающих условиях, но и образуют внешне нормальные, хотя и не инфекционные частицы потомства. [c.475]

Репликация одноцепочечного фага должна протекать в две стадии. Сначала на содержащейся в фаговой частице плюс-цепн образуется. комплементарная минус-цепь. Для инициации этой стадии необходимы еще один бактериальный белок, а именно фактор HF , и GTP. Образующиеся минус-цепи не остаются связанными с плюс-цепями. Они, по-внди-мому, освобождаются от репликазы в одноцепочечной форме и складываются, образуя высокоупорядоченные молекулы с большим числом шпилек. (Как и в случае плюс-цепей РНК фага MS2, показанных на рис. 15 19.) Далее минус-цепи копируются (фактор ИР для этого не нужен), образуя большое число новых плюс-цепей, которые включаются в готовые фаговые частицы. [c.245]

Известно, что для инициации процесса репликации ДНК фага ФХ необходимо наличие в геноме фага специфического гена А. Недавно было показано, что этот ген детерминирует синтез белка с мол. весом 56 000 — специфической эндонуклеазы надрезающей вирусную цепь RF-формы, что необходимо для начала процесса репликации [209]. По-видимому, после появления такого разрыва стимулируется синтез небольшого участка РНК-затравки. Репликация ДНК протекает в большинстве случаев в двух направлениях (разд. Д,2), однако репликативная форма Ф X образуется, вероятно, только в одном направлении по механизму разматывающегося рулона (rolling ir le) [210]. В соответствии с этим механизмом [уравнение (15-9)], по мере того как вновь образующаяся цепь вирусной ДНК синтезируется вдоль комплементарной (минус) цепи-матрицы, исходная вирусная ДНК (плюс-цепь) вытеснется в виде одноцепочечного хвоста . [c.278]

Существует четыре типа вирусных нуклеиновых кислот одно-и двунитевые как РНК, так и ДНК. Двунитевая ДНК вирусов реплицируется в основном таким же способом, как бактериальная. Вирусы, содержащие однонитевую ДНК, типа бактериофага ФХ 174, начинают свой жизненный цикл впрыскиванием своей кольцевой ДНК в клетку хозяина, бактерии Е. соИ, в которой инфекционная плюс -цепь действует как матрица для построения комплиментарной минус -цепи, что приводит к образованию кольцевого дуплекса. После этого новая копия плюс -цепи постепенно сворачивается и разрезается на отрезки идентичной длины перед пединением 3 - и 5 -концов в замкнутое однонитевое кольцо. [c.200]

Для вирусов, вирионы которых содержат однонитевую ДНК, первой стадией репликации является синтез в инфицированной клетке комплементарной цепи, т.е. образование двунитевой репликативной формы ДНК. При этом цепь ДНК, входящая в вирион, называется плюс-цепью, а создаваемая на ней, как на матрице, комплементарная ДНК - минус-д епью. Инициация и элонгация синтеза ми-нус-цепи идут с участием ферментов клеток хозяина. Механизмы инициации достаточно разнообразны. Например, при синтезе минус-цепи ДНК фаг-а tpX 174 в инициации участвует сложный комплекс белков, включающий праймазу. ДНК фага М13 имеет специальную шпильку, стебель которой работает как полноценный двунитевой фрагмент по отношению к РНК- юлймеразе клетки. Поэтому затравка образуется с помощью хозяйской РНК-4Юлимеразы. [c.194]

На минус-цепи, как на матрице, начинается производство новых плюс-цепей. Вначале они преимущественно используются для создания новых репликативных структур. Затем, по мере накопления в клетке структурщлх белков бактериофага, на плюс-цепях начинают формироваться новые фаговые частицы. [c.195]

V освободившимся участком РВ за 3 -конец минус-ДНК. Это дает возможность последней продолжить элонгацию до полного считывания 5 -конца начавшей формироваться плюс-цепи. Одновременно плюс-цепь получает возможность элон-гироваться до достижения 5 -конца минус-цепи. Как видно из схемы, при этом на обоих концах линейной двунитевой ДНК возникают идентичные структуры, известные как длинные концевые повторы (long terminal repeats, LTR), с помощью которых происходит встраивание вирусной ДНК в геном. [c.227]

I - синтез минус-цепи ДНК, содержащий в качестве праймера тРНК 2 - гидролиз РНКазой Н-участка плюс-цепи РНК, содержащего R и U5 3 - первый скачок. Образование дуплекса 3 -конца плюс-цепи РНК и R -фрагмента вновь синтезированной минус-цепи ДНК и начало синтеза минус-цепи ДНК 4 - элонгация синтеза минус-цепи ДНК 5 - образование ника в РНК в точке, прёд-шествующей участку U5 6 - синтез плюс-цепи ДНК и образование U3, R, U5, РВ области, комплементарной U3, R, U5 7- расщепление тРНК-фрагмента минус-цепи РНКазой Н 5 - завершение [c.227]

Одна из наиболее упо фебляемых схем такого мутагенеза приведена на рис. 85. С этой целью исходный ген встраивают в двунитевую репликативную форму ДНК фага М13, зрелые частицы которого содержат однонитевую кольцевую молекулу ДНК (плюс-цепь, см. 5.7). Введение полученной рекомбинантной ДНК в бактериальные клетки приводит к накоплению частиц бактериофага, содержащих однонитевую рекомбинантную ДНК, из которых ее можно выделить и использовать в качестве матрицы для ДНК-полимеразы. Для репликации используют специально сконструированный праймер, который соответствует участку встроенного гена, содержащему кодирующий элемент заменяемой аминокислоты. При этом по обе стороны от этого тринуклеотнда праймер полностью комплементарен рекомбинантной ДНК, а в пределах этого тринуклеотида заменен таким образом, чтобы в образующейся при репликации минус-цепи образовалась запла- [c.305]

На основании приведенных данных Очоа и его сотрудники [172, 173] пришли к выводу, что репликация вирусной РНК родительского типа ( плюс цепь) происходит в два этапа. На первом этапе внедряющаяся цепь вирусной РНК действует как т-РНК (стр. 271), т. е. вступает в контакт с рибосомами клетки-хозяина и контролирует образование РНК-зависимой полимеразы и синтез белков вирусной оболочки. С помощью полимеразы на <шлюс -цепи, действующей как матрица, образуются комплементарные минус -цепи, и в результате происходит образование двухцепочечной репликативной формы РНК. [c.250]

На родительской плюс -цепи образуется комплементарная минус -цепь. Эта образовавшаяся дшнус -цепь действует затем как матрица, на которой штампуется новая плюс -цень (пунктир), вытесняя исходную плюс -цепь. Процесс затем много раз повторяется, в результате чего образуется целая группа новых плюс -цепей. Исходная родительская плюс -цепь остается неизмененной. [c.250]

Одноцепочечная кольцевая плюс -цепь инфицирующей ДНК фага служит в качестве матрицы для синтеза комплементарной минус -цепи, давая начало двухцепочечной репликативной форме, или РФ. На ранних стадиях заражения РФ реплицируется полуконсервативно и симметрично, в результате чего образуются дочерние молекулы РФ. На поздних стадиях заражения, когда уже присутствуют белковые молекулы фаговых головок, начинается асимметричная репликация молекул РФ. Теперь в качестве матрицы для синтеза дочерней плюс -цепи служит только минус -цепь Р Ф в результате происходит вытеснение старой плюс -цепн из молекулы РФ. Вытесненная плюс -цепь заключается в фаговую головку одной из частиц потомства. [c.276]

Изучение внутриклеточного размножения фага 0X174 позволило создать следующую картину репликации его генетического материала (фиг. 139) при вхождении в клетку-хозяина одноцепочечная кольцевая молекула ДНК родительского фага, или плюо>-цепь, служит сначала в качестве матрицы для синтеза комплементарной минусу>-цепи, в результате чего образуется двухцепочечная кольцевая РФ-структура. Репликация РФ протекает обычным полуконсервативным способом, в соответствии с моделью Уотсона — Крика, так что число РФ-молекул на зараженную клетку возрастает на ранних стадиях латентного периода. Однако на более поздних стадиях, когда в клетке уже имеется определенный пул субъединиц белка фаговой головки, начинается асимметричный процесс репликации ДНК, когда только минус -цепь РФ-кольца служит в качестве матрицы для синтеза комплементарной плюс -цепи. С ростом новой плюс -цепи старая плюс -цепь вытесняется из РФ н заключается в белковую оболочку, превращаясь, таким образом, в одноцепочечный генетический материал зрелой инфекционной частицы фага 0X174. [c.277]

Отсюда можно заключить, что, как и предполагалось, только одна из. двух комплементарных цепей ДНК, а именно минус -цепь, активна в осуществлении гетерокаталитической функции. Транскрипция минус -цепи, очевидно, приводит к образованию мРНК, нуклеотидная последовательность которой идентична нуклеотидной последовательности плюс -цепи, содержащейся в инфекционной частице фага 0X174. [c.397]

Однако в экстрактах, приготовленных спустя несколько минут, меченая родительская РНК обнаруживается в составе двухцепочечной формы, устойчивой к рибонуклеазе, которая благодаря своей жесткой спиральной конформации имеет более низкую константу седиментации — 145. В экстрактах, приготовленных через 10 мин после начала внутриклеточного развития фага, меченая родительская РНК обнаруживается в составе частично двухцепочечной формы, которая частично чувствительна к рибонуклеазе до обработки рибонуклеазой такая РНК имеет константу седиментации около 305, а после обработки — 148. На основании этих результатов была предложена схема репликации РНК фага 2 (фиг. 233), напэмянаю цая в принципе механизм репликации ДНК фага 0X174. Согласно этой схеме, в начале репликации одноцепочечная родительская РНК ( плюс -цепь) используется в качестве матрицы для синтеза комплементарной минус -цепи в результате образуется двухцепочечная РФ-РНК. Образовавшаяся минус -цепь репликативной формы служит затем в качестве матрицы для синтеза комплементарной плюс -цепи дочерней РНК- Однако задолго до того, как закончится синтез первой дочерней плюс -цепи, на репликативной форме инициируется синтез второй, [c.471]

РФ двухцепочечная репликативная форма, состоящая из плюс - и минус -цепей. синтезируется [c.471]

В липидной оболочке вириона находится белок М (мембранный, или матриксный), который является основным белковым компонентом вируса и, как полагают, структурным по своей функции. Внутри мембранной оболочки заключено восемь одноцепочечных молекул РНК (минус-цепь, т. е. вирионная РНК комплементарна мессенджер РНК), связанных с белком нуклеокапсида, и тремя большими белками Р1, Р2 и РЗ, ответственными за репликацию и транскрипцию РНК. По крайней мере три кодируемых вирусом неструктурных белка (NS1, NS2 и М2) обнаруживаются в инфицированных клетках, но их функции неизвестны. В главе 2 представлены современные данные о восьми генах вируса гриппа и дюлекулярных массах кодируемых ими белков. [c.126]

Таким образом, РП состоит из устойчивого к РНКазе ствола двуспиральной РНК и нескольких боковых хвостов одноцепочечных РНК, Эта структура, будучи намного тяжелее РФ, седиментирует гораздо быстрее ее, но после расщепления поддействием РНКазы одноцепочечных боковых хвостов РНК она превращается в форму, похожую на РФ. После завершения синтеза дочерней плюс -цепи и освобождения ее из состава РП она люжет быть использована либо в качестве матрицы для синтеза комплементарной минус -цепи с образованием повой РФ, либо для построения зрелой фаговой частицы потомства. В течение первых 15 мин после заражения в клетке реализуется первая из этих двух возможностей. За это время постепенно накапливаются РФ и РП, т. е. возрастает количество молекул, участвующих в синтезе молекул РНК фагового потомства. На поздних этапах латентного периода, когда внутриклеточное содержание субъединиц белка оболочки достигает достаточно высокого уровня, начинает осуществляться вторая из этих возможностей. Количество РФ и РП (и, следовательно, число минус -цепей) достигает к этому времени окончательного уровня, а число внутриклеточных частиц фагов-потомков постепенно нарастает, пока весь процесс репродукции не завершится лизисом клетки. [c.472]

Оказалось, что такие фаги содержат мутацию в гене, кодирующем полипептид длиной 320 аминокислот, необходимый для проникновения фага в клетку-хозяина в каждой частице фага Г2 содержится по одной молекуле такого полипептида. И наконец, мутанты группы III не могут образовывать нормальный белок оболочки, так как они содержат мутации в структурном гене этого белка. Более того, в ограничивающих условиях мутанты группы III синтезируют ненормально большие количества РФ и РП, так как плюс -цепи РНК, образующиеся в зараженных клетках, не инкапсулируются фаговым белком и, следовательно, могут служить матрицами для новых минус -цепей. Опыты по комплементации, в которых бактерии одновременно заражали двумя мутантами фага f2, показали, что три фенотипические группы четко совпадают с тремя группами комплементации при смешанном заражении бактерий двумя фаговыми мутантами, относящимися к разным или к одной и той же фенотипической группе, наблюдается соответственно нормальное или ненормальное развитие фагов. Эти результаты позволили заключить, что в РНК фага f2 закодировано не более трех белков. Следует отметить, что ни в одном из опытов со смешанным заражением не было обнаружено генетической рекомбинации между фагами. Значение такого результата неясно, так как большинство культур мутантов фага 12 содержит до 0,1 % ревертантов дикого типа. Столь высокая скорость мутаций генома РНК затрудняет поиски редких рекомбинантов. Конечно, возможно, также что генетическая рекомбинация тежду геномами РНК вообще не происходит и что этот процесс присущ только полидезоксирибонуклеотидам. [c.475]

Еще одна ранняя и, несомненно, наиболее важная задача трансляции РНК — это синтез РНК-полимеразы, называемой обычно репликазой. В случае фага Q , где репликаза изучена очень детально, показано, что фермент обладает двумя функциями, сосредоточенными в одной и той же белковой молекуле. Двойная функция репликазы заключается в том, что она сперва использует родительскую вирусную РНК, называемую (4-)-цепью ( плюс -цепью) в качестве матрицы для синтеза комплементарной (—)-цепи ( минус -цепи), а затем использует эту (—)-цепь в качестве матрицы для синтеза комплементарных (+)-цепей РНК потомства на этой матрице. Показано, что очищенная репликаза содержит макромо-лекулярные факторы, по крайней мере один из которых присутствует и в пеинфицированных клетках [150, 436]. Эти факторы, по-видимому, необходимы для первой из названных функций [21]. [c.238]

Из проведенных исследований становится ясным, что могут быть сконструированы рекомбинантные вирусы, экспрессирующие из клонированных генов НА большие количества белков НА, которые оказываются нормальными во всех отношениях их молекулярные массы не отличаются от молекулярной массы подлинного белка, и они проявляются на поверхности инфицированной клетки в гликозилированной форме, антигенно и биологически активной. Таким образом, белок, который кодируется геномной РНК с минус-цепью, может быть экспрессирован в обильных количествах, когда копии двухцепочечных ДНК кодируюпщх их последовательностей соединены с сильными SV40 промоторами. Таким образом можно начать думать об использовании сайт-направленного мутагенеза для анализа тех частей молекулы НА, которые важны для его> структуры, функции и биосинтеза и которые до настоящего времени не удавалось анализировая ь генетически. [c.179]

Зарождение внутренней делеции прогениторного гена (или предшественника ДИ РНК) через отклоняющийся от нормы процесс репликации. Мо.чекула полимеразы с прикрепленной возникающей цепью РНК может отделиться от матрицы вРНК (минус-цепь), вновь прикрепиться ниже и вследствие этого генерировать укороченную плюс-цепь. Эти плюс-цепочные молекулы могут служить матрицей для синтеза делеционных минус-цепей (ДИ РНК). Хотя на рисунке этого не показано, делеция возможна при синтезе минус-цепи из матрицы полной плюс-цепи. Когда делеционная минус-цепь зарождается, она может быть экстракоппро-вана путем синтеза матрицы плюс-цени. Темными квадратами обозначена молекула полимеразы с прикрепленной возникающей РНК а, Ь и с, (1 — 3 - и 5 -терми-нальные последовательности матрицы РНК. [c.263]

Смотреть страницы где упоминается термин РНК минус-цепь: [c.190] [c.206] [c.568] [c.113] [c.195] [c.195] [c.196] [c.196] [c.197] [c.305] [c.264] [c.182] [c.183] [c.183] [c.372] [c.396] [c.397] [c.467] [c.472] [c.473] [c.473] [c.78]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология