Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Инсулин рекомбинация цепей

Рис. 2-43. Рекомбинация цепей инсулина с применением сшивающих реагентов [680]. Рис. 2-43. Рекомбинация цепей инсулина с применением сшивающих реагентов [680].

    Принципиально возможны два различных подхода к полному синтезу инсулина. Основой первого подхода являются успешные опыты по рекомбинации инсулина из цепей А и В, синтез которых должен быть осуществлен в первую очередь. В этом случае [c.476]

    Согласно данным Ду и сотр. [2731], степень активности, генерируемой восстановлением и последующим окислением смеси 8-сульфонатов цепей А и В, зависит от соотношения компонентов, причем наиболее высокий уровень активности наблюдается при молярном соотношении цепей А и В, равном 1,5 1. Полученное таким образом вещество обладало активностью 12 М. Е./жг, что составляет приблизительно 50% активности кристаллического инсулина. Оптимальные условия рекомбинации [c.474]

    Полный синтез цепей А и В овечьего инсулина, удаление защитных групп и рекомбинация двух синтетических цепей, а также одной синтетической и одной природной цепи были осуществлены независимо и практически одновременно в двух различных лабораториях. Вскоре в двух других лабораториях удалось осуществить рекомбинацию синтетической цепи В с природной цепью А и наоборот. [c.477]

    Синтез такой природной структуры, как молекула инсулина, выдвигает перед исследователями двойную задачу. Во-первых, требуется синтезировать две аминокислотные последовательности в 21 и 30 аминокислотных остатков. При современном уровне развития химии пептидов это можно осуществить с достаточно хорошим выходом. Другая сторона вопроса более сложна. Молекула инсулина содержит 6 остатков цистеина, которые в нативном белке определенным образом скомбинированы и образуют 3 дисульфидных мостика, причем один из них дает внутренний цикл в цепи А (остатки 6 и 11). При рекомбинации теоретически возможно 16 вариантов замыкания дисульфидных мостиков (рис. 26) но, повидимому, лишь единственная комбинация приводит к биологически активной молекуле. Это ставит жесткое условие найти разные типы защит для различных сульфгидрильных групп с тем, чтобы иметь возможность осуществить ступенчатое направленное замыкание определенных пар ЗН-групп. [c.166]

Рис. 26. Теоретически возможные варианты соединения дисульфидных мостиков в цепях А и В инсулина при рекомбинации. Рис. 26. <a href="/info/27323">Теоретически возможные варианты</a> соединения <a href="/info/99352">дисульфидных мостиков</a> в цепях А и В инсулина при рекомбинации.

    Диксон и Уордлоу [604] окислением 5-сульфонатов цепей А и В при pH 8,5—9,0 получили смесь веществ, активность которой составляла 1—2% активности инсулина. Ду и сотр. [618] для получения 5-сульфонатов цепей А и В восстанавливали инсулин сульфидом натрия и тетратионатом натрия. Продукты восстановления удалось разделить хроматографией на дауэксе 50-Х2 или зональным электрофорезом на целлюлозном порошке. Восстановление полученных таким образом 5-сульфонатов осуществляли обработкой избытком тиогликолевой кислоты. При аэробном окислении (pH 8,5) чистой цепи А или чистой цепи В не образуется никаких активных соединений. Напротив, в этих же условиях из смеси цепей А и В получается вещество, активность которого составляет 5—10% активности инсулина. Взаимодействие одной цепи, находящейся в сульфгидрильной форме, с 5-сульфонатом другой цепи также приводит к образованию инсулина. Более того, путем очистки продуктов окисления (1 г смеси с активностью 1,83 М. Е./жг) удалось выдел ить 28 мг кристаллического инсулина с удельной активностью 18,4 М. Е./жг (судорожный тест на мышах). Полученный таким образом инсулин не отличается от природного гормона по кристаллической структуре, а также по хроматографическому и электрофоретическому поведению. Идентичными оказались и пептидные карты продуктов ферментативного гидролиза этих двух соединений. Дальнейшее улучшение методики окислительной рекомбинации цепей А и В позволило Янгу и сотр. [1145] повысить выход инсулина до 50%. Эти данные свидетельствуют о том, что среди множества теоретически возможных продуктов окисления цепей А и В структура инсулина является предпочтительной. [c.474]

    Комплексы сывороточных белков с другими веществами белковой природы могут быть также выделены с помощью гель-хроматографии, как это было уже показано на примере комплекса гемоглобин — гаптоглобин (фиг. 16) [49]. Еще проще количественно определить емкость гемоглобина (способность гемоглобина к комплексообразованию) на сефадексе G-100 [50]. Фракция макроглобулинов (выделение на сефадексе G-200), очевидно, содержит белок, связывающий трипсин [51, 52]. Активность при этом сохраняется лишь частично [51, 52]. Комплексы антиген — антитело часто выделяли на пористых гелях, а затем после разложения на составные части исследовали более подробно (см. литературу, приложение IX). В предыдущем разделе на примере инсулина были рассмотрены возможности изучения растворимых иммунокомплексов. Иммунологические методы в сочетании с гель-фильтрацией играют важную роль в исследовании строения Y-глобулинов. Среди работ на эту тему (см. литературу, приложение X) имеются блестящие исследования, посвященные восстановительному расщеплению и выделению L- и Н-цепей, их рекомбинации, ограниченному действию папаина и, наконец, иммунологическим свойствам интактного белка и его фрагментов. [c.218]

    Возможность рекомбинации инсулина из отдельных цепей А и В интенсивно изучали в течение ряда последних лет. Помимо теоретического интереса, рекомбинация синтетических цепей могла бы подтвердить строение инсулина, предложенное Сэнджером. В восстановленной форме цепи А и В содержат четыре и две сульфгидрильные группы соответственно, поэтому [c.473]

    Катсояннис и сотр. [1195а] осуществили рекомбинацию синтетической цепи А с природной цепью В и получили вещество, активность которого составляла 0,5—1,2% активности инсулина (испытания на диафрагме мыши и иммунологический тест). Активность нейтрализовали антителами, связывающими бычий инсулин. Активное вещество было получено также [1189а] рекомбинацией природной цепи А с синтетической цепью В и рекомбинацией двух синтетических цепей [1183а]. Подробные данные об активности двух последних веществ не приведены. [c.489]

    Если структура инсулина правильно отражается формулой, предложенной Сенджером, то синтетически полученные цепи А и В инсулина должны при рекомбинации между собой и с цепями А и В, выделенными из природного белка, вести себя аналогичным образом. [c.167]


Смотреть страницы где упоминается термин Инсулин рекомбинация цепей: [c.290]    [c.473]    [c.489]   
Пептиды Том 2 (1969) -- [ c.2 , c.473 , c.474 , c.489 ]




ПОИСК





Смотрите так же термины и статьи:

Инсулин

Инсулинома

Рекомбинация

цепи инсулина

цепи инсулина инсулина



© 2025 chem21.info Реклама на сайте