Глицин нингидринная реакция

Упражнение 20-7. Используя, насколько это возможно, аналогии, напишите механизмы всех стадий нингидринной реакции (на примере глицина). Можно ли ожидать, что аммиак или метиламин приведут к появлению окраски [c.108]

Проделывают реакцию с какой-нибудь аминокислотой, например, с глицином. Наливают в про бирку около 1 мл раствора глицина, добавляют 5—6 капель раствора нингидрина и нагревают. Появляется фцо-летово-синее окрашивание, [c.12]

Неочищенный валин (73% первоначальной активности) содержит нерадиоактивный глицин, небольшие количества С -аланина, С -2-аминомасляной кислоты и менее 3% неизвестного соединения, содержащего С и не дающего положительной реакции с нингидрином. [c.208]

С этиловым эфиром глицина при кратковременном нагревании в воде нингидрин дает темно-фиолетовое окращивание (нингидринная реакция). [c.297]

Наиболее общим методом определения концентрации пептидов является колориметрия продуктов реакции с нингидрином [2]. Это один из наиболее чувствительных колориметрических методов. Для обнаружения аминокислот и пептидов разработаны как обычный, так и полностью автоматизированный варианты, причем нингидриновый реагент не вызывает коррозии и его можно подавать обычным микронасосом. Реакция идет по свободным аминогруппам, но в некоторых случаях хромофор образуется с низким выходом. Данные по окрашиванию дипептидов можно найти в работе [3]. У всех дипептидов, содержащих в качестве Ы-концевой аминокислоты аргинин, треонин, серин, глутаминовую кислоту, глицин, фенилаланин, метионин, лейцин и тирозин, интенсивность окраски составляет 1,6-10 у лейцина эта величина составляет 1,7-10 . У дипептидов с М-концевым лизином и аспарагиновой кислотой интенсивность окраски несколько выше (на 20 и 29% соответственно), а дипептиды с Ы-концевым гистидином и триптофаном проявляются несколько слабее (42 и 67% соответственно от средней интенсивности). Дипептиды с М-концевым пролином, валином и изолейцином окрашиваются очень слабо [2,7 6,4 и 8,5% от средней (1,6- 10 ) интенсивности]. [c.391]

Эта интересная реакция, фактически представляющая собой процесс, обратный синтезу Штреккера, была подвергнута весьма тщательному исследованию Ван-Сляйком и его сотрудниками [194], которые нашли, что выделение ССЬ при действии нингидрина характерно только для а-аминокислот. В частности, М-ациламино-кислоты (и, следовательно, пептиды) вовсе не образуют СО2 . Таким образом, оказывается возможным определять аминокислоты в присутствии пептидов и белков (N-кар боксильный метод, см. стр. 169). Кроме того, образующийся в результате этой реакции альдегид является характерным для каждой аминокислоты, так как он отличается от последней только тем, что содержит на один атом углерода меньше. Специфическое определение такого альдегида служит средством определения соответствующей аминокислоты. Например, глицин и аланин в белковых гидролизатах могут быть определены по образующимся в результате реакции с нингидрином формальдегиду и уксусному альдегиду. [c.126]

Агарозу помещают на стеклянный фильтр и промывают сначала бидистиллированной водой, а затем 0,1 М На-фосфатным буфером, pH 7,4. К суспензии агарозы, количество которой эквивалентно 1 г сухого веса носителя, добавляют 1 мл раствора альдолазы, содержащего фермент в концентрации 1 мг/мл. Предварительно альдолазу обессоливают на колонке с сефадексом 0-50 в указанном буфере, содержащем 5 мМ ЭДТА. Инкубацию проводят 10 мин при комнатной температуре и постоянном осторожном перемешивании на магнитной мешалке. Добавляют глицин до конечной концентрации 70 мМ и инкубируют смесь в течение 2 ч при комнатной температуре и перемешивании. Агарозу промывают указанным буфером с ЭДТА до полного исчезновения в элюате глицина и белка. Отсутствие глицина контролируют по реакции с нингидрином (с. 131). Белок определяют по поглощению при 280 нм. Полученный препарат хранят в холодильнике. [c.390]

Дженкинсон и Тинслей [19] идентифицировали с помощью хроматографии на бумаге состав аминокислот, гидролизат которых был получен в ходе изучения аминокислот растительного происхождения, выделенных из компоста. Десять мл гидролизата, содержавшего приблизительно 1 мг связанного азота, запаривали досуха при пониженном давлении, растворяли в 5 мл воды и снова упаривали досуха. Остаток растворяли в 1,5 мл воды и центрифугировали. Осветвленную жидкость в количестве 0,04 мл наносили на бумагу Ватман № 1. Разделение проводили элюентом, предложенным Вольфом [20]. Хроматограмму проявляли, окуная лист в 0,2%-ный раствор нингидрина в ацетоне. Были идентифицированы следующие аминокислоты цистеиновая, аспарагиновая, глутаминовая, лизин, аргинин, глицин, гистидин, серии, аланин, тирозин, пролин, валин, треонин, изолейцин, лейцин и фенилаланин. Метионин не поддавался определению, поскольку его трудно было отделить от глицина в описанных системах растворителей. Метио-нин-5-оксид тоже не отделялся от валина. Хроматограммы опускали в 0,1%-ный раствор изатина в ацетоне для обнаружения про-лина и подтверждения отсутствия оксипролина. Детектирование и определение содержания пептида с остатком лизина в середине цепи проводили с помощью 2,4-динитрофторбензола [21]. Эта реакция протекает, поскольку е-аминогруппа, в отличие от а-амино-группы лизина, свободна и может вступать в реакцию. [c.306]

Аспарагин дает реакцию с нингидрином на хроматографической бумаге, но его идентификация затруднена в тех случаях, когда рядом с ним расположены аргинин, аспарагиновая кислота, глицин, серии или некоторые другие [c.270]

При анализе хроматограмм проб мочи было обнаружено 16 метаболитов на ионообменной колонке. Большинство радиоактивных материалов (74%) было распределено между пялью главными радиоактивными соединениями в элюате. Одно из них было определено как креатинин, и это указывает на превращение этилениминной половины молекулы третамина в двухуглеродные фрагменты. Основной метаболит давал положительную реакцию с нингидрином после обработки едким натром и, по-видимому, представлял собой сопряженный или алкилиро-ванный продукт аминокислоты или амина. У главных метаболитов в моче не было обнаружено никаких пиков поглощения в ультрафиолетовом свете, чем исключается их принадлежность к пуринам, пиримидинам или их производным. Глицин, этаноламин и аминоацетальдегид также исключались в качестве возможных метаболитов, и поэтому было решено, что большинство компонентов мочи являются нормальными алкилированными метаболитами [430]. [c.177]

Реакция с нингидрином [105]. К 1 мл испытуемой нейтральной жидкости приливают 1—2 капли раствора нТ1нгидрина (100 мг нингидрина в 100 мл воды) и нагревают до кипения. В зависимости от природы кислоты появляется иногда красноватая, пурпурнокрасная, но в большинстве случаев синяя окраска. Эту реакцию дают только те аминокислоты, в которых помимо свободной карбоксильной группы имеется и свободная аминогруппа соответственно с пирролидинкарбоновой кислотой и дикетопиперазином эта реакция не идет. Пролин и гидроксипролин дают л(елтую окраску. Чувствительность реакции очень велика, например для глицина 1 10000, для тирозина 1 5000. [c.168]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология