Ротавирус

Антиген капсида ротавируса обезьян Активатор тканевого плазминогена [c.145]

Ротавирус Острый гастроэнтерит новорожденных [c.229]

Электронно-микроскопическое выявление ЭМВ). Это исследование дает возможность в зависимости от вида вируса выявить в клетках отдельные вирионы и их кристаллоподобные скопления в ядре или цитоплазме. ЭМВ, как правило, используется для обнаружения возбудителей вирусных инфекций с типичной морфологией (оспенные вирусы), особенно в тех случаях, когда их не удается культивировать обычными методами (вирусы гепатитов А и В, ротавирусы). Вирусы, содержащиеся в исследуемом материале, очищают и концентрируют ультрацентрифугированием, колоночной хроматографией, адсорбцией с помощью специальных сорбентов или антител. Последний способ лежит в основе метода иммунной электронной микроскопии (ИЭМ). [c.267]

Если в материале содержится специфический антиген, он соединяется с сывороткой, адсорбированной на поверхности лунок, и, в свою очередь, связывает иммуноглобулины на поверхности эритроцитов. В результате происходит агрегация эритроцитов (гемагглютинация). В описанной модификации реакция применяется для выявления антигенов ротавирусов и других вирусов в фекалиях больных. [c.279]

В настоящее время установлено, что ротавирусы человека (семейство реовирусов) вызывают около 50 % гастроэнтеритов у детей в экономически развитых странах. Этиологическая роль этих вирусов установлена и при гастроэнтеритах животных. [c.300]

Широкое распространение имеет РСК с использованием в качестве антигена заранее отобранных суспензий фекалий больных гастроэнтеритом или ротавирусов животных. Применяют РТГА с антигеном ротавирусов животных, РИФ с культурой клеток, зараженных ротавирусами животных (обычно вирусом диареи телят Небраски), а также РИА и ИФА. [c.302]

Суперантигены — это особая группа антигенов, которые в очень малых дозах вызывают поликлональную активацию и пролиферацию большого числа Т-лимфоцитов. Суперантигенами являются бактериальные энтеротоксины, стафилококковые, холерные токсины, некоторые вирусы (ротавирусы). [c.56]

Определение ротавируса и специфических антител [c.273]

Заболевания молодняка крупного рогатого скота (к.р.с.), вызываемые ротавирусом, наносят значительный ущерб животноводству. Одной из мер борьбы является диагностика заболевания на ранних стадиях, для чего необходимы высокочувствительные методы детекции вируса. [c.273]

В основу этого раздела положены результаты работы по созданию ИФА ротавируса, обобщенные в методических рекомендациях Г. Ф. Коромыслов и др., 1984), утвержденных отделением ветеринарии ВАСХНИЛ. [c.273]

Культивирование и очистка ротавирусов [c.207]

В последние годы установлено, что ротавирусы являются главными этиологическими агентами острых вирусных гастроэнтеритов у детей и всех основных видов домашних животных [c.207]

Имеет смысл сделать несколько общих замечаний по поводу описанных методов. Хотя клетки МА 104 хорошо растут на обычной сыворотке крови крупного рогатого скота или на сыворотке новорожденных телят, в связи с повсеместным распространением ротавирусов и соответственно высоким уровнем антивирусных антител в коммерческих препаратах таких сывороток всю культуральную работу следует проводить только с эмбриональной сывороткой. Размножение ротавирусов и сопутствующее ЦПД наблюдается в присутствии 0,5 мкг/мл трипсина. Необходимо включать в каждый опыт контрольную незараженную культуру, чтобы убедиться в том, что наблюдаемое ЦПД не обусловлено действием трипсина на клетки. Для того чтобы свести к минимуму вариации в действии самого [c.210]

Наращивание и очистка ротавирусов для биохимических исследований [c.211]

На этой стадии обычно используют электрофорез в полиакриламидном геле очевидно, что конкретные условия электрофореза зависят от исследуемого вируса. Так, например, геном большинства ротавирусов удается фракционировать электрофорезом в пластине 6%-ного полиакриламидного геля раз- [c.216]

Рис. 11.1. Электронная микрофотография ротавируса

Вирионы ротавирусов можно охарактеризовать под трансмиссионным электронным микроскопом с увеличением от 30 000 до 50 000 (рис. 11.1). [c.306]

ИЭМ используют также для выявления в биологическом материале полиовирусов, цитомегаловирусов, вирусов гепатита А и В, некультивируемых аденовирусов в ткани миндалин, некультивируемых энтеро- и ротавирусов в фекалиях, вирусов оспы в оспенном детрите. [c.276]

Материалом для исследования служат испражнения больного. Ротавирус регулярно обнаруживается в фекалиях в течение первых 6 — 8 дней болезни. На 3 —5-й день после появления симптомов заболевания его количество бьшает максимальным и достигает 10 — 10" вирусных частиц в 1 г фекалий. [c.300]

Наиболее чувствительными методами обнаружения ротавирус-ного антигена являются РИА и ИФА. Для проведения ИФА в лунки полистироловых планшетов, обработанные противоротавирус-ными антителами, вносят по 50 мкл 2%-й суспензии фекалий, добавляют в каждую лунку по 25 мкл 2%-й телячьей эмбриональной сыворотки с 0,1%-м твином-20, инкубируют 1 ч при 37 С, затем трижды промывают лунки фосфатным буфером с твином-20 и вносят 100 мкл конъюгированной ферментом ротавирусной антисыворотки. После инкубации в течение 1 ч при 37 °С лунки промывают и добавляют хромогенный субстрат. Результаты реакции учитывают по интенсивности окраски субстрата. [c.301]

Все более широкое применение для экспресс-диагностики ротавирусных инфекций находят РОНГА и РГадсТО. Выделение ротавирусов из фекалий осложнено отсутствием чувствительных к ним клеточных культур и животных. [c.301]

Холера и группа крови О [1770]. Недавние обширные исследования холеры в Бангладеш убедительно показали сушествование связи между системой АВО и летально эндемичной инфекционной болезнью. Больные диареей, вызванной ротавирусом, шигеллой, токсикогенной Е. olt или [c.332]

Ротавирусный антиген, специфические антитела против ротавируса (АТ), конъюгат специфических антител с пероксидазой Ат-ПХ), антивидовые антитела против иммуноглобулинов быка, меченные пероксидазой (АтрПХ), положительные и отрицательные стандарты для выявления ротавируса и специфических антител, компоненты для приготовления субстратов на основе 5-АС (см. 1 этой главы), полистирольные планшеты, микропнпеткн, спектрофотометр. [c.273]

Количественное определение вируса или антител исследуемом материале проводят прн использовании калибровочных зависи-1стей оптической плотности продукта пероксндазной реакции от содержания руса или антител в положительных и отрицательных стандартных пробах. )н необходимости определения концентрации вирусных частиц в исследуемой обе положительный стандарт получают путем внесения известного количества ищенного вируса в материал (фекалии, фрагменты тонкого отдела кишечника) здоровых животных, не содержащий ротавируса. Этот же материал исполь-ется в качестве отрицательного стандарта. [c.274]

Вирус колорадской клещевой лихорадки Ротавирус крупного рогатого скота SA11 Wa [c.201]

Ротавирусы, поражающие различных животных, до недавнего времени не были адаптированы к размножению в культуре клеток. Все попытки адаптации клинических изолятов ротавирусов человека в течение нескольких лет оканчивались неудачей. Впервые ротавирус человека был адаптирован к размножению в культуре клеток Уайеттом и др. [8] после многократного пассирования на поросятах. Однако данный метод слишком сложен для рутинной работы. Одновременно несколькими группами японских исследователей [9—11], которые воспользовались описанным ранее явлением повышения инфекционности ротавирусов после обработки протеазами [12, 13], была разработана методика адаптации ротавирусов к размножению в культуре клеток, применимая ко всем вирусам этой группы. Методика состоит из двух основных этапов обработки вируса, используемого для заражения культуры, трипсином и проведения нескольких слепых пассажей без видимого ЦПД. Ниже приведен протокол, обеспечивающий высокую эффективность адаптации (50—80%). [c.209]

Чтобы избежать размножения смесей вирусов, коадапти-рующихся к росту в культуре, при первой возможности следует провести три цикла размножения вируса из одного инфекционного вириона. Оптимальный способ проведения таких циклов состоит в очистке вируса из индивидуальных бляшек однако некоторые изоляты, хотя и размножаются в клетках МА 104, но не образуют бляшек. В этих случаях очистку вируса проводят методом предельного разведения. Для этого готовят последовательные разведения первого пассажа вируса, дающего выраженное ЦПД, и заражают монослойные культуры клеток МА 104, выращенные в планшетах с 24 или 48 лунками. После 1 ч адсорбции при 37 °С инокулят удаляют, в лунки вносят среду МЕМ с 0,5 мкг/мл трипсина и инкубируют культуру 48—72 ч при 37°С. Собирают урожай из нескольких индивидуальных лунок, зараженных вирусом в том разведении, которое дает ЦПД лишь в небольшой части лунок (5—10%). Вирус из этих лунок разводят и опять высевают на культуру клеток, как описано выше. Данную процедуру следует повторить по крайней мере три раза, прежде чем наращивать вирус для биохимических исследований. Если изолят ротавируса дает бляшки на клетках МА 104, следует провести три цикла размножения из индивидуальных бляшек, что является лучшим методом очистки вируса перед наращиванием для дальнейшей работы. [c.210]

Несмотря на разработку описанного выше эффективного метода адаптации ротавирусов к размножению в культуре клеток, лишь немногие вирусные изоляты размножаются достаточно эффективно, чтобы обеспечить возможность стандартной наработки больших количеств вируса для многих биохимических исследований (из таких изолятов наиболее детально изучены вирус SA11 [14] и адаптированные к размножению в культуре клеток английские изоляты ротавирусов крупного рогатого скота [15]). Последние вирусы лучше всего размножаются в культуре эпителиоидных клеток африканской зеленой мартышки BS -1 размножение вируса в большом масштабе удобно проводить в 20 роллерных флаконах объемом 80 унций на плотном монослое данной культуры. [c.211]

Осадок ресуспендируют в небольшом объеме (20—30 мл) буфера для суспендирования вируса (50 мМ трис-НС1, pH 8,0, 10 мМ Na l, 1,5 мМ 2-меркаптоэтанол, 3 мМ СаС ). На этой стадии суспензию вируса можно хранить при —70°С или немедленно использовать для очистки. Очистку проводят по схеме, разработанной для реовируса, с тем исключением, что, как правило, в случае ротавирусов достаточно двух экстракций фреоновой фазы. Конечный выход вируса заметно варьирует, но в среднем сотавляет 200—500 мкг очищенного вируса из одного флакона объемом 80 унций. [c.212]

При изучении других днРНК-содержащих вирусов на этом этапе могут использоваться различные приемы. Так, например, для активации транскриптазы ротавирусов достаточно 20 мин инкубации в присутствии 3 мМ ЭДТА перед осаждением в описанном выше режиме. В то же время для вируса цитоплазматического полиэдроза, как не имеющего внешнего капсида, активация вообще не нужна. [c.213]

Острая Выздоровление и злиминация вируса Вирус гриппа, ротавирус [c.307]

За исключением вируса коровьей оспы, ни один полностью нативный (циркулирующий в природе) микроорганизм не служил когда-либо для приготовления используемых на практике вакцин. Однако известны испытания бычьего и обезьяньего ротавирусов в качестве вакцин для детей. Одно время внимание исследователей привлекала иммунизация микобактериями -возбудителями мышиного туберкулеза, как средство противотуберкулезной защиты. На Ближнем и Среднем Востоке, а также в России для создания иммунитета к кожному лейшманиозу делают прививки живой культуры Leishmania tropi a major, выделенной от больного с легким течением болезни. Вполне вероятно, что в будущем будет получена еще одна хорошая гетерологичная (как у Дженнера) вакцина, но при этом возможны серьезные проблемы, связанные с требованием безвредности. [c.362]

В стадии экспериментальной разработки находится еще ряд вирусных и бактериальных вакцин, например, на основе обезвреженного холерного токсина, аттенуированных штаммов шигелл, детских штаммов ротавирусов и поверхностного гликопротеина вируса Эпштейна—Барр. [c.371]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология