Жидкостная хроматография высокой эффективности

В качестве неподвижной фазы (НФ) применяются мелкопористые инертные носители, покрытые пленкой различных полимеров, нерастворимых в органических растворителях . Заполнение колонок (их диаметр 0,5—50 мм) неподвижной фазой проводят под давлением в 150—300 атм, благодаря чему добиваются высокой однородности и плотности заполнения и, следовательно, эффективности разделения. Элюирование разделяемых веществ осуществляется пропусканием через колонку какого-либо подходящего органического растворителя или их смеси под давлением в 50—200 атм. При этом режим термостатирования и состав элюирующей смеси могут изменяться в ходе анализа в соответствии с заданной программой. Для непрерывного определения состава выходящей из колонки смеси применяются детекторы, реагирующие на изменение показателя преломления (интерферометры), теплоты адсорбции, ультрафиолетового поглощения, сигнал которых регистрируется автоматическим потенциометром. Метод жидкостной хроматографии высокого давления [c.135]

Жидкостная хроматография высокой эффективности Ж ВЭ) — это жидкостно-твердая хроматография, которая проводится при давлениях от низкого до среднего, например при давлении порядка 35 кГ/см 3,5-10 дин/см (СГС) 3,5-10 Па (СИ). [c.29]

Разделение фуллеренов, входящих в состав экстрактов, основано на идеях жидкостной хроматографии. Экстракт фуллеренов, растворенный в одном из органических растворителей, пропускается через сорбент с высокими сорбционными характеристиками [1]. Фуллерены сорбируются этим материалом, а затем экстрагируются из него с помощью чистого растворителя. Эффективность экстракции определяется сочетанием сорбент-фуллерен-растворитель и обычно при использовании определенного сорбента и растворителя заметно зависит от типа фуллерена [11]. Жидкостная хроматография высокого давления позволяет не только отделить С60 от С70 [6], но и накопить высшие фуллерены С76, С84, С90 и С94. [c.38]

На развитие подхода к выбору состава композиций ПАВ большое влияние оказали также работы Хила и Рида, показавшие взаимосвязь фазового поведения системы ПАВ — нефть — вода и эффективности вытеснения нефти [38]. Исследования были направлены на получение корреляционных зависимостей, связывающих условия получения систем с оптимальным фазовым поведением, с природой ПАВ, спиртов, солей и углеводородов. В работе [96] рассматриваются корреляционные зависимости для ряда очищенных ПАВ, относящихся к нефтяным и синтетическим сульфонатам и окси-этилированным ал кил фенолам. Рассматривая смеси АПАВ и НПАВ, авторы отмечают, что такие смеси не подчиняются правилам линейной корреляции параметров и мольных полей каждого ПАВ и смеси. Отмечено, что смеси АПАВ и НПАВ проявляют сложное фазовое поведение, так как эти ПАВ в смесях ведут себя не как единое целое, а как самостоятельные компоненты. Несмотря на трудности в описании фазового поведения смесей АПАВ и НПАВ, авторы отмечают, что такие смеси должны иметь преимущества перед АПАВ, проявляющиеся в большей устойчивости при повышенной минерализации и меньшем влиянии температуры на фазовое поведение таких смесей, так как с повышением температуры растворимость АПАВ повышается, а НПАВ понижается. В работе [95] с помощью метода жидкостной хроматографии высокого давления было изучено распределение между фазами (водной, углеводородной и мицеллярной) ПАВ разных классов. Авторы пришли к следующим выводам [c.105]

Многие органические соединения с большой молекулярной массой, особенно биополимеры, перевести в газовую фазу затруднительно или вообще невозможно. Удовлетворительного разделения смесей таких соединений с помощью обычной, жидкостной распределительной хроматографии получить не удается из-за неоднородности неподвижной фазы и неламинарного характера движения подвижной фазы, связанных с большим диаметром колонок. Для разделения таких соединений применяется жидкостная хроматография высокого давления (молекулярная жидкостная хроматография). Она представляет собой дальнейшее развитие колоночной распределительной хроматографии и в отличие от последней позволяет проводить разделение микроколичеств веществ с высокой степенью эффективности в течение короткого времени. [c.135]

Применение гель-фильтрационных приемов позволило обнаружить порфирины повышенной молекулярной массы, что было интерпретировано как существование димеров [80]. Основная масса порфиринов нефти незначительно различается по времени выхода и не может быть эффективно фракционирована этим методом. Можно констатировать, что до появления работ по разделению ванадилпорфиринов тонкослойной хроматографией [,61] и исследований по применению жидкостной хроматографии высокого давления [77, 89] удовлетворительных методов разделения нефтяных металлопорфиринов не существовало. [c.324]

В связи с развитием скоростной жидкостной хроматографии высокого давления в последние годы интенсивно разрабатывали способы заполнения колонок сорбентом с частицами, диаметр которых меньше 20 мкм. Наиболее эффективными оказались следующие методы. [c.86]

Благодаря внедрению новой техники, основанной на использовании сдвоенных колонок, а также совершенствованию приборного обеспечения, сверхкритическая флюидная хроматография (СФХ) переходит сейчас в разряд рутинных методов анализа, обладающих существенными преимуществами перед традиционной жидкостной хроматографией высокого давления в плане эффективности разделения и экспрессности. Более того, этот [c.148]

Многие органические соединения большой молекулярной массы, особенно биополимеры, перевести в газовую фазу затруднительно или вообще невозможно. Для разделения таких соединений в настоящее время начала широко применяться жидкостная хроматография высокого давления (молекулярная жидкостная хроматография). Она представляет собой дальнейшее развитие колоночной распределительной хроматографии. И в отличие от последней обладает теми преимуществами, что позволяет проводить разделение микроколичеств веществ с высокой степенью эффективности в течение короткого времени. [c.108]

В разд. 24-2 показано, что скорость потока в оптимуме на кривой зависимости высоты тарелки от скорости подвижной фазы сильно зависит от диаметра частиц, и в связи с низкими коэффициентами диффузии в жидкостях оптимальная скорость потока невелика. В последнее время размеры частиц снижаются до 10— 15 мкм при диаметре 0,1 —1,0 см и длине колонки 0,1—0,5 м. При малом диаметре колонки достижимы значительные увеличения скорости потока, что приводит к сокращению времени без потери эффективности разделения [пятый член уравнения (24-14)]. При умеренной длине колонки необходимы высокие давления на входе (от 20 до 300 атм). Наблюдается значительный прогресс в развитии приборов, методик и систем детектирования [54,55] для хроматографии с высоким разрешением при высоких давлениях и скоростях. При продолжительности разделений от нескольких минут до одного часа достигается число теоретических тарелок от 1000 до 10 000, что сравнимо с параметрами газохроматографического разделения. При диаметре частиц силикагеля 20—30 мкм и 5—10 мкм и скоростях потока 0,1 см/с [56] и 1,2 см/с [57] получены высоты теоретической тарелки порядка долей миллиметра. В жидкостной хроматографии высокого давления носитель для стационарной фазы должен быть достаточно жестким, чтобы его размеры существенно не менялись при высоком давлении. Этому требованию удовлетворяют пористые стеклянные шарики. Опубликован сборник статей, посвященных актуальным вопросам жидкостной хроматографии [58]. [c.546]

Благодаря внедрению новой техники, основанной на использовании сдвоенных колонок, а также совершенствованию приборного обеспечения, сверхкритическая хроматография (СКХ) переходит сейчас в разряд рутинных методов анализа, обладающих существенными преимуществами перед традиционной жидкостной хроматографией высокого давления в плане эффективности разделения и экспрессности. Более того, это метод не требует применения экзотических детекторов разделяемые компоненты можно регистрировать с помощью таких стандартных детекторов для газовой хроматографии, как ТИД и ЭЗД. [c.220]

Одним из наиболее эффективных методов очистки синтетических красителей является ТСХ (см. гл. 2). Поскольку для масс-спектрометрии требуются очень небольщие образцы, методом ТСХ можно получить их соверщенно чистыми без лишнего труда и затрат. В большинстве случаев ТСХ предпочтительнее классической колоночной хроматографии, поскольку обычно первая быстрее и дает лучшее разделение. Иногда применима жидкостная хроматография высокого давления (см. гл. 4). Удобно, что синтетические красители дают зоны, которые не нужно специально делать видимыми методами, могущими изменить образец. Соскабливая соответствующую зону и экстрагируя краситель, находящийся на сорбенте, получают чистый образец. [c.256]

Применение хроматографических методов (бумажная, тонкослойная, газожидкостная и жидкостная хроматография высокого давления), отличающихся высокой эффективностью разделения и надежностью идентификации, как и в других областях структурного анализа, например протеинов, полисахаридов и липидов [1], обычно дает очень хорошие результаты. Хроматографические методы определения продуктов химической деструкции красителей позволяют иметь дело с микро- или даже ультрамикроколичествами анализируемых соединений и значительно упрощают и ускоряют всю экспериментальную работу. Успешный результат анализа зависит от следующих факторов. [c.295]

В 60-х годах в связи с разработкой новых методов детектирования и аппаратуры началось интенсивное развитие жидкостной хроматографии, которая свободна от указанных выше недостатков, и в настоящее время жидкостная хроматография становится эффективным высокоскоростным методом анализа органических соединений, завоевывающим все большую популярность. Однако потенциальные возможности анализа веществ с высоким молекулярным весом и лабильных соединений с помощью флюидной хроматографии несомненны. [c.130]

Однако несмотря на высокую эффективность н-алканов при-обезмасливании петролатумов высокая стоимость делает их применение на промышленных установках маловероятным. В связи с этим в качестве модификаторов структуры твердых углеводородов при обезмасливании петролатумов были исследованы фракции, выделенные из мягкого и твердого парафинов холодным фракционированием и комплексообразованием с карбамидом, которые, по данным газо-жидкостной хроматографии и масс-спектрометрического анализа, содержали 35—40% (масс.) н-алканов С20— 2 Применение таких фракций в процессе обезмасливания петролатума показало (рис. 72), что скорость фильтрования суспензии петролатума увеличивается при более высоких их концентрациях, чем при введении индивидуальных н-алканов. Полученные при этом церезины характеризуются более высокой температурой плавления (рис. 73) и меньшим содержанием масла. [c.185]

Существует неправильная практика использовать как взаимозаменяемые термины названия жидкостная хроматография высокой эффективности (ЖХВЭ) и жидкостная хроматография при высоких давлениях (ЖХВД). [c.29]

Классическую жидкостную колоночную хроматографию при низких давлениях и неоднородных сорбентах используют в основном для предварительного разделения. В подавляющем большинстве случаев применяют жидкостную хроматографию высокой эффективности (ВЭЖХ) с высокими давлениями, обусловливающими высокие скорости разделения, и сорбентами высокой степени однородности. [c.225]

Большую роль в повышении эффективности фракционирования слоншых смесей сыграло создание жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД). Высокая скорость разделения, возмож ность реализации любого из отмеченных выше механизмов сорбции, применимость для разделения любых растворимых в элюенте соединений, независимо от их молекулярной массы, возможность непрерывного контроля элюирования с помош ью высокочувствительных детекторов, управления процессом разделения путем программирования температуры, скорости потока и состава элю-ента, автоматическая регистрация результатов обеспетали широчайшее распространение ШХВД для решения препаративных задач, количественного анализа и идентификации компонентов анализируемых смесей [109, 111, 122 и др.]. [c.17]

Современная высокоэффективная жидкостная хроматография. ВЭЖХ (жидкостная хроматография высокого давления, скоростная жидкостная хроматография) начала развиваться в начале 70-х годов. Разработка нового метода обусловливалась, во-первых, необходимостью анализа высококипящих (>400 °С) или неустойчивых соединений, которые не разделяются методом газовой хроматографии, во-вторых, необходимостью увеличить скорость разделения и повысить эффективность метода колоночной жидкостной хроматографии. Для этого применили колонки с малым внутренним диаметром (2—6 мм) для ускорения массообмена уменьшили диаметр частпц сорбента (5— 50 мкм), что, в свою очередь, привело к необходимости увеличить давление на входе колонки до 0,5—40 МПа. Выпускаемые промышленностью жидкостные хроматографы снабжены высокочувствительными детекторами, позволяюш,ими определять до 10 —10" ° г вещества. Достаточно высокая скорость анализа, низкий предел обнаружения, высокая эффективность колонки, возможность определять любые вещества (кроме газов) привели к быстрому развитию ВЭЖХ. [c.203]

Выделение. Одии из первых этапов выделения Б,-получение соответствующих органелл (рибосом, митохондрий, ядер, цитоплазматич. мембраны) с помощью дифференциального центрифугирования. Далее Ь переводят в растворимое состояние путем экстракции буферными р-рами солей и детергентов, иногда-неполярными р-рителями. Затем применяют фракционное осаждение неорг. солями [обычно (N 14)2804], этанолом, ацетоном или путем изменения pH, ионной силы, т-ры. Для предотвращения денатурации работу проводят при пониж. т-ре (ок. 4°С) с целью исключения протеолиза используют ингибиторы протеаз, нек-рые Б. стабилизируют полиоламн, иапр. глицерином. Дальнейшую очистку проводят по схемам, специально разработанным для отдельных Б. илн группы гомологичных Б. Наиб, распространенные методы разделения-гель-про-никающая хроматография, ионообменная и адсорбц. хроматография эффективные методы-жидкостная хроматография высокого разрешения и аффинная хроматография. [c.250]

Коллега профессора Вудварда и его сотрудник, продолжатель этих исследований профессор Альберт Эшенмозер из Технической высшей школы в Цюрихе (Швейцария) дал следующую оценку возможностям препаративной ЖХ на основе ее использования в работах по синтезу витамина В г ...Существующие трудности имели не принципиальный, а скорее экспериментальный характер. Эти трудности были успешно преодолены с помощью жидкостной хроматографии высокого давления, которая появилась как раз в нужный момент и продемонстрировала, вероятно впервые, эффективность этого нового метода разделения в органическом синтезе [6]. Действительно, вслед за первыми сообщениями Вудварда и Эшенмозера об успешном использовании современной техники препаративной ЖХ многие исследователи стали применять этот мощный метод быстрого выделения очищенных материалов для их получения и различного дальнейшего использования. В современной литературе имеется ряд обзоров по теории, материалам и методам ЖХ 7—38]. В этой главе мы обсудим пути эффективного использования ЖХ для выделения, обогащения и очистки компонентов интересующих образцов. [c.10]

Газо-жидкостной хроматограф. Поток, вытекающий из капиллярной колонки газо-жидкостного хроматографа (элюат), состоит из газа-носителя (обычно геяия) и паров разделяемых веществ. Элюат можно непосредственно вводить в ионный источник масс-спектрометра, поскольку скорость тока газа-носителя в таких колонках сравнительно невелика (1-2 см мин Ъ и связанный с ионным источником вакуумный насос успевает откачивать его, так что давление в ионном источнике возрастает только в допустимых пределах. Если учесть свойственную газо-жидкостной хроматографии высокую разрешающую способность, то в сочетании с масс-спектрометрией она, очевидно, является одним из наиболее эффективных методов исследования небольших количеств сложных смесей. [c.177]

Эта книга вышла в свет в период, когда многие исследователи-аналитики рассматривали тонкослойную хроматографию (ТСХ) как один из второстепенных методов. Другая довольно многочисленная группа ученых занималась проблемами высокоэффективной жидкостной колоночной хроматографии (ВЭЖКХ), называемой иногда не совсем правильно жидкостной хроматографией высокого давления. В этом методе колонки для разделения редко используются при оптимальных условиях. Они характеризуются эффективностью, значительно превышающей 1000 теоретических тарелок. Применение ВЭКЖХ подчас ограничено необратимой адсорбцией компонентов анализируемых смесей. Большинство недостатков этого метода можно устранить с помощью ТСХ. [c.9]

Разрешение как параметр, характеризующий разделение пиков, увеличивается по мере возрастания селективности, отражаемой ростом числителя, и роста эффективности, отражаемой снижением значения знаменателя из-за уменьшения ширины пиков. Поэтому быстрый прогресс жидкостной хроматографии привел к изменению понятия жидкостная хроматография высокого давления — оно было заменено на жидкостную хроматографию высокого разрешения (при этом сокращенная запись термина на английском языке сохранилась НРЬС как наиболее правильно характеризующее направление развития современной жидкостной хроматографии). Сокращение, принятое в отечественной литературе, — ВЭЖХ, расшифровываемое как высокоэффектиная жидкостная хроматография , для современной жидкостной хроматографии несколько менее удачно, так как не учитывается важнейший фактор разделения — селективность. [c.10]

В опубликованном нами сообщении [1] было показано, что использование широкопористого стекла с порами радиусом около 1000 А в качестве носителя для газо-жидкостной хроматографии обеспечивает эффективность разделения более высокую, нежели стерхамол и инзеп-ский кирпич. Полученные результаты указывали па целесообразность изыскания оптимальных структур однородно-широкопористых стекол, обеспечивающих максимальную эффективность работы колонок. Следует отметить, что несмотря па наличие основных сведений о процессе приготовления широкопористого стекла, полученные нами данные свидетельствуют о трудностях, могущих иметь место при получении одпородно-ши-рокопористых стекол с порами радиусом менее 1000 А. Так, в некоторых из наших опытов были использованы образцы натриевоборосиликатного стекла ДВ-1, прошедшие термическую обработку различной длительности при 650 и 670°С и подвергнутые затем различной химической обработке. Полученные образцы широкопористого стекла испытывались методом газо-адсорбционной и газо-жидкостной хроматографии. [c.227]

Современные жидкостные хроматографы весьма существенно отличаются от оборудования, используемого в классической жидкостной колоночной хроматографии, высокой эффективностью разделения, степенью автоматизации и широкими возможностями влиять на процесс разделения путем изменения его отдельных параметров [1-7]. Мы ограничимся рассмотрением блокч хемы хроматографа для жидкостной хроматографии, позволяющего реализовать различные принципы разделения. Принципиальная схема простого жидкостного хроматографа изображена на рис. 2. Основной частью хроматографа является колонка 8, которая определяет эффективность хроматографического разделения. Однако и другие узлы хроматографа вносят существенный вклад в конечный результат. Резервуар дпя подвижной фазы 1 должен иметь достаточную дая проведения анализа вместимость и устройство для дегазации растворителя, чтобы исключить образование в колонке и детекторе пузырьков растворенных в элюенте [c.9]

Разделение веш,еств с целью их анализа осуществляется многоактными, чаще всего хроматографическими методами. До 70-х годов уникальные аналитические возмончности открывали преимущественно газохроматографические методы, позволявшие в течение минут или десятков минут разделить и анализировать смеси очень близких по свойствам веществ. Методьгжидкостной хроматографии, например аминокислотный анализ на ионитах, существенно отставали но эффективности в связи с малой скоростью приближения к межфазному равновесию и кинетическим размыванием зон веществ. Совершенно новые возможности открылись после разработки хроматографических процессов, позволяющих использовать микронные зерна сорбентов в установках высокого давления. Современные высокоэффективные процессы жидкостной хроматографии высокого давления не уступают по разделяющей способности и скорости выполнения операции процессам газоя идкост-ной хроматографии. Имеются значительные успехи в аналитиче- [c.9]

Исключительно большое значение имеет кинетика ионного обмена и молекулярной адсорбции на сферических зернах сорбентов в высокоэффективной жидкостной хроматографии, создание и использование которой позволило аналитическую жидкостную хроматографию приблизить по эффективности к газожидкостной хроматографии, т. е. осуществить динамический, хроматографический процесс в гетерогенных системах, когда жидкостная диффузия не вносит дополнительного размывания границ по сравнению с газовой диффузией, а скорость установления равновесия сравнима. Более того, продольное перемешивание при газожидкостной хроматографии может привести к тому, что высокоэффективная жидкостная хроматография (высокого давления) в отдельных случаях окажется более эффективной, чем газожидкостная. Несмотря на ранее проведенное рассмотрение проблемы, здесь уместно еще раз подчеркнуть, что современная высокомасштабная препаративная жидкостная и прежде всего ионообменная хроматография разви- [c.117]

Жидко-жидкостная хроматография, называемая также распределительной хроматографией, получила признание как эффективный метод высокоразрешимого разделения с 1941 г., т. е. с того момента, когда она была предложена Мартином и Сингом [1]. Однако для аналитических целей этот метод применяется реже, чем новейшие методы газовой или тонкослойной хроматографии. В последнее время, после того, как была усовершенствована методика изготовления колонок и разработана лучшая аппаратура, интерес к этому методу возродился. Теоретические разработки, создание специализированных насадок, чувствительных детекторов, воспроизводимых насосных систем —все это делает высокоскоростную жидко-жидкостную хроматографию высокого давления практическим методом разделения. [c.123]

Газо-жидкостная хроматография (ГЖХ)—эффективный метод изучения термодинамики разбавленных растворов Начало интенсивному применению хроматографии в этой области положила работа Литтлвуда, Филлипса и Прайса в которой была введена в обиход величина удельного удерживаемого объема. Затем работы Портера и др. и последующие исследования подтвердили правильность определяшых по величинам удерживания констант равновесия газ—раствор. Применение метода быстро расширялось и углублялось исследовались растворы в летучих жидкостях 2 -й в воде 22. 23 изучались неидеальности смесей газов их взаимодействия с поверхностью жвдкости >25, изотопические эффекты в термодинамических свойствах эффекты конечных концентраций 2 . 28 высоких давлений29. и др. Основные результаты работ в этой области суммированы в обзорах зг [c.122]

В жидкостной хроматографии высокого давления элюент подают в колонку с помощью насосов. Пульсации при работе насосов могут вызвать ложный сигнал детектора и ухудшить эффективность разделения колонки. Влияние пульсаций можно свести к минимуму, включив в с з1ему большие демпферные сосуды. Джентофт и Гоу [19] описывают систему, в которой элюент подается без пульсаций под высоким давлением. [c.552]

Одной из ее модификаций является хроматография, основанная на гидрофобном взаимодействии носителя (фенил- или октилсефароза) с соответствующими неполярными аминокислотными радикалами белковых молекул. Применение эффективных сорбентов (различные производные силикагеля) и высокого давления при элюировании с них белков привело к возникновению ряда вариантов жидкостной хроматографии высокого разрешения. [c.30]

Обогащение смеси нужными фрагментами. Для эффективного разделения сложных смесей фрагментов используют два метода электрофорез в полужидкой среде (разд. 4.2.г рис. 4.10) и жидкостную хроматографию высокого разрешения с обращенной фазой. Однако ни один из этих методов не позволяет получить фрагменты в чистом виде. Обьгчно препараты содержат примеси других фрагментов, имеющих близкую длину или обладающих такой же способностью к элюции. Тем не менее можно получить значительное обогащение смеси в отношении нужного фрагмента, что облегчает его выявление в большой коллекции клонов. [c.277]

Для разделительной снособностн колонки большое значение имеет размер пор твердого носителя. Носители с порами диаметром от 0,5-10 до 1,5-10" мм наиболее пригодны для газо-жидкостной хроматографии. При нанесении жидкости на такие носители большая ее часть попадает в поры и лишь тонкая пленка покрывает остальную поверхность. Прн этом достигается высокая эффективность разделения. При размерах пор более 1,5мм эффективность разделения уменьп1ается вследствие заполнения крупных пор жидкостью. Эти места поверхности обладают меньшим отношением поверхности к объему, чем тонкие поры, поэтому растворяющееся вещество задерживается в жидкости, что вызывает дополнительное размывание. [c.180]

В то же время капиллярная хроматография обладает рядом недостатков. К наиболее значительным относятся следующие малые значения коэффициента селективности для слабо сорбирующихся веществ могут свести на нет преимущества высокой эффективности малые значения коэффициентов Генри ограничивают возможности обогащения капиллярная хроматография требует решения более трудных технических задач, чем газо-жидкостная хроматография с насадочными колонками, особенно возникающих при дозировке и детектировании. [c.203]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология