Гетерогенность антител

Главной чертой иммунохимических реакций является высокая специфичность, однако необходимо подчеркнуть, что структурное сходство некоторых белков, а также гетерогенность антител, иногда свойственная сывороткам, при определенных условиях становятся причиной так называемых перекрестных реакций. Это означает, что реакция преципитации может в определенной степени зависеть от неспецифических факторов. Однако последнее обстоятельство лишь незначительно ограничивает использование иммунохимических реакций в изучении белков. [c.16]

Во-первых, гетерогенностью антител по физико-химическим свойствам, в том числе по сродству к антигену. Во-вторых, сложностью определения общего количества антител, а также отдельных фракций. В-третьих, в случае поливалентных антигенов возможностью образования комплексов сложного состава, в том числе циклической структуры, в которых проявляется кооператив-ность Взаимодействия активных центров антител. Все это не позволяет применить традиционные методы для расчета истинных значений констант связывания. Более надежные данные могут быть получены для моноклональных антител и их РаЬ-фрагментов, так как в этом случае могут быть выделены индивидуальные антитела в гомогенном виде. [c.41]

Установление характера влияния аффинности может осложняться гетерогенностью антител. Для того чтобы учесть влияние гетерогенности, уравнение (1) модифицируют следующим образом (Lew, 1984) [c.233]

Кросс-реакции, как правило, связаны с присутствием в анализируемой системе фрагментов лигандов, их предшественников и т.п. Проблема кросс-реактивности часто возникает при использовании сывороточных антител, так как сыворотка представляет собой набор гетерогенных антител. [c.436]

Как же могут синтезироваться специфические антитела до появления антигенов Гетерогенность антител и трудности анализа смеси их молекул на протяжении многих лет служили препятствием к изучению этой проблемы. Выйти из этого положения удалось путем использования такого объекта исследования, множественная миелома - злокачественное перерождение клеток, продуцирующих антитела. При этом виде рака происходит перерождение одного лимфоцита или плазматической клетки, что ведет к неконтролируемому клеточному делению. Следовательно, в этом случае образуется большое число клеток одного типа. Они составляют клон, т.е. происходят от одной [c.240]

Получение моноклональных антител (МкАТ). Вводимый или попадающий в организм антиген признается и перерабатывается макрофагами, затем антигенная информация представляется лимфоцитам, содержащим рецепторы. Так, в частности, стимулируется формирование клонов плазматических клеток, продуцирующих специфичные антитела. Качество и количество антител зависят от качества и дозы антигена, способа его введения в организм, от вида животного — реципиента. Однако при традиционной технологии удается получать преимущественно гетерогенные антитела. В то же время "жизнь диктовала" необходимость получения моноклональных антител — продуктов единого клона клеток. Важным шагом к этому было открытие Портера в 1972 г., связанное с установлением "антительной природы" парапротеинов в сыворотке крови людей и животных с опухолевым поражением лимфатической системы (миелома). Миеломные клетки представляют собой трансформантов плазматической клетки, продуцирующих моноклональные антитела. К сожалению, антиген при этом до сих пор остается неустановленным. Тем не менее, факт образования моноклональных антител миеломными клетками был решающим в создании гибридом, с помощью которых сделан огромный скачок в иммунобиотехнологии. Выдающийся вклад в это внесли Г. Келер и К. Милстейн (1975), разработавшие метод получения МкАТ желаемой специфичности и в большом количестве. [c.570]

Недавно стало известно, что молекулы антител в любой данной антисыворотке гетерогенны (см. [3]). Эта гетерогенность проявляется наряду с другими признаками в различной силе специфического сродства антител [5, 13,18]. Это означает, что величины для реакции антител в антисыворотке будут различными для различных антител соединение антигена или гаптена с одними антителами будет прочнее, чем с другими. Именно гетерогенностью антител объясняется, например, то, что отношение между г/с и г (где г — среднее число молекул гаптена, связанных одной молекулой антитела, ас — концентрация сво-бодйого гаптена) не имеет линейного характера [c.176]

Все перечисленные выше факторы влияют на гетерогенность антител и обусловливают определенные трудности как в изучении их структуры, так и в получении воспроизводимых стандартных препаратов антисывороток. Работы Келера и Мильштейна (Kohler G. and Milstein С., 1975) по гибридизации животных клеток открыли принципиально новый путь получения антител. Сущность метода [c.11]

Xenopus tropi alis 20 хромосом, масса 5—15 г, животные, как правило, слабые и их трудно сохранять после метаморфоза. Имеются в продаже (Xenopus I, Англия). Характеризуется чрезвычайно низкой гетерогенностью антител [6 полос при изоэлектрофокусировании (ИЭФ) антител против динитрофенола (ДНФ) у одного животного]. [c.474]

Описанный метод не очень чувствителен, но дает полезную информацию о гетерогенности антител. С его помощью выявляют в основном IgY-антитела. Использование дополнительных, вызывающих лизис антисывороток не обязательно, поскольку IgY Xenopus фиксируют комплемент морской свинки. [c.502]

Нужная концентрация антител определяется тремя независимыми критериями. Во-первых, она должна быть по крайней мере в 10 рдз ниже концентрации эпитопов, чтобы обеспечить условия, далекие от насыщения эпитопов даже при более чем 90%-ном связывании антител. Во-вторых, самая низкая концентрация свободных антител должна еще находиться в пределах чувствительности метода. В-третьих, метод определения антител должен з итывать только их количество, а не суммарный эффекг количества и качества. Соответствие третьему критерию абсолютно необходимо для достоверности результатов, поскольку при гетерогенности антител фильтрат всегда будет иметь более низкую среднюю аффинность, чем исходная их популяция. Наиболее чувствительные методы, такие, как нейтрализация бактериофагов через конъюгированные с ними антигены или обычные ра-диоиммунологические методы, не удовлетворяют этому требованию и дают систематические ошибки, завышая аффинности и занижая концентрации реагентов. Третий критерий, разумеется, не относится к равновесию моноклональных антител, для измерения которых лучшим из одинаково точных методов будет тот, который наиболее чувствителен. [c.36]

После иммунизации, даже монодетерминантным антигеном, в пуле иммуноглобулинов, синтезируемых совокупностью клеток, содержатся антитела, различающиеся между собой, т. е. сыворотки содержат поликлональные антитела. Эта гетерогенность антител обусловлена тем, что каждый плазмоцит вырабатывает только один тип, вид, класс, подкласс антител. Следовательно, каждая клетка или ее потомство, клон вырабатывают свой тип антител, получивших название моноклональных. Принципиально моноклональные антитела можно получить искусственно, культивируя каждую антителопродуцирующую клетку, т. е. получая моноклональную культуру клеток. Однако практически это трудно осуществимо. Поэтому гибридную клетку получают путем слияния иммунного антителопродуцирующего В-лимфоцита, т. е. лимфоцита, взятого от иммунного животного и раковой миеломной клетки. Такая гибридома приобретает свойства ро- [c.156]

Теория Ф. Бернета объясняет многие иммунологические реакции (антителообразование, гетерогенность антител, толерантность, иммунологическую память), однако не объясняет предсуществования клонов лимфоцитов, способных отвечать на разнообразные антигены. По Ф. Бернету, существует около 10 ООО таких клонов. Однако мир антигенов намного больше и организм способен отвечать на любой из них. На эти вопросы теория не отвечает. Некоторую ясность в это представление внес американский ученый С. Тонегава, который в 1988 г. обосновал с генетической точки зрения возможность образования специфических иммуноглобулинов практически ко всем мыслимым антигенам. Эта теория исходит из того, что в организме человека и животных происходит перетасовка генов, в результате чего образуются миллионы новых генов. Этот процесс сопровождается интенсивным мутационным процессом. Отсюда из V- и С-генов, генов Н- и L-цепей может возникнуть офомное число генов, кодирующих разнообразные по специфичности иммуноглобулины, т.е. практически специфичные к любому антигену. [c.172]

Гетерогенность антител с данной специфичностью определяется самой природой иммунного ответа. В чем причина гетерогенности Оказалось, что антитела, продуцируемые одной клеткой, юмогенны. Однако различные клетки образуют разные по структуре антитела. Антитела против ДНФ синтезируются большим количеством различных клеток, что и обусловливает их гетерогенность. [c.237]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология