Морская комплемент

Антикомплементарная РИФ предполагает применение меченых АТ против комплемента морской свинки. Используется в тех случаях, когда комплекс АГ-АТ способен фиксировать комплемент (используется комплемент морской свинки). Добавление к такой системе антикомплементарной меченой сыворотки позволяет вы- [c.75]

Так, снижение уровня компонента комплемента Сз до почти не определяемого уровня под действием фактора яда кобры, показало, что у морских свинок это не [c.187]

При этих методах используются две системы антиген — антитело с одной стороны, подлежащая изучению система антиген — антитело и, с другой — система красных кровяных телец барана и антиэритроцитарных антител барана. Метод состоит из двух этапов увеличивающееся количество антигена добавляют к одному и тому же количеству антисыворотки против этого антигена (ее предварительно освобождают от комплемента нагреванием до 56 °С), к которому прибавляют определенное количество комплемента морской свинки. Контролем является только иммунная сыворотка, антигены испытывают параллельно. В ходе этой реакции (24 ч при 4 °С) какая-то часть комплемента морской свинки свяжется с иммунными комплексами по мере завершения в каждом образце реакции антиген — антитело. Несвязанную часть комплемента количественно определяют на втором этапе [c.103]

Комплемент. Для определения титра и рабочей дозы производят титрование комплемента с помощью реакции иммунного гемолиза. Для этого свежую сыворотку морской свинки разводят изотоническим раствором хлорида натрия от 1 10 до 1 40 (табл. 18). К 0,2 мл каждого разведения комплемента добавляют по 0,4 мл гемолитической системы (смеси равных объемов 3 % суспензии эритроцитов в (изотоническом растворе хлорида натрия и гемолитической сыворотки в разведении, соответствующем ее тройному титру). Пробирки выдерживают при 37°С и через 30 мин определяют титр комплемента —наибольшее разведение комплемента, которое вызывает полный лизис эритроцитов в присутствии гемолитической сыворотки. Рабочую дозу комплемента рассчитывают, исходя из его титра. Рабочая доза комплемента должна быть выше титра на 25%. Так, например, при титре комплемента 1 20 в качестве рабочей дозы берут его предыдущее разведение 1 15 (см. табл. 18). [c.120]

В качестве комплемента используют свежую или сухую сыворотку морской свинки. Чтобы получить основной раствор для последующего титрования, комплемент разводят 1 10 в ИХН. [c.71]

Антикомплементарная РИФ — метод, при котором препарат вначале обрабатывают немеченой специфической антисывороткой и комплементом морской свинки (1 10) во влажной камере в течение 30 мин при 25 С, после чего промывают и обрабатывают антикомплементарной (против глобулинов морской свинки) меченой сывороткой в тех же условиях и промывают солевым буферным раствором. [c.76]

Если иммунизировать животное чужеродными эритроцитами, то образуются антитела, обладающие способностью агглютинировать эритроциты, подобные тем, которыми производилась иммунизация. Антигенами, вызывающими образование этих агглютининов, служат так называемые группоспецифические вещества крови, которые мы уже упоминали в гл. XI. Агглютинины и другие антитела не разрушаются нагреванием до 56°, поэтому агглютинация не нарушается при прогревании иммунной сыворотки в течение 30 мин. при 56°. Между прогретой и непрогретой иммунной сывороткой имеется существенное различие при применении непрогретой сыворотки помимо агглютинации эритроцитов наблюдается также и гемолиз, прогретая же сыворотка ие обладает гемолитическим действием. Гемолиз вызывается находящимся в сыворотке термолабильным комплексом, получившим название комплемент. Обычным источником комплемента служит сыворотка морской свинки, которая содержит значительное количество этого комплекса. [c.347]

Титрование комплемента морской свинки [c.248]

Контроль комплемента на отсутствие в нормальной сыворотке морских свинок специфических антител (Кг)- [c.136]

Комплементом является смесь сывороток, полученная от 3—5 здоровых морских свинок, или сухой комплемент в ампулах. Непосредственно перед употреблением сыворотку морской свинки разводят изотоническим раствором хлорида атрия в отношении 1 10, получая основной раствор, [c.139]

Из суспензии клеток селезенки удаляют Т-клетки, последовательно воздействуя антителами к Thy-1 и комплементом морской свинки, истощенным агарозой. Такая суспензия служит не- [c.182]

Предметное стекло следует покрыть тонким слоем 0,1—0,2%-ной агарозы и высушить. Образующаяся пленка способствует плотному прикреплению к стеклу слоя агарозы, содержащего клеточную суспензию. 0,5%-й раствор расплавленной агарозы в сбалансированном солевом растворе разливают по 0,5 мл в подогретые пробирки, помещенные в водяную баню (45 С). Прибавляют по 50 мкл 15%-ной (по объему) суспензии БЭ и по 10—100 мкл взвеси лимфоидных клеток смесь переносят на предметные стекла, покрытые пленкой агарозы, и равномерно распределяют по их поверхности, выравнивая слой боковой поверхностью пробирки. Стекла оставляют на горизонтальной поверхности, пока не застынет гель, затем их кладут слоем геля вниз в специальные лотки из люцита с небольшим углублением (21,5X4,7X0,1 см). Пространство между предметными стеклами н дном лотка заполняют комплементом морской свинки, разведенным СР 1 10. Лотки ставят друг на друга и помещают в пластиковые коробки, на дно которых для создания влажной атмосферы кладут мокрую фильтровальную бумагу, и инкубируют 2—3 ч при 37 С. Для подсчета АОК стекла погружают в физиологический раствор, затем тыльную поверхность нх вытирают насухо и просматривают препараты в ярком отраженном свете. Наилучшие результаты получаются в тех случаях, когда на одном стекле появляется от 40 до 100 зон гемолиза. [c.292]

Кривая, представляюш,ая часть комплемента, связанную в первой реакции (разные количества антигена на то же количество антител и комплемента морской свинки), имеет форму колокола, максимум ее соответствует определенному соотношению антигена и антитела, называемому эквивалентностью. Указанный метод особенно чувствителен для выявления структурных различий белков [13, 92, 93 пример этого приведен на рисунке 4.7. Для данного метода необходимо, чтобы антисыворотка была моноспецифична, когда исследуются биологические растворы или экстракты, содержащие смесь белков. [c.104]

Активность глюкана в отношении инактивации третьего ком-ионента комплемента исследовали путем инкубации глюкана с сывороткой морской свинки при 37° в течение 1 часа, а затем Сз титровали в исходной и обработанной глюканом сыворотке. Связывание Сз в сыворотке морской свинки до и после обработки полисахаридами отражено в следующих данных [c.304]

С целью выяснения влияния природы носителя на развитие толерантности к формальдегиду нами были проведены опыты с использованием в качестве толерогена его конъюгатов с гетерологичным и аутологичным носителем. Учитывая высокую реактогенность формальдегида к белкам, конъюгаты готовили ех tempore добавлением гаптена к разведенному сухому комплементу морских свинок (гомологичный носитель) и к свежей кроличьей сыворотке (гетерологичный носитель) в соотношении 1 100, что исключало присутствие гаптена в несвязанном виде. Конъюгаты вводили морским свинкам однократно внутрисердечно в количествах, соответствующих 1 и 0,5 мг формальдегида сенсибилизацию животных после 14 сут отдыха осуп1ествляли 20 эпикутанными аппликациями 4% водного раствора формальдегида. Состояние специфичной чувствительности подопытных животных оценивали по интенсивности кожного теста на формальдегид [c.73]

В фиксации комплемента. В лаборатории Эккера было установлено, что сыворотки человека, мыши, морской свинки после обработки натриевым обменником не теряли своей комплементной активности [74]. Это, повидимому, является подтверждением того, что ионы Са играют ничтожную роль. [c.297]

Реакцию связывания комплемента сыворотки с сульфатом никеля в качестве антигена предложили в 1954 г. Wendberger и Frohli h для диагностики экземы, вызванной контактом с никелем. Прп этом авторы исходили из предположения, что в эпидермисе таких больных происходит реакция антиген — антитело. У 97 работников гальванических цехов, систематически контактировавших с солями никеля, они поставили реакцию связывания комплемента с восемью различными разведениями сульфата никеля (от 1 4096 до 1 524 288) методика постановки реакции ничем не отличалась от классической реакции Вассермана, комплементом служила сыворотка морских свинок. У 8 человек из 97 эта реакция дала резко положительный результат, причем у шести из них оказалась положительной и компрессная проба с сульфатом никеля. Средняя интенсивность реакции была получена у И человек, слабо положительной она была у четырех. Авторы полагают, что общий процент полученных ими по- [c.58]

IgG кролика, собаки и человека способны фиксироваться в коже и тканях морской свинки. После взаимодействия с антигеном или анти- IgG-антителами фиксированные на тучных клетках морской свинки чужеродные для этого животного IgG вызывают высвобождеине субстанций анафилаксии. Такие гетероцитотропные антитела в отличие от IgG-гомоцитотропинов имеют меньшую электрофоретическую подвижность, способны активировать систему комплемента по классическому пути (см. гл. 8). Их содержание в сыворотке достаточно велико 3—5 мг/мл. Среди подклассов IgG человека способностью фиксироваться клетками морской свинки обладают все подклассы, за исключением второго. [c.130]

Реакцию выполняют в два этапа. Первоначально проводят реакцию антиген-антитело в присутствии комплемента (обычно это сыворотка морской свинки). После инкубации смеси определяют содержание несвязавшего-ся комплексом (ие активированного) компле.мента с помощью реакции иммунного гемолиза (см. гл. 8). [c.259]

Комплемент (от лат. сотр1етеп1ит — дополнение) представляет собой сложный комплекс белков сыворотки крови глобулиновой природы, обозначаемый символом С. В состав его входят 9 компонентов С 1, С 2, С З, С 4, С 5, С 6, С 7, С 8 и С 9. Все компоненты различны по своему химическому составу, физическим и биологическим свойствам. Активным является весь комплемент в целом, но не отдельные его компоненты. Комплемент находится в крови человека, всех теплокровных и многих холоднокровных животных. Наиболее постоянное и высокое содержание комплемента выявлено в сыворотке крови морских свинок. Поэтому при постановке серологических реакций, основанных на участии комплемента, в качестве его используют смесь сывороток, полученных от 3—4 морских свинок. [c.149]

На поверхность затвердевшего геля наслаивают комплемент (морской свинки или Xenopus), предварительно адсорбированный клетка ми-мишеням и. Равномерного распределения комплемента (2 мл в разведении 1 10) по поверхности геля достигают или покачиванием геля, или прокатыванием пипетки по гелю. Зоны лизиса эритроцитов появляются через 1—2 ч инкубации геля во влажной камере при 37 °С. Такие гели можно фотографировать в темном поле. [c.502]

Описанный метод не очень чувствителен, но дает полезную информацию о гетерогенности антител. С его помощью выявляют в основном IgY-антитела. Использование дополнительных, вызывающих лизис антисывороток не обязательно, поскольку IgY Xenopus фиксируют комплемент морской свинки. [c.502]

Использование комплемента морской свинки удобно, но это животное не лучший источник комплемента. Наибольшее число зон лизиса может быть получено с применением свежей сыворотки крови Xenopus, причем оно не увеличивается при использовании кроличьей антисыворотки. Для головастиков характерно более низкое число зон лизиса, чем для взрослых Xenopus. [c.503]

В качестве источника комплемента используют нормальную сыворотку морской свинки, которую покупают у фирм Gib o нли Behringwerke или готовят самостоятельно, смешав сыворотки ие менее 50 животных. Каждую серию свежеприготовленной сыворотки хранят мелкими порциями при —20 С. Активность комплемента не снижается по крайней мере в течение месяца. В замороженном виде можно также хранить коммерческий комплемент, регидратированный из лиофилизата. Перед, самым употреблением замороженную сыворотку оттаивают и. разбавляют охлажденным СР, и если ее держать на льду, она будет пригодна в течение 12 ч, однако разбавленный комплемент нельзя повторно заморозить. Необходимо проверять активность соответствующего разведения каждой новой серии комплемента, проводя титрование по стандартной методике параллельно с предыдущей серией. Все испытанные нами серии комплемента самого разного происхождения оказались пригодными в конечном разведении от I 60 до 1 150 без какого-либо истощения. Избыток комплемента может вызывать частичный гемолиз монослоя эритроцитов, а при его недостатке зоны гемолиза получаются меньше и для их выявления нужна более длительная инкубация. Тем не меиее кривые титрования обычно получаются весьма пологими, что позволяе использовать комплемент в широких пределах конечных разведений (см. ниже). [c.216]

Локальный гемолиз. Нужны камеры Каннингема, состоя щие из двух предметных стекол, соединенных проложенными между ними полосками двухсторонней адгезивной леиты бараньи эритроциты 2,4,6-триинтробензолсульфокислота (ТНСБ) какодилатный буфер с pH 6,8 глицилглицин комплемент морской свиики. [c.228]

В качестве источника комплемента используют сыворотку кролика илн морской свинкн с низкой спонтанной литической активностью. [c.224]

Комплемент морской свинки (КМС), разведенный 1 10 в ЗФР Дульбекко Предметные стекла Двусторонняя липкая лента Парафин Воск [c.289]

Смотреть страницы где упоминается термин Морская комплемент: [c.188] [c.68] [c.68] [c.71] [c.348] [c.349] [c.118] [c.264] [c.246] [c.247] [c.249] [c.262] [c.317] [c.318] [c.318] [c.320] [c.320] [c.464] [c.503] [c.273] [c.274] [c.229] [c.266] [c.291]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология