Комплекс поливалентного антигена

Рис. 18. Схема процесса образования комплекса поливалентного антигена с антителами АВ — антиген, А и В — антитела со специфичностью анти-А и анти-В

Во-первых, гетерогенностью антител по физико-химическим свойствам, в том числе по сродству к антигену. Во-вторых, сложностью определения общего количества антител, а также отдельных фракций. В-третьих, в случае поливалентных антигенов возможностью образования комплексов сложного состава, в том числе циклической структуры, в которых проявляется кооператив-ность Взаимодействия активных центров антител. Все это не позволяет применить традиционные методы для расчета истинных значений констант связывания. Более надежные данные могут быть получены для моноклональных антител и их РаЬ-фрагментов, так как в этом случае могут быть выделены индивидуальные антитела в гомогенном виде. [c.41]

Л — образование комплекса антиген—антитело между поливалентным антигеном и одновалентным антителом (антитело взято в избытке) Б —образование преципитатов при неспецифической агрегации комплексов антиген-антитело В—растворимый комплекс при избытке антигена. [c.343]

Преципитацию антигена антителом можно объяснить образованием сетки геля в результате взаимодействия двухвалентного антитела с поливалентным антигеном. Рост такой сетки может быть ингибирован избытком любого из реагентов, как это схематически изображено на рис. 131. Как и следовало ожидать, фрагменты одновалентного антитела могут конкурировать с двухвалентным антителом за гомологичный антиген, предупреждая таким образом преципитацию. Измеряя молекулярный вес комплекса, образующегося при насыщении антигена фрагментами одновалентного антитела, можно также определить функциональность антигена [1013]. [c.341]

При применении метода (III) надо принимать во внимание, что антитела двухвалентны (по крайней мере обычно), а белковые антигены — поливалентны [5]. Поэтому если мы определяем равновесие, в котором каждое антитело соединяется с наибольшим возможным числом молекул антигена (с двумя в случае двухвалентных антител) в присутствии свободного антигена и комплекса Ат — Аг, где Ат — антитело и Аг — антиген, то константа равновесия определяется уравнением [c.167]

Иммунохимические методы анализа, основанные на специфическом связывании определяемого соединения соответствующими антителами, широко вошли в аналитическую практику и используются в различных областях медицины, сельского хозяйства, микробиологической и пищевой промышленности, для целей охраны окружающей среды. Иммунохимическая реакция в растворе между антителами и антигенами (в гл. 1 будет введено точное определение термина антиген , однако здесь мы будем понимать под ним идентифицируемое вещество, против которого выработаны соответствующие антитела) протекает в несколько стадий., первой из которых является обратимое образование комплекса состава 1 1. Вследствие наличия в молекуле антител более одного центра связывания для поливалентных антигенов возможно дальнейшее многостадийное образование сложных комплексов с различным соотношением в нем компонентов. [c.5]

Хотя гибридомные технологии еще продолжают достаточно активно использоваться, с появлением новых эффективных методов белковой инженерии, в том числе систем отбора белков на основе разнообразных дисплеев и репрезентативных клонотек случайных белковых последовательностей, mAb начинают постепенно сдавать свои позиции. Новые технологии позволяют отбирать антитела требуемой специфичности непосредственно из суспензии фаговых частиц без иммунизации лабораторных животных и при этом получать белки с совершенно новой специфичностью к антигенам, которые неиммуногенны in vivo. Новые подходы дают возможность снять ограничения, накладываемые на производство антител особенностями иммунного ответа живого организма. В последние годы удалось получить большое количество рекомбинантных антител с новыми свойствами значительно уменьшить размер их молекул, а также объединить антитела в поливалентные гибридные комплексы, сильно повысив при этом их авидность. Генно-инженерными методами удалось объединить фрагменты антител с разнообразными аминокислотными последовательностями для обеспечения адресной доставки макромолекул. Такие гибридные молекулы, кроме антител, включают ферменты для активации предшественников цитоток-сичных лекарственных препаратов, токсины, белки вирусных частиц, используемые в генотерапии, и сами могут быть включены в липосомы для повышения эффективности химиотерапии. Рекомбинантные антитела применяют для получения биосенсоров, используемых при мониторинге исследуемых молекул в реаль- [c.409]

Рис. 5.2. Зависимость подавления связывания антител с моно- или поливалентным антигеном определяется скоростью диссоциации иммунных комплексов

Как происходит стимуляция лимфоцитов под действием специфических антител В отсутствие антигена молекулы антител на новерхности лимфоцита распределены случайным образом. Добавление антигена оказывает поразительный эффект расположенные на поверхности лимфоцита антитела вместе с присоединенными антигенами собираются вместе на одном конце клетки, образуя так называемый колпачок ( кэп ). Но завершении перераспределения молекулы антител оказываются внутри клетки. Образование колпачка идет с потреблением энергии и при участии сократительных элементов клетки. Итак, формирование на новерхности клетки решетки из комплексов антиген—антитело ведет к образованию колпачка , а это стимулирует клеточное деление. Антиген должен быть поливалентным (т. е. содержать более одной специфической детерминанты) для того, чтобы создать перекрестные связи между молекулами антител на поверхности лимфоцита. Вопрос о зависимости митотической активности клеточного ядра от этих событий. [c.256]

Концепция агглютинации известна с 1920-х гг. в микробиологическом анализе. Этот принцип можно положить в основу офазования комплекса между антителом и антигеном, где имеется поливалентное связывание. Поливалентный белок будет реагировать со своим антителом, образуя осаждающийся комплекс, но реакция в высокой степени зависит от таких факторов, как нонная сила и ионные частицы, и осложняется изменением реакционной способности различных антигенных связывающих центров на антителе В принципе, по мере протекания реакции образование комплекса может приводить к изменению способности среды рассеивать свет, но в адеале комплекс должен оставаться во взвешенном состоянии. [c.584]

Ввиду поливалентности белковых антигенов, бивалентности антител и присутствия в иммунной сыворотке популяции антител, специфичных к разным антигенным детерминантам, реакция взаимодействия между антигеном и антителом создает комплекс, образование решетки которого зависит от соотношения количеств антигена и антител. На рисунке 4.2 Л показаны три экстремальные ситуации. Эта характерная особенность реакции антигена и антитела очень важна для принципов нескольких иммунохимических методов. [c.95]

Процесс образования комплекса антиген — антитело состава 1 1, в котором реализуются поливалентные взаимодействия, также является обратимым и может быть охарактеризован константой комплексообразования. С энергетической точки зрения образование поливалентного комплекса намного выгоднее, чем моновалентного. Например, было показано, что 1дО-антитела с внутренней аффинностью к 2,4-динитрофенольному (ДНФ) гаптену 10 л/моль имеют функциональную аффинность по отношению к комплексу ДНФ — фаг 4-174—л/моль, т. е. бивалентные взаимодействия являются в 1000 раз более прочными, чем моновалентные. [c.38]

Если принять во внимание, что антигены поливалентны, т. е. содержат в молекуле несколько идентичных де-терминантиых групп, а антитела как минимум бивалентны, становится очевидным второй важный фактор стабильности формирующихся комплексов антиген-антитело. Согласно второму закону термодинамики [c.91]

Связывание IgE тучными клетками — основное условие возникновения каскада биологических реакций, обозначаемых термином — реакции гиперчувствительно-сти немедленного типа. Эти реакции возникают после взаимодействия поливалентного антигена аллергена) с фиксированными на клетках IgE-антителами. В этом разделе мы рассмотрим лишь проблему связывания ци-готропинов клетками. Процесс высвобождения субстанций анафилаксии под влиянием комплекса антиген-цито-тропины мы обсудим ниже. [c.126]

Важнейшими рецепторами поверхностной мембраны макрофагов являются F -рецепторы, способные связывать иммунные комплексы и тем самым облегчать фагоцитоз патогенных агентов, которые соединились со специфическими антителами против их антигенов. Специфические антитела против конкретного антигена составляют очень небольшую часть всех иммуноглобулинов плазмы. Поэтому важно, чтобы F -рецепторы фагоцитов отличали антитела, связанные со своим антигеном, от свободных антител. При формировании иммунного комплекса иммуноглобулины претерпевают агрегацию и конформационные изменения в области F -фрагмента. Эти изменения объясняются поливалентностью антигена. В результате резко возрастает аффинитет связывания иммуноглобулинов с F -рецепторами, которые являются изотип-спе-цифическими, т. е. существуют особые F -рецепторы для каждого класса иммуноглобулинов. IgG-антитела в составе соответствующих иммунных комплексов распознаются и связываются F yR, которые экспрессированы на мембранах моноцитов/макрофагов в количестве 10 рецепторов на клетку [37]. [c.151]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология