Хромофор количественные измерения

При количественных измерениях метод КД является более точным и более чувствительным, чем метод ДОВ. Это видно из табл. 1, где приведен эффект Коттона, связанный с различными а, 3-ненасыщенными кето-хромофорами в кольце А в стероидах и тритерпенах. Все эти вещества характеризуются отрицательным эффектом Коттона и отличаются только по положению и интен- [c.132]

В заключение отметим, что если рассматривать проблему упрощенно, кривую дисперсии оптического вращения можно сравнивать с кривой инфракрасного поглощения. Кривая ДОВ дает информацию об эффектах Коттона, определяемых хромофорами, так же, как отпечатки пальцев , вызванные фоновыми вращениями , которые называются скелетным эффектом . Поэтому метод ДОВ пригоден для структурных исследований и идентификации веществ [13, 19, 20]. Соответственно применительно к стереохимическим проблемам можно сравнить метод КД с ультрафиолетовой спектроскопией. Кривая КД количественно отражает эффект Коттона, определяемый отдельным хромофором в асимметричном окружении. Следовательно, этот метод позволяет проводить количественные измерения. Для различных оптически активных хромофоров метод КД дает обычно лучшее разрешение, чем ДОВ таким образом, его можно применять для изучения эффектов Коттона в соединениях с несколькими хромофорами [2, 13, 19, 20]. [c.138]

Поскольку поглощение белков в области 250—300 ммк обусловлено остатками триптофана, тирозина и фенилаланина, изменение поглощения в этой области связано, по-видимому, с влиянием, которое оказывает на хромофоры изменение условий в молекуле белка. Эксперименты с индолом, фенолом и бензолом— соединениями, которые можно рассматривать как модели этих остатков, — показывают, что при увеличении показателя преломления растворителя наблюдается сдвиг в область длинных волн (в данном случае речь идет не о красном сдвиге к 295 ммк, обусловленном ионизацией фенольной группы). Для неполярных растворителей этот сдвиг можно объяснить и оценить количественно. В водных растворах направление сдвига остается тем же, однако описать его простой формулой не удается. Для этого необходимо оценить, в какой мере растворитель может стабилизировать основное и возбужденное состояния хромофорных групп. Сдвиг в голубую область спектра, наблюдаемый при разрушении структуры белка, можно объяснить качественно, если предположить, что хромофорные группы перемещаются при этом из гидрофобной среды в белковой матрице в водную среду, показатель преломления которой меньше. Разностные спектры служат чувствительным показателем нарушений в третичной структуре, которым обычно сопутствуют изменения оптического вращения, вязкости и т. д. В некоторых случаях большое изменение теплоты и энтропии наблюдается при условиях, когда, судя по измерениям оптического вращения, изменений во вторичной структуре не происходит. В таких случаях разностные ультрафиолетовые спектры могут служить дополнительным критерием наличия изменений в третичной структуре. Можно ожидать также изменений в спектре, обусловленных изменением величины заряда вблизи хромофора. Однако эксперименты с модельными соединениями показывают, что подобные изменения могут происходить только в том случае, если [c.299]

При количественном анализе круговой дихроизм также имеет ряд преимуществ перед вращательной дисперсией, особенно когда рассматриваемый хромофор присутствует вместе с оптически активными веществами, которые не имеют полос поглощения в данной области спектра. При измерении кругового [c.34]

На принципе аддитивности основан целый ряд приемов и методов, как, например, известный прием введения поправки на холостой опыт путем вычитания оптической плотности, обусловленной растворителем и примесями из реагентов, из измеренной оптической плотности раствора. Пользуясь принципом аддитивности, можно идентифицировать или определить количественно неизвестный хромофор в смеси с известным хро- [c.86]

Более общий и количественный метод измерения латеральной диффузии мембранных компонентов в интактных клетках состоит в определении скорости восстановления флуоресценции после тушения (рис. 10.27). Для этого определенный компонент на поверхности клетки специфически метят флуоресцентным хромофором и помещают небольшую часть поверхности клетки (3 мкм ) в поле зрения флуоресцентного микроскопа. Далее, находящиеся в поле зрения флуоресцирующие молекулы разрушают мощным пучком лазерных лучей. После этого определяют время нового появления флуоресценции в поле зрения, используя только слабое освещение, чтобы избежать дополнительного тушения. Если меченый компонент подвижен, то обесцвеченные молекулы исчезнут из поля зрения, а их место займут флуоресцирующие молекулы в итоге интенсивность флуоресценции в поле зрения возрастет. Скорость восстановления исходного уровня флуоресценции зависит от латеральной подвижности флуоресцентно-меченого компонента, которую можно выразить через коэффициент диффузии О, Среднее расстояние 5 (см), пройденное по плоскости за время г (с), зависит от О (см с" ) в соответствии с уравнением [c.217]

Одной из существенных особенностей компенсационных ИК-спектров являются обращенные полосы. В случае, если при получении "прямого" компенсационного ИК-спектра в какой-то его области произошло зашкаливание за 100% пропускания, необходимо получить в этой области обращенный спектр. Для этого кюветы измерения и сравнения меняют местами. На спектрах рис.1 обращенные полосы показаны пунктиром. Обращенные спектры появляются, если в результате кв их-то воздействий на изучаемую систему из нее исчезают определенные хромофоры. Так, например, при окислении масла с диал-килдятиофосфатными присадками происходит разрушение связей P-3 P=rS и (Р)О-С. В связи с этим в спектре 7 рис.1 имеют место обращенные полосы с максимумом около S) = 550,660 и 1000 см . Обращенные полосы чаще всего присутствуют в спектрах 111 типа. По ним лучше всего проводить количественные измерения продуктов окисления системы. [c.273]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология