Обессоливание и групповое разделение

Обессоливание является одной из форм группового разделения, при котором фракционируемые соединения элюируются двумя фракциями. Одна фракция (в данном случае высокомолекулярные соединения — белки) элюируется в свободном объеме. Другая — содержащая низкомолекулярные соединения — проникает в час- [c.220]

При групповом разделении смеси высокомолекулярные соединения не фракционируются. Гель-фильтрация в данном случае, подобно диализу, используется для отделения белков от низкомолекулярных примесей и может заменить его. Обессоливание белков можно проводить на сефадексах G-25 и G-50, а также на биогелях Р6 и РЮ. Для обессоливания пептидов следует применять сефадексы G-10 и G-15 или биогели Р2 и Р4. [c.221]

Г. Групповое разделение (обессоливание) белков [c.423]

Простейшим вариантом группового разделения с помощью ГПХ является отделение белков от низкомолекулярных примесей, в частности обессоливание. Для этих целей используются сильно сшитые гели, с низким пределом проницаемости. [c.423]

Классическую проблему обессоливания коллоидов в настоящее время решают, как правило, с помощью гель-фильтрации. Не имеет смысла приводить или обсуждать здесь даже наиболее важные или интересные результаты. Укажем лишь на возможности метода и источники ошибок и рассмотрим примеры очистки веществ разных классов. Если отделяемые низкомолекулярные компоненты не являются солями, то целесообразно говорить о групповом разделении , основанном на различиях в молекулярном весе. Здесь существует много самых различных вариантов. Например, подобные смеси часто образуются при попытках модифицировать макромолекулу . В этом случае стремятся отделить избыток реагентов или промежуточных продуктов реакции. Когда полимер тем или иным путем взаимодействует с низкомолекулярными [c.136]

Подбирая гель, следует учитывать его тип и размеры частиц. В принципе методом гель-хроматографии проводят два вида разделения групповое разделение и фракционирование. В первом случае содержащиеся в пробе соединения делят на две группы соединения большей молекулярной массы, которые не удерживаются гелем и элюируются объемом элюента, равным свободному объему, и низкомолекулярные соединения, которые могут диффундировать внутрь геля и элюируются объемом элюента, приблизительно равным общему объему слоя геля Уг. Групповое разделение часто называют обессоливанием даже в тех случаях, когда его целью является извлечение низкомолекулярных примесей, отличающихся от солей. Во втором случае — при фракционировании — разделяют более сложные смеси довольно сходных соединений, различающихся по характеру их диффузии внутрь геля. Последовательность элюирования этих соединений из гелей определяется величинами/Со- [c.366]

Размер колонки для гель-хроматографии непосредственно зависит как от объема пробы, которую необходимо разделить, так и от вида разделения — групповое разделение (обессоливание) или фракционирование. Групповое разделение проводят в более широких колонках, причем для большинства лабораторных задач достаточно, чтобы высота колонки равнялась 20— 50 см. Отношение высоты колонки к ее диаметру может состав- [c.370]

ОБЕССОЛИВАНИЕ И ГРУППОВОЕ РАЗДЕЛЕНИЕ [c.381]

При групповом разделении методом гель-фильтрации удается в значительной мере избежать разбавления, если учитывать объемные соотношения, подробно рассмотренные в разделе Обессоливание . При очистке суспензии вируса (выделенного из столовой свеклы) от сопутствующих пигментов путем гель-фильтрации на 4—6-кратном (по отнощению к объему образца) объеме сефадекса 0-75 разделение составляло лишь 20—30% [14]. Свободные от белков катехоламины — адреналин и норадреналин — были выделены без разбавления из 20 мл сыворотки (27% объема колонки) гель-фильтрацией на сефадексе 0-25 (2X25 сж, 78 мл) [15]. Кислюк [16] показал, что с помощью гель-фильтрации на сефадексе 0-50 удается гораздо легче отделить фермент от его кофакторов, чем с помощью диализа. Таким путем удается получить кофакторы в сравнительно небольшом объеме и изучить эффект их вторичного присоединения к ферменту. После гель-фильтрации был выделен совершенно неактивный белок, активность которого вновь восстанавливалась (до 86% исходной) после добавления низкомолекулярной фракции. При диализе активность фермента снижалась только до 38% [16]. Групповое разделение гель-фильтрацией оказалось чрезвычайно удобным методом отделения низкомолекулярных антигенов от антител. Диссоциацию комплекса антиген — антитело часто осуществляют, добавляя избыток гаптена, который затем можно легко отделить от белка гель-фильтрацией [17]. В бактериологии гель-фильтрация на сефадексе 0-75 или биогеле Р-100 может служить для удобного выделения экстрацеллюлярных токсинов. Перед засевом культуральную среду освобождают от высокомолекулярных примесей гель-фильтрацией. Затем на той же колонке после удаления бактерий можно вновь отделить высокомолекулярные токсины от культуральной среды [18]. [c.142]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология