Плазмиды конъюгативные

Неконъюгативные плазмиды не содержат детерминантов, придающих бактериальным клеткам свойства генетических доноров, и поэтому они не способны самостоятельно передаваться от одних клеток к другим. Однако такие плазмиды могут быть перенесены в реципиентные клетки с помощью конъюгативных плазмид. Перенос неконъюгативных плазмид конъюгативными называется мобилизацией. При этом неконъюгативная плазмида является мобилизуемой, а конъюгативная — мобилизующей. [c.90]

Чрезвычайно важным является то обстоятельство, что интегрированная в хромосому конъюгативная плазмида (например, F-фак-тор Е.соН) не теряет способности инициировать конъюгацию клеток и перенос ДНК из донора в реципиент. При этом ДНК плазмиды, составляющая одно целое с хромосомной ДНК, затаскивает в реципиент хромосому бактерии-донора. Между ДНК донора и реципиента может происходить общая рекомбинация, что приводит к обмену гомологичными генами между клетками бактериальной популяции. Этот процесс — бактериальный аналог полового размножения. Наличие механизма обмена генами очень важно для эволюции бактерий, поскольку, как и в случае патового размножения эукариот, нарушает абсолютную сцепленность генов одной хромосомы и позволяет естественному отбору находить благоприятные комбинации уже присутствующих в популяции бактерий аллельных вариантов генов. [c.128]

Рекомбинантная ДНК проникает в клетки бактерий, характеризующихся низкой частотой трансформации, таким же образом, как плазмидная ДНК из донорской клетки в реципиент-ную в естественных условиях. Некоторые плазмиды обладают способностью создавать межклеточные контакты, через которые они и переходят из одной клетки в другую. Образование контактов между донорной и реципиентной клетками обеспечивается конъюгативными свойствами плазмид, а сам перенос ДНК - мобилизационными. Большинство плазмид, которые используются в работах с рекомбинантными ДНК, не обладают конъюгативными функциями и поэтому не могут переходить в реципиентные клетки путем конъюгации. Однако проникновение в клетку некоторых плазмидных векторов все-таки происходит при наличии в этой клетке второй плазмиды, обладающей конъюгативными свойствами. Таким образом, введя в клетку, несущую мобилизуемый плазмидный вектор, плазмиду с конъюгативными функциями, можно трансформировать клетки-реципиенты, с трудом поддающиеся трансформации другими способами. [c.77]

Поскольку доноры Hfr возникают в результате встраивания конъюгативной плазмиды в бактериальную хромосому, они могут возвращаться к состоянию, при котором эта плазмида вновь оказывается в цитоплазме. Поэтому, перед тем как использовать данный штамм в экспериментах по конъюгации, важно убедиться в том, что большая часть клеток популяции Hfr действительно обладает фенотипом Hfr. Это можно сделать как методом перепечатывания с чашки на чашку (метод отпечатков), так и методом отбора и посева штрихом. [c.111]

Важные свойства D-плазмид - конъюгативность и способность существовать в различных бактериях. Это обеспечивает горизонтальное распространение генов биодеградации среди популяций бактерий. Катаболические плазмиды наиболее крупные. Характеристика плазмид биодеградации пpeд тaвлe ь табл. 5.3. [c.344]

В предыдущем разделе упоминались Р-факторы, которые называются еще конъюгативными плазмидами за то, что они способны, попадая в бактериальную клетку, передавать ей свойства донора. Этим они как бы обеспечивают собственный перенос из клетки, уже инфицированной секс-фактором, в другую клетку — реципиент, еще не имеющую этой плазмиды. Конъюгативные плазмиды принадлежат к группе наиболее полно изученных. Плазмидная ДНК представляет собой ковалентно [c.112]

Большинство конъюгативных плазмид природных штаммов бактерий репрессированы в отношении экспрессии донорного фенотипа, так что лишь одна из 1000—10 000 клеток, имеющих такую плазмиду, способна в оптимальных условиях передавать ее. Но, поскольку [c.103]

Перенос конъюгативных плазмид (F - или R-плазмид в Е. соЦ р-) [c.105]

Вышеописанные методики могут использоваться для изучения конъюгационного переноса генов, которые ответственны за кодирование множества признаков, определяемых плазмидами. Конечно, выявление переноса плазмид ol [3] и плазмид, обусловливающих такие признаки, как продукция антигенов и энтеротоксинов [16], требует применения специальных методик, так как прямой отбор по этим признакам невозможен. Некоторые конъюгативные плазмиды способны включаться в бактериальную хромосому с образованием доноров типа Hfr и при исключении из хромосомы могут захватывать часть хромосомной генетической информации, превращаясь в плазмиды типов R, СоГ или F. Такие плазмиды могут использоваться для изучения отношений доминантности— рецессивности, комплементарности между аллелями, а также различных аспектов регуляции генов. Их можно применять и для конструирования штаммов [2]. Эти плазмиды имеют гомологичные с хромосомой участки и их можно применять вместо доноров Hfr [c.109]

Перенос хромосомы донора происходит ориентированно, т. е. гены переносятся в той последовательности, в которой они расположены на хромосоме. Начало переноса связано с местом интеграции конъюгативной плазмиды в хромосому донорного штамма и ее ориентацией. [c.186]

Конъюгация—это тип опосредуемого клеткой переноса генов, который требует наличия у клетки-донора конъюгативной плазмиды. Эта плазмида может реплицироваться или в цитоплазме синхронно с бактериальной хромосомой, или как часть хромосомы в интегрированном с ней состоянии. Конъюгативные плазмиды обладают генами ira, которые определяют и (или) контролируют 1) образование отростков, называемых донорскими половыми ворсинками, которые обязательны (по крайней мере для большинства конъюгативных плазмид) для осуществления донорными клетками контакта с клетками реципиента 2) вещества, снижающие частоту конъюгации (спаривания) донора с донором, и 3) конъюгационный перенос плазмидной или хромосомной ДНК, начинающийся с определенного места (точка начала переноса) в молекуле конъюгативной плазмиды. Конъюгативные плазмиды имеют также гены, контролирующие 1) их репликацию, не связанную с половым процессом, 2) число копий плазмид в пересчете на эквивалент хромосомной ДНК и 3) функции несовместимости. В конъюгативных плазмидах могут также находиться гены, отвечающие за другие фенотипические признаки, такие, как устойчивость к антибиотикам, устойчивость к ионам тяжелых металлов, продукция бактериоцинов, поверхностных антигенов и энтеротоксинов. Конъюгативные плазмиды имеются, по-видимому, у всех грамотрицательных бактерий не так давно они были обнаружены у некоторых видов Streptomy es и Strepto o us. [c.101]

Конъюгативные плазмиды ( onjugative plasmids) Плазмиды, способные передаваться от одной клетки другой во время конъюгации. [c.551]

Мобилизация (Mobilization) Передача от одной бактериальной клетки другой хромосомных генов либо не-конъюгативных плазмид с участием конъюгативных плазмид. [c.553]

Плазмиды бактерий. Генетическая информация бактерий не ограничивается ДНК, расположенной в нуклеоиде бактериальной клетки. Как уже отмечалось в предыдущих разделах книги, носителями наследственных свойств служат также внехромосомные элементы, получившие общее название плазмид. В отличие от ДНК ядерных эквивалентов-нуклеоидов, являющихся органоидами бактериальной клетки, плазмиды представляют собой независимые генетические элементы. Потеря плазмид или их приобретение не отражается на биологии клетки (приобретение плазмид оказывает положительное влияние лишь на популяцию в целом, повышая жизнеспособность вида). Свойство плазмид передаваться от одной клетки к другой положено в основу деления плазмид на группы 1) трансмиссивные, или конъюгативные (инфекциозные), и 2) нетрансмиссивные, или неконъюгативные (неинфекциозные). К трансмиссивным относят плазмиды, инициирующие свойства доноров у клеток-хозяев. При этом последние получают новое качество — возможность конъюгировать с клетками-реципиентами и отдавать им свои плазмиды. Клетки-реципиенты, приобретая во время конъюгации плазмиды, сами превращаются в доноров. [c.112]

Рис. 32. Мужская клетка Е. oli (слева) с большим количеством обычных (соматических) пилей и одной конъюгативной пилей, посредством которой она связана с женской клеткой, лишенной плазмид, кодирующих синтез полового фактора F. На данном препарате конъюгативная пиля искусственно помечена специфическим бактериофагом

Из конъюгативных плазмид лучше всех изучен половой фактор F (фактор фертильности) бактерии Е. oli К-12. Эта плазмида может существовать как автономно в цитоплазме у Р+-донора, так и в интегрированном состоянии у Hir-донора. Реципиентные штаммы не имеют фактора F и обозначаются F . Г+-Доноры передают F-плазмиды практически всем Г -клеткам, с которыми они спариваются, но генетическую информацию хромо- [c.101]

Ярким примером создания микроорганизма с помощью переноса природных плазмид служит получение штамма Ps. putida, способного утилизировать большинство основных углеводородов нефти. Многие псевдомонады несут плазмиды, каждая из которых кодирует ферменты, необходимые для расщепления одного-единственного класса углеводородов. Плазмида ОСТ обусловливает расщепление октана, гексана и декана, плазмиды XYL — ксилола и толуола, САМ — камфоры, NAH — нафталина. Две из этих плазмид, САМ и NAH, являются конъюгативными, а две другие, ОСТ и XYL, мобилизуются указанными плазмидами. В результате последовательных скрещиваний был получен штамм Ps. putida, несущий плазмиды XYL и NAH и гибридную плазмиду, вероятно, коинтеграт, содержащий плазмиды ОСТ и САМ (рис. 12). Такая мультиплазмидная бактерия энергично растет, усваивая неочищенную нефть, поскольку она утилизирует гораздо больше углеводородов, чем любая бактерия с одной плаэ- [c.93]

Другая варьируемая величина, за которой необходимо следить при определении оптимальных условий конъюгационного переноса, — это температура. Многие конъюгативные плазмиды энтеробактерий переносятся с наибольшей частотой, когда спаривание проводят при температуре 37 °С или близкой к ней. Для некоторых из них перенос идет при 25 °С, но его трудно выявить, и, если оставить культуры донора перед смешиванием с клетками реципиента на некоторое время при комнатной температуре, это может привести к значительному снижению частоты пёреноса, происходящего при 37 °С. Вместе с тем существуют конъюгативные плазмиды, например в группе In H, для переноса которых оптимальна температура 25 °С, и они хуже переносятся при 37 °С. Анализируя возможность передачи признака конъюга- [c.104]

Изучение переноса конъюгативных плазмид облегчается, если плазмида определяет признак, по которому легко вести отбор. Р -Плазмиды (имеющиеся у Hfr-доноров) несут помимо фактора Р последовательности хромосомной ДНК, которые примыкали к фактору Р, когда он был интегрирован в хромосому. Например, донорные клетки штамма 9 (табл. 14.1), имеющие плазмиду Р7ас+, могут легко передавать признак 1ас+ клеткам штамма Р", например штамма 10 (табл. 14.1), причем образующиеся трансконъюганты легко отобрать. [c.105]

Клетки, несущие RP4, не подавляют литического развития фага ВЗ, однако введение RP4 в лизогены по фагу ВЗ резко ограничено, а те клетки, которые все-таки получают плазмиду RP4, содержат дефектный профаг ВЗ или дефектную плазмиду RP4, утратившую способность к дальнейшей конъюгативной передаче. Взаимодействия такого типа можно использовать в основе рабочих приемов вылечивания лизогенных бактерий от хромо-сомально локализованного неиндуцибельного профага. [c.205]

Во-вторых, неконъюгативные плазмиды могут переноситься в реципиентные клетки в составе коинтегратов с конъюгативными плазмидами. Коинтеграт представляет собой единую молекулу ДНК, в который объединены два (или более) репликона, каждый из которых способен к независимой репликации (R. Novi k et al., [c.90]

Производные конъюгативных плазмид, несущие транспозоны, чаще всего получают переносом этих плазмид в клетки, содержащие Тп-элементы в хромосоме. Затем полученные штаммы скрещивают с чувствительными к антибиотикам реципиентами и отбирают трансконъюганты, получившие устойчивость, детерминируемую транспозоном. Перенос транспозонов в этом случае, как правило, связан с их перемещением в геном конъюгативной плазмиды. Это подтверждается тем, что в последующих скрещиваниях маркеры плазмиды и транспозона в 100% случаев передаются совместно. [c.110]

В настоящее время наиболее изучены два представителя этого рода Ps. aeruginosa (штамм РАО) и Ps. putida. Для генетического анализа псевдомонад используются конъюгативные плазмиды, способные мобилизовать перенос хромосомных генов, и неконъюгативные плазмиды. Разработаны методы индукции инсерционных или делеционных мутаций при внедрении транспозонов и других мигрирующих элементов. Система клонирования [c.164]

Перенос конъюгативной плазмиды и хромосомы донора в случае Hfr-штаммов начинается с определенной точки на плазмиде, называемой oriT. [c.186]

Мобилизация неконъюгативных плазмид широко используется в практике генетических экспериментов. Этот метод менее трудоемок, чем трансформация и, кроме того, позволяет вводить не-конъюгативные плазмиды в клетки микроорганизмов, для которых не разработаны системы трансформации. [c.187]

Постановка скрещивания. Существует несколько способов скрещивания бактериальных штаммов при помощи конъюгации в жидкой среде, на поверхности питательного агара, на мембранных фильтрах. Выбор способа скрещивания определяется типом конъюгативной плазмиды и целью эксперимента. Самым простым способом является скрещивание в я идкой среде. В этих условиях с высокой эффективностью происходит скрещивание, обусловленное половым фактором F и родственными ему плазмидами. Однако этот метод имеет ограниченное лрименение, поскольку многие плазмиды детерминируют образование коротких пилей (напрнмер, плазмиды Р-группы несовместимости), которые в условиях жидкой среды не обеспечивают тесного контакта между клетками. Для создания такого тесного контакта между клетками скрещивание проводят непосредственно в чашке с агаризованной питательной средой или на мембранном фильтре, помещенном на поверхность агаризованной питательной среды. Последний способ более удобен в случае, когда необходимо провести одновременно несколько скрещиваний. Для скрещивания используют мембранные фильтры, задерживающие микроорганизмы, т. е. с диаметром пор 0,45 или 0,22 мкм. [c.187]

Смотреть страницы где упоминается термин Плазмиды конъюгативные: [c.236] [c.123] [c.125] [c.118] [c.123] [c.125] [c.77] [c.306] [c.123] [c.306] [c.102] [c.104] [c.105] [c.107] [c.90] [c.91] [c.92] [c.105] [c.114] [c.167] [c.197] [c.185] [c.186]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология