Константа диссоциации бинарного комплекса

Рис. 2.3. Зависимость константы диссоциации бинарны.х комплексов фермент —

Понятие о высокой или низкой прочности комплекса в известной степени условно. Границу можно установить приближенно, если известна константа диссоциации комплекса. Константа диссоциации (К.) бинарного электролита овязана с концентрацией (С) и степенью диссоциации (а) известным выражением [c.46]

Определение констант диссоциации бинарных комплексов дегидрогеназ с NADH по концентрациям NADH, необходимых для элюирования, уже рассматривалось в гл. 2 (рис. 2.3). [c.60]

Указанные соотношения наряду с полученными из кинетических данных константами диссоциации бинарных комплексов ЕА и ЕР могут быть использованы для проверки выполнимости механизма Теорела—Чанса. Именно таким путем была доказана выполнимость этого механизма для алкогольдегидрогеназы печени лошади [6]. Для этого фермента существует принудительная последовательность связывания компонентов реакции, причем связывание кофермента предшествует связыванию субстрата, и, кроме того, образование тройного комплекса в этом случае не проявляется кинетически. [c.85]

При этом необходимо помнить, что константы КтзЦ, и Кт (г) характеризуют взаимодействие субстратов не со свободным ферментом, а с соответствующим бинарным комплексом. В некоторых случаях, правда, можно принять, что реакционноспособность субстрата в отношении свободного фермента близка к реакционной способности в отношении бинарного комплекса (т. е. что субстраты взаимодействуют независимо). Помимо того, нужно иметь в виду, что уравнение (УП.б) выведено на основании допущения, что взаимодействие второго субстрата с бинарным комплексом не изменяет константы диссоциации этого комплекса (это также характеризует независимость действия субстратов). [c.69]

На основании величины константы равновесия реакции (4) (стр. 187) можно определить оптимальные условия колориметрического определения висмута в виде роданидного комплекса и решить вопрос о том, насколько оОоснованы эмпирически выработанные условия. Нахождение условий, при которых желтые растворы роданидного комплекса висмута будут отклоняться в наименьшей степени от закона Бера, связано с исследованием диссоциации комплекса при разбавлении. Для случая бинарного комплекса этот вопрос был рассмотрен А. К. Бабко . [c.205]

СТИ пользу в качественной оценке, во-первых, доступности иона металла для растворителя и, во-вторых, того, какую из трех возможных ролей, описанных в разд. 1, выполняет ион металла в ферментативной реакции. Как установлено Кон [21], фактор усиления (ei) протонов воды для бинарного комплекса Е — М + (еь) может быть больше, чем ei для тройного комплекса Е — М + — лиганд (тип II) (вс). И наоборот, ферменты, образующие комплексы Е — лиганд — M + (тип I), проявляют небольшое взаимодействие фермент — ион металла (либо вообще его не проявляют) и имеют величину Ес> ь 1,0, в то время как в комплексах М.2+ — Е — лиганд (тип III) лиганд может оказывать небольшое влияние на окружение иона металла и еь 8с. Хотя эти закономерности наблюдались для большинства комплексов типов I и II [21], известны исключения. Изучением скоростей релаксации протонов субстрата в присутствии Мп + — фермента для ФДП-альдолазы из дрожжей доказано существование мостиковых комплексов Е — Мп + — субстрат (разд. 9), хотя и наблюдались небольшие изменения для ei протонов воды при образовании этих комплексов (т. е. еь Вс)- Следовательно, хотя сравнение величины ei протонов воды для бинарных и тройных комплексов фермента, металла и лиганда дает простой и быстрый метод определения типа образующегося комплекса, однако эти результаты должны рассматриваться как предварительные и подтверждаться с помощью других методов, например определением г и Ajh (константы сверхто-ного взаимодействия) путем измерения скоростей релаксации магнитного ядра лиганда. Быстрый метод определения констант диссоциации комплексов дает также наблюдение за изменениями ei протонов воды при взаимодействии фермента с Мп2+ и лигандом [21]. [c.456]

Из новых методов, позволяющих получить дополнительную ценную информацию, следует прежде всего отметить методы изучения быстрых химических процессов, например метод остановленной струи [21, 22]. Хорошей иллюстрацией возможностей этого метода могут служить данные, полученные для ЛДГ из сердца свиньи [23—26]. При связывании НАДН с ЛДГ происходит смещение максимума НАДН в коротковолновую область, что приводит к снижению экстинкции при 365 нм [24]. Это позволяет проследить за образованием и распадом комплекса ЛДГ-НАДН спектрофотометрическим методом. Ои11геип(1 изучал с помощью метода остановленной струи кинетику вытеснения НАДН из комплекса с ЛДГ окисленной формой никотинамидаденин-динуклеотида. Одна из типичных кинетических кривых представлена на рис. 18 [25]. Изменение оптического поглощения при 365 нм соответствует распаду комплекса ЛДГ-НАДН. С увеличением концентрации НАД скорость распада комплекса ЛДГ-НАДН приближается к предельной величине, соответствующей константе " скорости распада этого комплекса. При pH 8,5 она равна 100 сек. и точно соответствует максимальной скорости ферментативного превращения лактата в пируват, деленной на общую концентрацию фермента [24]. Следовательно, при этом значении pH лимитирующей стадией ферментативного процесса является диссоциация комплекса ЛДГ-НАДН. При меньших значениях pH максимальная скорость становится меньше константы скорости распада этого бинарного комплекса и, следовательно, лимитирующей становится какая-то другая стадия. [c.91]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология