Нитроцеллюлозная мембрана

Нитроцеллюлозные фильтры устойчивы к действию разбавленных кислот и водных растворов щелочей, бензола, толуола, хлороформа, дисульфида углерода и тетрахлорида углерода. Диэтиловый эфир, ацетон, уксусная кислота, этилацетат разрушают нитроцеллюлозные мембраны. [c.36]

Плотно зажимают получившийся сандвич, согласно инструкции к вашему аппарату, и вставляют в камеру для блоттинга. С обеих сторон от сандвича помещают электроды, так чтобы анод находился оо стороны нитроцеллюлозной мембраны. Проходящий через систему ток должен увлекать молекулы из геля по направлению к нитроцеллюлозе. Включают охлаждение (или помещают аппарат в холодную комнату). [c.232]

Мембранная фильтрация нередко применяется также при подсчете микроорганизмов в винах. По сравнению с белым вином красное вино быстрее приводит к забиванию пор мембраны. Поэтому при анализе красного вина следует разделить пробу и проводить фильтрацию через несколько отдельных мембран. Если мембрана в процессе фильтрации окрашивается или забивается, процесс выделения микроорганизмов и их подсчет затрудняются. После окончания фильтрации мембрану нужно промыть стерильным буферным раствором, прежде чем поместить ее в питательную среду. Если содержание спирта в вине много выше 12%, нитроцеллюлозные мембраны применять нельзя, так как они будут набухать вместо них нужно использовать ацетилцеллюлозные мембраны. [c.263]

В предыдущем разделе мы рассмотрели счет радиоактивно меченных нуклеиновых кислот. Однако мембранные фильтры играют и другую важную роль в исследовании нуклеиновых кислот благодаря их способности избирательно связывать эти макромолекулы. Мембраны из нитрата (но не ацетата) целлюлозы связывают денатурированную ДНК и гибриды РНК/ДНК, пропуская в то же время свободную РНК. Согласно данным фирмы Миллипор , нитроцеллюлозные мембраны связывают однонитевую ДНК в количестве 50—80 мкг/см , в то время как ацетилцеллюлозные мембраны связывают только 1 мкг/см . Благодаря такому селективному связыванию нитроцеллюлозные мембраны можно использовать при изучении гибридизации нуклеиновых кислот. В самом деле, это уникальное свойство нитроцеллюлозных мембран сыграло важную роль в исследованиях, ведущих к развитию технологии рекомбинантных ДНК. [c.319]

Планшеты с пористой нитроцеллюлозой. Разработан модифицированный метод скрининга моноклональных антител против поверхностных антигенов раковых клеток различных типов [32 ]. В этом методе используются 96-луночные микропланшеты, в дно лунок которых вплавлены пористые нитроцеллюлозные мембраны. Небольшое количество жизнеспособных раковых клеток наносили на пористое дно лунок микропланшетов (Millipore orpo н инкубировали с супернатантом культуральной жидкости гибридом. [c.132]

Аппарат для электроблоттинга с системой охлаждения. Нитроцеллюлозная мембрана. [c.230]

Отрезают квадратный листок нитроцеллюлозной мембраны подходящего размера, смачивают буфером для блоттинга и помещают на гель. На нитроцеллюлозу помещают несколько слоев увлажненной фильтровальной бумаги. Можно восполь- [c.231]

Хиерхольцер и др. [15] описали методику, позволяющую с помощью ELISA количественно выявлять белковые полосы после электрофореза и переноса белков на нитроцеллюлозные мембраны, так называемый метод вестерн-блотинга (см. разд. 3.7.1). Преимущество этого метода состоит в том, что он не требует использования радиоактивных изотопов. [c.142]

Установлено, что нитроцеллюлозные мембраны обладают полезными адсорбционными свойствами (независимо от их способности к фильтрованию), благодаря которым они могут связывать определе1И1ые макромолекулы (например, одноцепочечные полинуклеотиды и некоторые белки) размером меньшие, чем размер пор фильтра это свойство имеет большое значение для современных аналитических методов и будет подробно рассматриваться в данной главе. [c.154]

В настоящее время фирмы предлагают широкий ассортимент составных мембран. Так, фирма Шляйхер и Шуль поставляет нитроцеллюлозные мембраны на подложке из чистой [c.61]

Автоклавирование оказывает определенное влияние на свойства мембраны. Даубнер и Петер [57] показали, что мембраны из нитроцеллюлозы при этом деформируются несколько уменьшаются их толщина и диаметр, а также размеры пор, например с 0,28 до 0,25 мкм. Мембраны из ацетилцеллюлозы более устойчивы к автоклавированию, чем мембраны из нитроцеллюлозы или из смеси эфиров целлюлозы. Если нитроцеллюлозные мембраны следует стерилизовать при температурах, не превышающих 121 °С в течение не более 20—30 мин, то мембраны из ацетилцеллюлозы можно автоклавировать при температурах на 7—10 градусов выше в течение времени до 65 мин, причем в этих условиях каких-либо существенных изменений у них не наблюдается. Если в каких-то конкретных случаях нужно знать точно размеры пор мембран, то после автоклавирования в ответственных случаях необходимо выполнить специальные определения этих размеров. Мембраны из ацетилцеллюлозы, в отличие от нитроцеллюлозных, можно автоклавировать повторно. Если уже собранную фильтровальную установку подвергли автоклавированию, но не использовали сразу же для фильтрации, ее можно хранить в течение нескольких дней в асептических условиях, однако больше недели этого делать не рекомендуется. Повторному автоклавированию можно подвергнуть уже собранную установку с мембраной из ацетилцеллюлозы, но, если используется мембрана из нитроцеллюлозы, установку следует разобрать, поставить новую мембрану, после чего подвергнуть ее повторной стерилизации. [c.167]

Рис. 11.14. Использование нитроцеллюлозной мембраны для снятия ДНК с вирусных бляшек. (Фото любезно предоставлено фирмой Шляйхер и Шуль .)

Отсюда можно извлечь один урок. Нитроцеллюлозные мембраны, использованные для изучения гибридизации нуклеиновых кислот, были изобретены вовсе не для этой цели. Они долгие годы применялись для других целей и, к счастью, оказались доступными в тот момент, когда исследователи искали новые подходы к этой проблеме. Никакого систематического изучения мембран для гибридизации нуклеиновых кислот проведено не было. Возможно, существуют мембраны, которые лучше подходят для этой цели. К сожалению, выпуск мембранных фильтров — процесс настолько сложный, что исследователи, стремящиеся улучшить соответствующие методы, находятся в полной зависимости от производителей мембран. Вряд ли такое положение можно назвать удовлеворительным. Идеальный путь разработки новых методов состоит в том, чтобы исключить частнособственнические соображения. Торговые интересы должны вступать в силу лишь после того, как метод [c.331]

Термостабилъные белки фракционированы электрофорезом 6 10%-ном ПААГе с ДДС-Na (А) перенесены на нитроцеллюлозные мембраны (Б) и инкубированы в растворе первичных антител на дегидрины (1 1000) и RAB-полипептиды (1 1000). В центре указаны мол. массы RAB-белков, характерных для закаленного состояния растений озимой пшеницы сорта Заларинка, слева - мол. массы дегидринов. [c.20]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология