Изоамилаза

ФЕРМЕНТАТИВНОЕ РАСЩЕПЛЕНИЕ КЛЕЙКОГО РИСОВОГО КРАХМАЛА ПОД ДЕЙСТВИЕМ ИЗОАМИЛАЗЫ [117, 118] [c.147]

Пуллуланаза, открытая в бактериях Aeroba ter [184], действует аналогично изоамилазе. Она легко может быть выделена в чистом состоянии. Применяется для исследования строения ветвистых глюканов (см. с. 112). Пуллуланаза отличается фантастической термостабильностью после нагревания при 100° С в течение 10 мин остается около 80% активности. [c.198]

После инкубации с изоамилазой [c.147]

Изучений тонкой структуры патологических гликогенов с расчленением молекулы на линейные цепи при помощи ферментов типа пуллуланазы — изоамилазы имеет большое значение для изучения гли-когенозов. Приведем в качестве примера результаты исследования гликогена при IV типе гликогеноза, называемом амилопектинозом и характеризующемся гликогеном, сходным с амилопектином (при отсутствии в тканях ветвящего фермента). Недавние исследования Уилана и сотрудников [46] подтвердили, что гликоген IV типа очень близок амилопектину по йодной реакции (пики при 525 и 540 нм соответственно), по средней единице цепи (21,7 и 21,8), средней длине наружных (14,1 и 15) и внутренних (6,6 и 5,8) ветвей. Однако профили элюции расчлененных пуллуланазой полисахаридов оказались весьма различными. [c.114]

Необходимо отметить, что стерические препятствия затрудняют действие ферментов, гидролизующих 1,6-связи. Вероятно, именно этим объясняется то, что R-фермент практически не действует на весьма компактно построенный гликоген изоамилаза отщепляет только ограниченное число А-ветвей, находящихся на периферии молекулы, но при совместном действии с р-амилазой число отщепляемых А-ветвей сильно возрастает. [c.259]

Известны многочисл. ферменты (гл. обр. амилазы), катализирующие гидролиз К. Избират. гидролиз а-1 - 6-связей в К. может быть осуществлен под действием изоамилазы и пуллуланазы. При действии трансглюкозилаз нек-рых бактерий К. превращ. в циклич. олигосахариды-циклоамилозы (циклодекстрины). [c.498]

Однако бактериальная пуллуланаза имеет ограниченное применение для изучения гликогена, потому что хотя она и способна гидролизовать некоторые связи ветвлений в деградированном гликогене, она не действует или мало действует на недеградированную молекулу. Другой фермент этого типа — изоамилаза дрожжей [42] — гидролизует ограниченную часть внутренних связей амилопектина и гликогена. [c.112]

Пользуясь изоамилазой 2 Су1ор1юда, Уилан провел эксперименты, позволившие ему предложить новый вариант строения гликогена [45] (рис. 12). Общее число Л-ветвей, как и в схеме Мейера, здесь также приблизительно равно числу В-ветвей. На схеме видны спрятанные ветви В, к которым, по Уилану, могут быть присоединены и спрятанные цепи Л. В этой модели половина В-цепей несет вдвое большее число Л-цепей другая часть В-цепей не несет цепей Л, но несет цепи В. [c.112]

На рис. 13 показана схема экспериментальной проверки схем Мейера и Уилана. Гликоген обрабатывался фосфорилазой, а затем Р-амилазой. В образующемся фР-декстрине все цепи Л укорочены одинаково (до 2 мономерных звеньев). Если справедлива классическая схема Мейера, То обработка фр-декстрина изоамилазой должна давать цепи с отростками в виде 6-мальтозильных остатков, не подвергающихся действию Р-амилазы, что, однако, не соответствует фактам после указанной обработки Р-амилаза проявляла. свое действие в довольно значительном масштабе. [c.112]

При действии изоамилазы на фР-лекстрин в схеме Уилана наряду с В1-ветвями, резистентными к действию Р-амилазы (вследствие наличия 6-мальтозильных остатков), освобождаются линейные ветви Вг, [c.112]

Расчленение гликогена с помощью изоамилазы ytophaga с последующим фракционированием образовавшихся линейных цепей на сефадексе Г—50 позволило по профилю элюции характеризовать среднюю длину этих цепей в каждой фракции и распределение количества цепей по.фракциям. [c.113]

На рис. 14 представлены профили элюции с сефадекса 0—50 гликогена (/), фитогликогена (2) и амилопектина (5), обработанных изоамилазой. Видно симметричное распределение весовых количеств цепей гликогена около средней длины цепи 14, крторая фактически является средней длиной цепи гликогена. [c.114]

Рис. 14. Профили элюции с сефадекса <3—50 гликогена (/), фитогликогена (2) и амилопектина (5), обработанных изоамилазой

В 1974 г. Маршаллом и Уиланом [98] была определена длина цепей А и В большого числа амилопектинов и гликогенов. На полисахарид действовали -амилазой, отщепляющей мальтозные остатки и приводящей к образованию -декстринов, в которых остатки ( культи ) наружных ветвей содержали 2 и 3 глюкозных остатка. Далее на одну часть -декстрина действовали одной изоамилазой, расщепляющей все а-1,6-связи, кроме соединяющих с культями , имеющими 2 глюкозных остатка. Другую часть -декстрина обрабатывали изоамилазой -h пуллуланаза. Редуцирующая способность продукта действия изоамилазы, равная а, объясняется присутствием цепей В + 0,5 А (в -декстрине число культей с двумя и тремя глюкозными остатками статистически должно быть равным а так как изоамилаза не расщепляет а- [c.134]

Изоамилаза — фермент, открытый сравнительно недавно в дрожжах [183], гидролизует 1 6-связи в полисахаридах и в этом отношении сходен с растительным R-ферментом и животной амилр-1,6-глюко-зилазой. Однако в то время как первый действует только на амилопектин (и не ра сщепляет гликоген), а второй — лишь на единичные 1,6-связи, обнаженные в ветвистых полисахаридах после действия других ферментов, изоамилаза способна отщеплять длинные наружные А-вет-ви (см. с. 112) как в амилопектине, так и в гликогене. [c.198]

Как упоминалось (см. с. 112), некоторые разновидности пуллуланазы, выделенные из простейших, способных полностью расщеплять связи а-1,6 даже в таких сильно ветвистых глюканах, к каким относится t-ликоген. К ним относится изоамилаза ytophaga. [c.198]

Механизм действия изоамилазы, выделенной из дрожжей [117, 1181, представляет интерес в связи с разветвленной структуро11 молекулы амилопектина. Изоамилаза специфически атакует а-(1,6)-глюкозидную связь при ее действии на молекулу амилопектина освобождаются молекулы типа амилозы с короткой цепью. Поэтому при инкубации с изоамилазой клейкого рисового крахмала, состоящего по существу из чистого амилопектина, окрашивание с иодом изменяется, становясь синим, а предел р-ами-лолиза повышается (табл. 26). Это наблюдение было подтверждено английскими исследователями [75], которые также показали, что при одновременном действии изоамилазы и р-ами-лазы степень расщепления амилопектина возрастает. Однако полученные ими экспериментальные данные показывают, что изоамилолиз амилопектина протекает не полностью гидролизуются только внешние а-(1,6)-связи, внутренние же а-(1,6)-связи остаются интактными. Изоамилаза, атакующая а-(1,6)-связи избирательно, уникальна она оказывается весьма [c.146]

Амило-1,б-глюкозидаза ускоряет реакцию гидролиза 1,6-связей в молекуле крахмала (амилопектина), расщепляя, таким образом, молекулу крахмала в точках разветвления полиглюкозидной цепи и образуя олигосахариды с тем или иным числом остатков a-D-глюкозы в них в зависимости от длины отщепляемой цепи. Амило-1,6-глюкозидаза характерна для животных тканей. Однако это не значит, что ее нет в растительном мире у растений этот же фермент называют Л-энзимом, а у микроорганизмов—изоамилазой. [c.330]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология