Диизопропилфторфосфат ДФФ центра ферментов

Механизм действия гидролаз. Рядом авторов было высказано предположение, что общая для всех этих ферментов способность гидролизовать сложные эфиры и реагировать с диизопропилфторфосфатом обусловлена общим или по меньшей мере сходным химическим строением их активных центров [c.237]

Предполагают, что в эстеразном участке активного центра ацетилхолин—гидролазы нуклеофильной группой Т является гидроксил серина (активность фермента подавляется диизопропилфторфосфатом), активированный взаимодействием с имидазольным кольцом гистидина X (инактивация фермента при фотоокислении). Таким образом, по-видимому, в макроструктуре нативной молекулы ацетилхолин—гидролазы к серину [c.214]

Ряд данных подтверждает, что диизопропилфторфосфат действительно реагирует с активным центром фермента. Так, активность фермента ингибируется малыми количествами диизопропилфторфосфата и полностью подавляется при действии 1 моль диизопропилфторфосфата на [c.210]

Диизопропилфторфосфат и подобные соединения связываются в активном центре ферментов, которые используют остаток серина для гидролитического расщепления. [c.49]

ХИМОТРИПСИН, фермент класса гидролаз, относится к эндопептидазам. Мол. масса бычьего X. 25 300, р1 9, оптим. каталитич. активность при pH 7,5—8,0, состоит из трех цепей, связанных дисульфидными мостиками. По типу каталитяч. центра относится к группе серин-гистидиновых гидролаз. Образуется в поджелудочной железе позвоночных из предшественника (химотрипсиногена) последоват. отщеплением двух дипептидов в середине цепи. Катализирует гидролиз белков, пептидов, эфиров и амидов аминокислот проявляет специфичность к гидрофобным аминокислотам, участвует в расщеплении белков пищи в тонком кишечнике. Ингибируется ионами тяжелых металлов, борорг. к-тами, диизопропилфторфосфатом и др. Избирательно гидролизует белки пораженных тканей. Использ. для лечения тромбозов, ожогов. [c.654]

Принцип торможения ферментного действия находит применение для поиска новых лекарственных препаратов. Исследование действия ингибиторов на ферменты привело к установлению природы активного центра некоторых ферментов. Например, применение диизопропилфторфосфата позволило установить наличие ОН-группы серина в активном центре химотрипсина. [c.302]

Взаимодействуя с гидроксилом серина, входящим в активный центр, диизопропилфторфосфат необратимо связывается с ферментом и полностью подавляет его активность [c.208]

Важным методом изучения активного центра явилась реакция фосфоглюкомутазы с диизопропилфторфосфатом (ДФФ) — необратимым ингибитором фосфоглюкомутазной реакции. Этот ингибитор присоединяется к гидроксильной группе серина, находящегося в активном центре фермента. Образующееся производное с трудом подвергается гидролизу и после триптического гидролиза фермента фосфори-лированный остаток серина может быть обнаружен в одном из образующихся пептидных фрагментов. Определение последовательности аминокислот такого фрагмента привело к расшифровке структуры активного центра фосфоглюкомутазы, которая оказалась следующей тре — ала — сер — гис — асп —. [c.173]

Радиоавтография—важное средство при выделении пептидов, содержащих радиоактивный элемент нанример, таким способом можно обнаружить пептиды с радиоактивной серой (метиониновые пептиды) или пептиды с радиоактивным фосфором (при исследовании активных центров ферментов после реакции с меченым диизопропилфторфосфатом Шаффер и сотр.). [c.460]

Диизопропилфторфосфат блокирует активный центр холинэстеразы, фос-форилируя радикал серина (см. рис. 47). Так как образовавшийся диизо-пропилфосфосерин гораздо прочнее ацетилсерина и распадается очень медленно, активный центр фермента надолго выводится из строя. Это и аналогичные ему соединения образуют большую группу так называемых нервных ядов, ибо, приостанавливая гидролиз ацетилхолина, они резко нарушают деятельность нервной системы. Среди них широко известны многочисленные инсектициды и боевые отравляющие вещества. [c.112]

Диалкилфосфаты, в частности диизопропилфторфосфат, ингибируют ацетилхолинэстеразу в очень низких концентрациях и поэтому исключительно токсичны доза 0,5 мкг на 1 кг массы тела смертельна для животных. Диизопропилфторфосфат присоединяется к остатку серина в активном центре фермента он ингибирует не только ацетилхолинэстеразу, но и протеолитические ферменты, имеющие серин в активном центре. [c.545]

Регуляция путем ингибирования. Ингибирование ферментов может быть необратимым и в этом случае вызывается обычно внешними факторами, например, нагреванием, ядами, денатурирующими агентами. Примеры необратимого ингибирования - действие диизопропилфторфосфата на сериновые ферменты, связывание гидроксильных или тиоловых групп в активном центре ионами тяжелых металлов, например при взаимодействии пдра-хлормеркурибензоата с 8Н-группами остатков цистеина в АЦ фермента. Действие необратимых ингибиторов не регулируется. [c.34]

Как следует из данных табл. 17, наибольшей молекулярной активностью обладает ацетилхолинэстераза нервной ткани электрического органа В. ele tri us. Значение УмЗ-Ю минГ , найденное Нахманзоном и Розенбергом на основании определения молекулярного веса методом седиментации и измерения удельной активности очищенного препарата фермента, отличается от других данных, приведенных в таблице. Причина этого расхождения состоит в том, что другие авторы использовали для расчета величины молярной концентрации каталитических центров, независимо от того, сколько этих центров приходится на молекулу фермента. Так, Мичел и Крон [104] определяли концентрацию каталитических центров по количеству Р -диизопропилфторфосфата, присоединившегося к ферменту. Лоулер [106] применяла для этих целей [c.171]

Более обш им, хотя и менее надежным, является метод, основанный на использовании в качестве ковалентных меток активного центра не самих субстратов, а их аналогов квазисубстратов). В качестве квазисубстрата выбирают веш ество, молекулы которого настолько сходны с молекулами нормального субстрата, что могут образовать ковалентный фермент-субстратный комплекс. Однако они должны в то же время и отличаться от нормального субстрата настолько, чтобы этот комплекс либо вообш,е не разлагался, либо разлагался достаточно медленно. Этот метод оказался полезным при использовании диизопропилфторфосфата (ДФФ) в качестве квазисуб-стратной метки активного центра эстераз и протеаз (табл. 29). [c.198]

Как и в случае трипсина и змеиного яда, индуцированное калликреином образование кининов связано с эстеразной активностью ферментов. По-видимому, все три кининобразующих фермента имеют практически одинаковые активные центры , в которых, вероятно, имеется остаток серина, так как и трипсин, и змеиный яд, и калликреин инактивируются после обработки диизопропилфторфосфатом [907, 911]. Роша э Сильва [1832] высказал предположение, что брадикинин связан с входящим в состав белка остатком основной аминокислоты сложноэфирной связью, в создании которой, возможно, принимают участие производные фосфорной кислоты. Эллиотт [662] указывал, что, [c.109]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология