Высушивание инактивация ферментов

Культуральную жидкость (после глубинного метода) или экстракт (после поверхностного культивирования) концентрируют в вакуум-выпарных установках (при этом может происходить инактивация ферментов). Концентрирование растворов ферментов осуществляют также с помощью ультрафильтрации (на полых волокнах или на мембранных фильтрах), что существенно уменьшает потери по сравнению с выпарными методами. Из водных растворов ферменты осаждаются с помощью органических растворителей или солей. Сухие ферментные препараты получают в результате распылительного высушивания (что также сопровождается инактивацией). [c.111]

С целью уменьшения инактивации ферментов высушивание их растворов следует проводить при значениях pH, лежащих за пределами изоэлектрической точки высушиваемого белка, т. е. при условиях, обеспечивающих максимальную устойчивость растворов. [c.147]

Попытаемся объяснить действие некоторых солей и лактозы на уменьшение инактивации ферментов при вакуум-выпаривании и высушивании методом распыления. [c.152]

Основной причиной инактивации ферментов является изменение третичной структуры белковых молекул. Упаривание ферментных растворов под вакуумом (при t=37° ) способствует сохранению ферментативной активности. Применение при упаривании пеногасителей основано на их способности вытеснять пенообразователь из поверхностного слоя и разрушать тем самым структуру пены. Добавление некоторых солей повышает устойчивость белков при высушивании их растворов, что объясняется, по-видимому, созданием мостичных связей между белковыми молекулами, препятствующих. развертыванию пептидных цепей. [c.159]

Далее пробу в фарфоровой чашке ставят на 30—40 минут в сушильный шкаф при температуре 80—90 °С для инактивации ферментов. Вынув из шкафа, пробу развешивают в лаборатории на 5—6 дней, пока пластинки на ощупь не будут казаться сухими. После высушивания их помещают в ту же фарфоровую чашку, в которой взвешивали в первый раз, и досушивают в шкафу при температуре 60—65 С. Затем вычисляют первоначальную влажность. Перед химическим анализом пробу размалывают в муку и помещают в склянку с притертой крышкой. [c.245]

Частичное расщепление гликозидов происходит отчасти в самом растении, поскольку энзим, находящийся в нем (хотя и в разных клетках), приходит иногда с ним в тесное соприкосновение. То же, при известных обстоятельствах, происходит при высушивании растений или изолировании из них гликозидов. Поэтому часто гликозиды, полученные из высушенных растений, резко отличаются от гликозидов, находящихся в свежем растении. Следует отметить, что в высушенном растении ферменты обычно не проявляют своего гидролитического действия, но при увлажнении водой, особенно при 35—50°, происходит интенсивная реакция гидролиза. При низкой температуре, в присутствии влаги, действие ферментов замедляется, а при 0° почти не обнаруживается. Выше 70°, напротив, происходит инактивация и разрушение ферментов. [c.536]

Рассмотрим теперь важнейшие способы стабилизации в отдельности. Высушивание представляет собой классический способ сохранения белков. Если растворы ферментов высушивают при комнатной температуре, то их инактивация при этом обычно неизбежна высушивание же в условиях высокого вакуума при низкой температуре из замороженного состояния представляет [c.163]

Высушивание высокоактивного препарата измельчение. Сушка проводится в калориферной, но лучше в сублимационной сушилке. В первой — при температуре не выше 35—38 С. В этом случае массу периодически перемешивают. При лиофилизации продукт получается лучшим по виду, потери фермента вследствие инактивации меньше, растворимость полнее, измельчение проходит легче. [c.203]

Для иммобилизации ферментов применяют растворы полиэлектролитов, способные к фазовому разделению при определенных условиях. Запатентован способ иммобилизации большой группы ферментов (более 10) путем смешения растворов хитозана и фермента с последующим осаждением комплекса щелочью либо ионами SOl с полным сохранением ферментативной активности белка (пат. 4167447 США). Аналогичным способом с использованием хитозана была иммобилизована уреаза (пат. 80—74794, 1980 Япония). Из кислого раствора фермента и хитозана отливали пластинки, которые после высушивания выдерживали в боратном буфере. Полученная пластинка имела удельную активность 0,08 ед/см . С помощью водорастворимого карбоди-имида на хитозане иммобилизовали глюкозоизомеразу [102]. Таким образом, процесс иммобилизации не вызывает инактивации фермента, более того, такая обработка снижала степень инактивации фермента ионами металлов. [c.127]

Присутствие органических растворителей является помехой при определении активности почти всех ферментов. Поэтому при осаждении фермента растворителем (спиртом, ацетоном, диоксаном и т. п.) активность следует контролировать только после отделения осажденного белка, его растворения и удаления остатков спирта, ацетона и т. п. По сравнению с фракционированием в растворах солей обработка органическими, легко летучими веществами, имеет то преимущество, что получение готового препарата и его высушивание может быть вьшолнено сразу, без предварительного диализа растворов, а следовательно, без разбавления и частичной (дополнительной) инактивации, которые часто сопутствуют диализу. [c.146]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология