Вычисление кривых связывания

ВЫЧИСЛЕНИЕ КРИВЫХ СВЯЗЫВАНИЯ [c.368]

В табл. 4 приведены значения температурного коэффициента скорости вулканизации натурального каучука, определенные по скорости связывания серы. Температурный коэффициент скорости вулканизации может быть вычислен также по кинетическим кривым изменения физико-механических свойств каучука при вулканизации при разных температурах, например по величине модуля. Значения коэффициентов, вычисленных по кинетике изменения модуля, приведены в той же таблице. [c.76]

Реактивы 1) 20%-ная трихлоруксусная кислота 2) 0,4 н. НС1 3) гидразин солянокислый — 2,7 г солянокислого гидразина растворяют в 25 мл воды, приливают 100 мл этилового спирта и 15 мл разведенной НС (36 мл концентрированной НС разводят до 100 мл водой) 4) 0,1 %-ный раствор 2-4-динитрофенилгидразина в 2 и. НС1 5) перегнанный толуол 6) 10%-ный раствор Na Os 7) стандартные растворы пировиноградной кислоты, по которым строится кривая. Растворы для стандарта готовятся из 1 мг% раствора пировиноградной кислоты, титр которой установлен по связыванию бисульфита (см. стр. 390) и доведен точно до 1 мг%. В центрифужные пробирки с пришлифованными пробками берут по 0,1 мл, 0,2 мл и 0,25 мл этого стандартного раствора пирувата. Содержимое пробирок обрабатывается так же, как трихлоруксусные центрифугаты кровн при определении пировиноградной кислоты (прибавляется гидразин, пробы ставятся в термостат и т. д., см. далее). На основании данных, полученных при фотометрировании этих проб при 372 тц, составляется калибровочная кривая, которой дальше и пользуются при определении альфа-кетокислот в крови. Количество пировиноградной кислоты, определенное по стандартной кривой, нужно умножить на 3 для получения содержания ее в 0,5 мл крови, а для вычисления в мг% полученную величину умножают еще на 0,2 (умножают на 2 X ЮО и делят на 1000). [c.387]

Таким образом, для практического осуществления описанного метода необходимо, прежде всего, установить наличие линейной зависимости между концентрацией определяемых непрямым методом ИФА антител и регистрируемым значением оптической плотности. Для этого готовят серии разведений исследуемой иммунной сыворотки и изучают их связывание в непрямом методе ИФА. Обычно эти зависимости имеют, вид кривых с насыщением. Для проведения эксперимента выбираются разведения антисыворотки, лежащие в линейном диапазоне кривой. Для установления равновесной константы диссоциации комплекса Аг-Ат концентрацию антигена варьируют в диапазоне от 10 до 10 М. На рис. 20 приведен график для определения Кд комплекса ПХ-Ат. Однако вычисленные этим методом значения констант диссоциации комплекса Ат- Аг являются эффективными, поскольку при выборе уравнения не учитывается влияние взаимодействия антител с антигеном, сорбированным на твердой фазе, на равновесие в растворе. [c.162]

Суммарная концентрация мест связывания равна абсциссе точки пересечения с осью X кривой насыщения, представленной в координатах Скэтчарда. Концентрация мест связывания определяется тем точнее, чем больше экспериментальных данных использовано для вычисления точки пересечения изотермы насыщения с осью абсцисс. Если имеется несколько типов связывающих мест, то их концентрация определяется по точкам пересечения с осью абсцисс асимптот, проведенных через участки изотермы связывания, полученные при малых и больших концентрациях добавленного лиганда (см рис. 3.39). [c.400]

Перед построением кривой связывания находят концентрацию эпитопов [ ], фактически взаимодействующих с паратопами в данном опыте, для чего из исходных концентраций гаптена [Щ вычитают поправки, соответствующие концентрациям свободного гаптена в момент равновесия [A]i. Для обычной обработки требуется подсчитать г — молярное отношение связанного гаптена и антител [/ = ([ li—2[ft]i)M], При использовании какого-либо из уравнений (На) — (lie) необходимо вычислить величину oi = = 1— (2[/t]i/[ ]i). В последнем случае исходные величины относятся ко всему объему, и поэтому в вычислениях следует брать [E]i/2 и [Л]/2 (Примечание И). [c.31]

Максимальная скорость реакции достигается при промежуточной степени ионизации, когда пиридиновые остатки находятся частично в виде свободного основания, частично в катионной форме (рис. 1, кривая 2). Сравнение максимальной скорости этой реакции и скорости, ожидаемой нри том же значении pH для реакции с незаряженным субстратом, имеющим такую нге реакционную способность (эта скорость, вычисленная на основании скорости реакции с незаряженным полимером при высоком значении pH и рН-зависи-мости для реакции полимера с 2,4-динитрофенилацетатом, приведена на рис. 1, кривая 5), показывает, что происходит 80-кратное ускорение, которое можно приписать электростатическому взаимодействию катиоппого полимера с анионным субстратом. Это взаимодействие, по-видимому, приводит к связыванию субстрата и возрастанию его эффективной концентрации в области активных пиридиповых групп. Максимальной активностью обладает, естественно, частично нейтрализованный полимер, так как необходимо наличие как катионных групп для связывания, так и нейтральных для осуществления нуклеофильной атаки на субстрат [12]. [c.277]