Координаты Скэтчарда

Рис. 80. Комплексообразование одновалентного лиганда с одним центром свя зывания в координатах Скэтчарда

Рис. 28. Титрование активных центров иммобилизованных антител против IgG-человека конъюгатом IgG — ПХ (а) и представление результатов в координатах Скэтчарда (б)

Таким образом, представление результатов равновесного связывания в координатах Скэтчарда дает информацию о характере протекающего процесса и позволяет определить важные параметры лиганд-рецепторного взаимодействия — константу диссоциации и концентрацию центров, способных образовывать комплексы с нейромедиатором. [c.264]

Графическая зависимость результатов по связыванию в координатах Скэтчарда является одной из.наиболее информативных [c.189]

Рис. 136. Комплексообразование одновалентного лиганда с двумя независимыми типами центров связывания. Определение параметров по концевым участкам кривой связывания в координатах Скэтчарда

Для нахождения константы Kaz можно воспользоваться анализом процесса связывания лиганда Li в присутствии лиганда Ьг в координатах Скэтчарда, подробно рассмотренным выше. [c.258]

Если лиганд-рецепторное взаимодействие протекает согласно данной схеме, то зависимость концентрации лиганд-рецепторных комплексов от времени лиганд-рецепторного взаимодействия и от количества добавленного лиганда аналогична представленным на рис. 3.2 и 3.5, а график в координатах Скэтчарда представляет собой прямую линию (см. рис. 3.11, 3.14). [c.370]

Рассмотрим, как выглядит зависимость связывания лиганда ч в присутствии лиганда Ег в координатах Скэтчарда. Связь параметра Ri с Bip можно получить, используя соотнощение (10.119). Учитывая, что [c.244]

Qio, Q2a можно найти ИЗ графической зависимости процесса связывания в координатах Скэтчарда (рис. 134) по наклону асимптот к кривой R от Вр и отрезкам, отсекаемым этими асимптотами на осях ординат. Следовательно, количественный анализ кривой связывания сводится (К правильному отысканию местоположения асимптот. Для решения последней задачи обычно пользуются следующими методами. [c.287]

Анализ систем с неспецифическим связыванием проводят, как правило, в координатах Скэтчарда. Подставляя в (11.141) вместо Ьр выражение Вр/К, легко прийти ас аналитическому виду зависимости Й от Вр [c.293]

Для определения равновесных стехиометрических констант связывания процесса (12.1) —(12.2) можно воспользоваться подходом, подробно рассмотренным в главе 11. Суть подхода заключается в следующем путем экстраполяции концевых участков кривой связывания в координатах Скэтчарда к осям координат определяются соответствующие отрезки ОА, ОС, ОВ, ОЕ на этих осях и тангенсы углов наклона tg а, р конечных участков кривой (рис. 142). Аналогично тому, как сделано было выше для схемы (ПЛ) — (11.2), можно показать, что в случае протекания процесса [c.313]

Зависимость процесса комплексообразования лиганда с центром (ами) связывания в координатах Скэтчарда К = Вр/Рр — Вр [c.320]

График этого уравнения в координатах ([В]/[Р], [В]) представляет собой прямую. Экспериментальные данные по связыванию радиоактивных лигандов часто представляют именно в координатах Скэтчарда, полагая, что [ ] [Д], т.е. [Р] и [ ]. Параметры равновесного связывания получают, продолжая прямую до пересечения с осями на оси абсцисс отсекается отрезок, равный [Д], на оси ординат К[Я], тангенс угла наклона соответствует К. [c.264]

Однако часто связывание одного лиганда не описывается в координатах Скэтчарда. В отсутствие отрицательной кооперативности это бывает обусловлено наличием более одного участка связывания. [c.264]

Наиболее часто используют два вида преобразований двойные обратные координаты и координаты Скэтчарда (рис. 27). В двойных обратных координатах уравнение связывания преобразуют к виду 1/г = /(1/с) [c.80]

Опуская алгебраические преобразования (читатель может найти детальное описание аналогичной системы, например, в книге Варфоломеева С. Д. Зайцева С. В.), дадим окончательное выражение зависимости, описывающей связь параметров системы в координатах Скэтчарда [c.48]

Графики Скэтчарда. Кривая а связывания, представленная в координатах Скэтчарда на рис. 3.26а, ничем не напоминает график, приведенный на рис. 3.11. Участки кривой 6, представленных на рис. [c.371]

Однако, как следует из формул (3.1) и (3.10), чем меньше концентрация добавленного лиганда, тем больше время достижения равновесия в системе лиганд-рецептор . Поэтому при построении графика в координатах Скэтчарда может оказаться так, что равновесие рецепторного связывания достигнуто не во всех точках, использованных для построения графика. При этом график в координатах Скэтчарда отклоняется от прямой линии (рис. 3.29). Данное отклонение аналогично представленному на рис. 3.26, кривая б). [c.374]

Важно запомнить, что в случае, если равновесие по связыванию достигнуто не во всех точках, использованных для построения графика в координатах Скэтчарда, построенный график не является прямой линией. При этом [c.374]

Полученный в этих условиях график в координатах Скэтчарда проходит ниже прямой линии, проведенной через участки данного графика при достаточно больших концентрациях добавленного лиганда. [c.375]

Случай деградации лиганда представлен на рис. 3.33. При этом в кинетике ассоциации наблюдается возрастание, а затем уменьшение количеств связанных лиганд-рецепторных комплексов. Кривая насыщения, представленная в координатах Скэтчарда, располагается над прямой линией, проходящей через участки кривой, полученной при больших концентрациях лиганда. [c.378]

Рис. 91. Комплексообразование прогестерона с арогестеран-свя-зывающим глобуданон а 1-зависимость процесса равновесного связывания в координатах Скэтчарда 6 — кинетяка процесса ассоциации в условиях Ьо==ро, Во=0, представленная

Для графического представления данных по насыщению часто используют другую систему координат, известных под названием координат Скэтчарда (рис. 4-3). При этом по одной оси откладывают величину АЛ/[Х] (или у/[Х], а по другой —АЛ (или у), в результате чего точки ложатся на прямую. Из уравнения (4-10), непосредственно вытекающего из уравнения (4-9), следует, что отрезок, отсекаемый прямой на оси абсцисс, и наклон прямой непосредственно дают значения ЛЛтах Kf. [c.252]

В рамках предложенного Скэтчардом метода исследуется зависимость отношения концентрации комплекса Вр и концентрации свободного лиганда, обозначаемой Fp (то же, i to и Lp), от кон-це1нтр а ции-комплекса. Из уравиений (8.48), я (8.50) следует, что в условиях равновесного связывания по схеме (8.1) зависимость в координатах Скэтчарда определяется уравнением [c.189]

Таким образом, представление результатов равновесного связывания в координатах Скэтчарда и Хилла дает информацию о характере протекающего процесса и позволяет определить такие важные -параметры комплексообразования, как константа ассоциации и концентрация центров, способных образовывать комплекс с лигандом. [c.191]

При исследовании процессов комплексообразования лигандов с центрами связывания (рис. 89, а) наиболее часто результаты представляют в координатах Скэтчарда (рис. 89, б) и координатах Хилла (рис. 89, в). Методы определения параметров с помощью этих представлений рассмотрены выше. [c.201]

Заметим, что наличие линейной зависимости в координатах Скэтчарда (рис. 91, а) еще недостаточно для утверждения о протекании процесса по схеме (8.1), хотя и является существенным на это указанием. Дело в том, что прямолинейные зависимости в координатах Скэтчарда могут экспериментально наблюдаться и в более сложных случаях. Например, когда в процессе комплексообразования по схеме (8.1) имеет место инактивация центров связывания, то значения Ка, получаемые из графика Скэтчарда, имеют эффективный характер,-зависят от времени проведения процесса комплексообразования, однако резко отличаются от значений константы Ка, получаемой из кинетических экспериментов (Aranyi, 1979 Yeakley et al., 1980). Кинетические же эксперименты позволяют определить ki, k- и Ka=kilk-i в условиях, когда инактивацией центров связывания можно пренебречь (начальные времена проведения процесса), и, следовательно, дают возможность найти истинные значения констант. [c.205]

Рис. 9Й. Комплексообразование 1-оксибензнлпиндолола с Р-адренорецепторами эритроцитов индюка а — связывание в условиях равновесия aaiBiHOH-мость в координатах Скэтчарда (экспериментальные результаты Brown et al., 1976). б — кинетика процесса ассоциации (концентрации в пМ Qa=3,8 La.

Рис. 110. Комплексообразова-нве двух одновалентных лигандов с одниы типом центров связывания. Зависимость в координатах Скэтчарда

Рис. 1.40. Влияние соотношения стехиометрических констант на вид кривых процесса кооперативного связывания, представленных в координатах Скэтчарда (данные работы Rodbard and Bertino. 1973)

Таким образом, из проведенного рассмотрения видно, что анализ кривой связывания одновалентного лиганда с двумя независимыми типами центров комплексообразования в координатах Скэтчарда позволяет графически ввделить прямые, соответствующие процессам связывания лиганда с каждым отдельным типом центров. Как было показано выше, этими прямыми являются асимптоты к кривой связывания (уравнения (11.87), (11.88)). [c.283]

Перечислите основные исторические этапы изучения лиганд-рецепторного взаимодействия. 2. Дайте определение понятиям рецептор , лиганд , аффинность . 3. С помощью схемы опишите лиганд-рецепторное взаимодействие. 4. Получите уравнение, связывающее концентрацию ли-ганд-рецепторных комплексов с временем реакции лиганд-рецептор . 5. Какими уравнениями описываются процессы ассоциации и диссоциации лиганд-рецепторных комплексов Почему 6. Какова раз.мерность констант скоростей ассоциации и диссоциации, равновесной константы диссоциации Каковы наиболее часто встречаемые значения этих констант 7. Как можно определить константу скорости ассоциации и диссоциации 8. Как можно определить концентрацию рецепторов и их аффинность 9. Выведите уравнение Скэтчарда. 10. Каковы современные представления о структуре и функции рецепторов 11. Что такое принцип структурной комплиментарности 12. Сравните фермент-субстратное и лиганд-рецепторное взаимодействие. 13. Можно ли определить концентрацию рецепторов и их аффинность исходя из кинетических исследований 14. Всегда ли совпадают величины констант диссоциации, вычисленные по тангенсу угла наклона в координатах Скэтчарда и вычисленные как отношение констант скоростей диссоциации и ассоциации 15. Какие типы рецепторов вы знаете По какому принципу называются рецепторы 16. Дайте определение понятиям агонист и антагонист . [c.354]

Рис. 134. Кривая специфического связывания Н-налоксона препаратами мембран головного мозга крыс, представленная в координатах Скэтчарда. Условия Н-налоксон с удельной активностью 50 Ки/ммоль мембраны головйого мозга крыс В концентрации 1,6 мг белка/ мл Э С (экспериментальные результаты Зайцева, Курочкина, Псуоденко)

Рис. 11. Графическое определение Рис. 12. Графическое опредеелние константы связывания в координатах константы связывании в координатах Скэтчарда Хилла

Рис. 136. Комплексообразование одновалентного лиганда с одним (а) и двумя (б) независимыми типами специфических центров связывания прн наличии в системе процесса неспецифического связывания лнганда. Анализ процесса в координатах Скэтчарда. Кривые 1 на рис. а и б соответствуют общему связыванию, кривые 2 — процессу специфического комплексообразования

Таким образом, при положительной кооперативности кривая связывания в координатах Скэтчарда имеет вид выпуклой кривой. Следовательно, если экспериментально получают кривые такого вида, это может служить серьезным указанием на наличие положительной кооперативности в системе. Однако следует сделать одно замечание. Выпуклые кривые связывания в координатах Скэтчарда могут получаться и в отсутствие кооперативности. в тех случаях, когда для изучения комплексообразования используется помимо меченого лиганда немеченый лиганд со сродством, отличным, от меченого, и при этом в координатах Скэтчарда откладывается зависимость R =B p/F p от Вобщ=В р-Ь Вр,в меч (Taylor, 1975). [c.309]

Проведение экспериментов по исследованию процесса комплексообразования лиганда (ов) с центром (ами) связывания в условиях равновесия. Полученные, данные целесообразно представить в координатах Скэтчарда и Хилла. Это позволяет а) установить наличие кооперативных взаимодействий в системе или двух (или более) независимых типов центров связывания б) учитывая результаты экспериментов 2 и 3, выбрать схему процесса комплексообразования в) определить далее значения равновесной (ых) констант (ы) ассоциации и общей (их) концентрации (ий) центров связывания с последующим вычислением констант скорости ассоциации и диссоциации, используя результаты экспериментов 2 и 3 г) сравнить полученную (ые) равновесную (ые) константу (ы) с соответствующей (ими) константой (ами), определенной (ыми) только из кинетических экспериментов 2 и 3. Совпадение значе-чий этих констант может служить одним из критериев правильности выбора схемы процесса. [c.315]

В литературе часто эти координаты обозначают в символах B/F- B (В — от английского слова bound — связанный, F — free — свободный). Зависимость Скэтчарда имеет вид прямой с тангенсом угла наклона — К, отсекающей на оси ординат отрезок К [Ат]о, а на оси абсцисс [Ат]о (рис. 11). Графическая обработка экспериментальных данных в координатах Скэтчарда позволяет вычислить не только равновесную константу связывания, но и концентрацию активных центров антител [Ат]о в системе. [c.46]

Следует отметить, что координаты Иди-Хофсти отличаются от координат Скэтчарда только обозначением осей. Однако в радиорецепторных исследованиях наибольшее распространение получили именно координаты Скэтчарда, а в ферментативном катализе — координаты Иди-Хофсти. [c.352]

Графически экспериментальные данные по связыванию ДАДЛЭ с мембранами головного мозга крыс приведены на рис. 3.13. Из графика в координатах Скэтчарда (рис. 3.14) находим К, = 18 пМ/г ткани, Кс1= 1,8 нМ. [c.353]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология