Одновалентные антигены и антител

Л — образование комплекса антиген—антитело между поливалентным антигеном и одновалентным антителом (антитело взято в избытке) Б —образование преципитатов при неспецифической агрегации комплексов антиген-антитело В—растворимый комплекс при избытке антигена. [c.343]

Классические методы иммунохимического анализа основаны на образовании антителами в присутствии антигена преципитата (осадка), однако для визуальной регистрации процесса преципитации необходимы высокие концентрации компонентов и длительное время проведения реакции. Результаты такого анализа не всегда можно однозначно интерпретировать и, кроме того, в большинстве случаев они носят качественный или полуколичественный характер. Кроме того, для многих одновалентных антигенов (гап-тенов), например гормонов, лекарственных соединений, эти методы непригодны. [c.5]

При использовании аффинной хроматографии для выделения антигена из раствора используют антитела, иммобилизованные на нерастворимом носителе. При этом ключевым параметром иммуносорбции становится аффинность моновалентного взаимодействия [17]. Благодаря высокой концентрации МКА, присоединенных к гелю, связывание антигена, как правило, происходит достаточно быстро, и лишь в исключительных случаях кинетические параметры иммуносорбции требуют скорости потока меньшей, чем обычно используемая — один объем колонки в час. Выявление МКА обычно основано на поливалентном связывании с антигеном (см. рнс. 5.1), в котором участвуют как низко-, так и высокоаффинные антитела. Однако для аффинной хроматографии требуются антитела, обеспечивающие моновалентное связывание. Поэтому среди имеющихся МКА необходимо провести дополнительный отбор препаратов, обладающих нужной аффинностью. Это можно сделать, например, по способности МКА вызывать иммунопреципитацию антигена или по торможению растворимым (одновалентным) антигеном связывания с поливалентным антигеном, иммобилизованным на поверхности клеток или пластиковых панелей [17]. На рис. 5.2 схематично изображены взаимодействия, возможные при реакции торможения. Очевидно, торможение происходит лишь в том случае, если время диссоциации 50% моновалентных связей примерно равно или превышает время проведения самого анализа. Антитела, у которых 1./, составляет более 10 мин. [c.171]

Как мы отмечали в разд. II, уравнения (3) и (4) могут давать верное представление о связывании одновалентного антитела с одновалентным или поливалентным антигеном в растворе или иа поверхности клеток, а также о связывании двухвалентного антитела с одновалентным антигеном в растворе. Реакции между двухвалентным антителом и двухвалентным или поливалентным антигеном в растворе или между двухвалентным антителом и одно- илн поливалентным антигеном клеточной поверхности ие бывают, как правило, одноэтапными, и аппроксимации возможны лишь при ряде ограничений. [c.29]

Преципитацию антигена антителом можно объяснить образованием сетки геля в результате взаимодействия двухвалентного антитела с поливалентным антигеном. Рост такой сетки может быть ингибирован избытком любого из реагентов, как это схематически изображено на рис. 131. Как и следовало ожидать, фрагменты одновалентного антитела могут конкурировать с двухвалентным антителом за гомологичный антиген, предупреждая таким образом преципитацию. Измеряя молекулярный вес комплекса, образующегося при насыщении антигена фрагментами одновалентного антитела, можно также определить функциональность антигена [1013]. [c.341]

Наши представления о строении антител были сильно расширены в последние годы в результате открытия их чрезвычайно специфического расщепления в присутствии протеолитических ферментов и восстановителей [1008, 1009]. Два фрагмента молекулярного веса 45 000, по-видимому, идентичны и ведут себя подобно одновалентным антителам, а третий фрагмент (молекулярного веса 155 000) не имеет сродства к антигену. Физиче- [c.340]

Ранее для количественного описания эффективности взаимодействия антиген — антитело за основу была взята простая модель взаимодействия одновалентного антигена и одновалентного антитела. Но так как молекула антитела имеет несколько антигенсвязывающих центров и, кроме того, способна взаимодействовать с несколькими антигеннымй детерминантами молекулы антигена, то такая характеристика образования иммунохимического комплекса является весьма упрощенной. [c.37]

Определение констант скоростей комплексообразования с использованием меченых реагентов. Этот метод, нашел большое применение в связи с развитием высокочувствительных методов иммуноанализа, основанных на использовании меченых реагентов радиоим-мунологического, иммуноферментного и других -методов. Кинетические закономерности простейшей схемы (3.38) взаимодействия антиген — антитело (моноклональные антитела — одновалентный антиген) описывает система дифференциальных уравнений [c.52]

Уравнением (2) можно точно описать равновесие реакций между одновалентным антителом и одновалентным антигеном (растворенным или связанным с клеткой) или между двухвалентным антителом и одновалентным антигеном в растворе. Оно также справедливо для реакции двухвалентного антитела и двухвалентного антигена в растворе, если одни из двух реагентов имеется в избытке (например, если можно пренебречь концентрацией комплексов, образованных антителом и антигеном с помощью лишь одного связывающего участка). Однако, как правило, это уравнение не годится для описания взаимодействия двухвалентного антитела с одновалентным или двухвалентным антигеном, связанным с клетками, так как в этом случае величина /С ие всегда будет независнмой от концентрации реагентов (разд. V). Однако при определенных условиях уравнение (2) может быть применено и в этих случаях. Некото рые связанные с этой проблемой вопросы обсуждаются в разд. V. [c.14]

Присоединение антигена к В-лимфоциту приводит к его обратимому параличу или инактивации благодаря возникновению сигнала 1. Сигнал 1 развивается при бимолекулярной реакции между одновалентным антигеном и соответствующим рецептором В-клетки. Он чрезвычайно быстро (возможно, уже через секунду) оказывает на клетку парализующее действие. Индукция иммунной реакции возникает в том случае, если на В-клетку после сигнала 1 подействует еще и сигнал 2. Первоначально предполагалось, что сигнал 2 вызывают антитела, которые фиксированы на поверхности Т-клеток и специфичны для антигена, присоединившегося к В-лимфоцитам. В дальнейшем была допущена возможность передачи сигнала 2 на небольшое расстояние при помощи образуемого Т-лимфоцитами медиатора. В некоторых случаях сигнал 2 обусловлен действием антител не против антигенов, присоединившихся к поверхности В-лимфоцитов, а против собственных антигенов его поверхности (Brets her, ohn, 1970 Brets her, 1975). [c.138]

Схемы, изображенные на фиг. 47 и 48, показывают, что каждая молекула антитела, даже в том случае, если для иммунизации используется многовалентный антиген, обладает только одной специфической группой, способной связываться с антигеном. Представление о том, что антитела являются одновалентными [67, 79], подкрепляется следующим наблюдением. Дифте- [c.340]

Предполагают, что для прочного связывания lq необходима определенная конформационная перестройка IgG. Это предположение базируется на том, что IgG в форме комплекса с антигеном, а также IgG, агрегированный иными способами (прогреванием при 63°С, сшивкой бифункциональными реагентами), прочно связывает lq. IgM прочно связывает lq также после его агрегации. Но это условие не является обязательным. Как убедительно показали Х.-Ч. Чианг и М. Кошланд (Н.— h. hiang, М. Koshland, 1979), даже комплекс IgM-антител с одновалентным гаптеном имеет высокое сродство к lq. Хотя агрегации IgM не происходит, наблюдаются вызванные гаптеном изменения конформации иммуноглобулина, в том числе F -участка молекулы. Все эти данные позволяют предполагать лишь, что связывание lq — кооперативный процесс, и прочная фиксация достигается скорее всего в случае соединения lq с иммуноглобулинами по нескольким точкам. Так как в молекуле IgG два центра для связывания lq, но стерически доступен, по-видимому, только один, для связывания lq по нескольким точкам необходимо сближение в пространстве нескольких эффекторных центров. Это достигается при агрегации IgG или его фиксации на нерастворимом носителе. В молекуле IgM пять доступных для lq центров. Поэтому кооперативный эффект при взаимодействии может быть достигнут даже при формировании эквимолекулярного комплекса, но при условии, что все центры для связывания lq в молекуле IgM будут располагаться в пространстве наиболее благоприятным образом для фиксации лиганда. Этому, очевидно, способствует гаптен, связывающийся с IgM-антителами. [c.136]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология