Линии гибридные

В F при скрещивании выровненных инбредных линий гибридные потомки обычно также представляют выровненный материал, что соответствует закону Г. Менделя о единообразии гибридов F. Последующее расщепление создает гетерогенность. [c.557]

Цель этой стадии — отобрать линии гибридных клеток, образовавшиеся из одной клетки, и осуществить рассев гибридом на фидерный слой клеток селезенки. [c.141]

Методика получения линий гибридных клеток представлена на приводимой ниже схеме. [c.403]

Для выделения отдельных клонов гетерогенные смеси гибридных или лимфоидных опухолевых клеток высевают в мягкий агар (о получении линий гибридных клеток см. гл. 31). Клоны, образующие антитела к БЭ, выявляют по гемолитическим пятнам, возникающим в слое агара с эритроцитами. [c.407]

Линии гибридных клеток Номера хромосом человека [c.67]

В результате гибридизации удается получать гибриды клеток с хозяйственно ценными свойствами. Пока практически единственный пример таких гибридов — это гибридомы, продуцирующие моноклональные антитела [6]. Однако можно ожидать создание линий гибридных клеток, обладающих способностью продуцировать другие ценные биологические вещества. Получение таких линий может быть достигнуто путем слияния дифференцированных клеток-продуцентов ценных веществ с опухолевыми клетками, имеющими такое же происхождение, что и клетки-продуценты. [c.176]

Картирование хромосом, основанное на получении гибридных соматических клеток. Для локализации клонированного сегмента в определенной хромосоме используют межвидовые соматические гибриды. Обычно такие гибридные соматические клетки содержат полный набор хромосом одного вида (реципиента) и только одну или небольшое число хромосом второго вида (донора). Чтобы судить о наличии данного гена в определенной донорной хромосоме, анализируют группу разных линий гибридных клеток и устанавливают корреляцию между присутствием тестируемого гена и наличием специфической хромосомы. [c.336]

Конечно, взаимодействие наследственных факторов на самом деле значительно сложнее, но основную роль играет гомозиготность инбредных линий по многим рецессивным вредным генам и то обстоятельство, что, как правило, различные инбредные линии содержат совершенно разные группы подобных генов. При скрешивании инбредных линий получают растения Рь у которых обычно вредное влияние рецессивных ге- нов, приобретенных от одной из родительских линий, компенсируется доминантными генами мощности, приобретенными от другой линии. Гибридная мощность обеспечивается, таким образом, в результате комплементарных, т. е. дополняющих друг друга, реакций, а подобного рода реакции постоянно протекают в исходной популяции. Зародышевые клетки, соединяющиеся в этой популяции при оплодотворении, обычно настолько различны, что взаимно компенсируют имеющиеся у них дефекты и обеспечивают конституциональную крепость потомства. [c.285]

Первые опыты по переносу генетического материала осуществляли с помощью слияния целых клеток [1]. Такая техника нашла применение при изучении процессов дифференци-ровки и канцерогенеза, однако наиболее успешно ее использовали при картировании генов человека [2] и получении моноклональных антител [3]. Известно, что сформировавшийся при слиянии клеток грызуна и человека межвидовой гибрид спонтанно теряет человеческие хромосомы [4]. Как правило, утрата хромосом происходит случайным образом, и это позволяет конструировать гибридные линии клеток, в которых содержатся разные хромосомы человека. Корреляция между присутствием конкретной хромосомы человека и экспрессией генетического маркера является основой для отнесения соответствующего гена к определенной группе сцепления. Из 1300 генов человека, картированных на сегодняшний день, примерно треть локализована на конкретных хромосомах с помощью методов генетики соматических клеток [5]. Процесс утраты хромосом у внутривидовых гибридов происходит не так быстро, как у гибридов межвидовых [6]. При слиянии клеток мышиной мие-ломы с клетками селезенки формируются стабильные линии гибридных клеток. Их характеризует иммортальность (способность к неограниченному делению), унаследованная от миелом- [c.8]

В 50-е гг. Вернет, Ерне, Ледерберг и Тол1мейдж постулировали, что каждый В-лимфоцит запрограммирован на синтез антител одной определенной специфичности, относящихся к тому же идиотипу, что и молекулы, экспрессированные на поверхности данного лимфоцита в качестве антигенных рецепторов. В настоящее время это положение убедительно доказано. Если животное иммунизируют каким-либо антигеном, то начинается клональная экспансия и дифференцировка тех В-лимфоцитов, которые распознают этот антиген. В результате образуются плазматические клетки, которые продуцируют антитела. Если бы индивидуальные антиген-реактивные клетки лимфоидной ткани иммунизированного животного удалось длительное время поддерживать в культуре, то надосадочная жидкость содержала бы однородные молекулы антител (моноклональные антитела), которые были бы способны распознавать только один или несколько близкородственных антигенов. К сожалению, потомство индивидуального реактивного лимфоцита не удается длительное время выращивать в культуре для получения больших количеств моноклональных антител (МКА). Впервые эта проблема была решена Келером и Мильштейном в 1975 г. [1]- Исследователям удалось трансформировать антителообразующие лимфоциты путем слияния их с клетками иммортализованной клеточной линии с последующим клонированием индивидуальных гибридных клеток. Таким образом были получены линии гибридных клеток (гибридомы), каждая из которых продуцировала молекулы антител одного и того же идиотипа. [c.116]

Перед сменой среды панели с клетками следует просмотреть род микроскопом. Морфология культур оиисана в методике А. Если клетки не повреждаются во в ремя смены среды, то начавшие расти гибридомы должны образовать достаточно обособленные колонии. Если рост колоний наблюдается в большей часги лунок, то необходимо подсчитать число инди-ви дуальных колоний в каждой лунке. Если лунка содержит более одной колонии, то, проводя скрининг, следует, не откладывая, отбирать и клонировать линии гибридных клеток. В целом гибридомы, растущие в панелях ostar, должны быть клонированы как можно раньше, поскольку в данном случае - в отличие от того, когда используют панели для микротитрования) в лунках обраЗ)уется более одной колонии. Полезно руководствоваться следующим соображением если в /з лунок или менее наблюдается рост клеток, то в большинстве случаев в лунках представлен рост клонов. [c.131]

Для получения гибридомы, образующей антитела N 5/1, мышей иммунизируют перевиваемыми лимфобластами человека, берут клетки мышиной селезенки и проводят их слияние с клетками мышиной миеломы, а затем отбирают полученные гибриды. В качестве реагента, содержащего моноклональные антитела, используют разбавленный 1 10 нли 1 20 супернатаит среды, в которой культивировалась данная линия гибридных клеток. Чтобы избежать спонтанного Т-клеточного розетирова-иия, образование розеток с участием моноклональных аитнтел к DR-антнгенам проводят с эритроцитами быка (ЭБ), а ие барана. [c.202]

Примечание 11. Экспериментальные результаты лучше всего заносить в специалБиые бланки. Если вычисления будут производиться с помощью компьютера, то достаточно записывать необработанные данные в ином случае пересчитанные значения можио вносить в тот же бланк. На рис. 2 представлен пример оценки количества и качества моноклонального угглобулина анти-ТНФ, синтезированного линией гибридных клеток. [c.31]

Метод позволяет получать линии гибридных клеток, секрети-рующие моноклональные антитела различных классов и определенной специфичности. [c.402]

В качестве источника ДНК хромосомы 19 были использованы две линии гибридных соматических клеток (грызун-человек) GL12-42 (ИБХ РАН) и UU5HL-58 (LLNL, США), содержащие в качестве человеческого компонента только хромосому-19. [c.73]

Для конструирования клонотеки нам была передана проф. К.-Х. Гржеши-ком (ФРГ) линия гибридных соматических клеток RuRag 14-4-7-44, где хромосома 7 представлена малым плечом со своей теломерой и другой теломерой, близко сцепленной с центромерой, а геном мыши - гетероплоидным набором хромосом, близким к 4п. Менее 10% клеток линии RuRag 14-4-7-44 после размножения культуры имеют малое плечо 7 хромосомы. Исходя из размеров генома мыши и 7р хромосомы следовало ожидать, что не более 1 из 2000 полученных YA -трансформантов будут содержать ДНК человека при рутинном методе клонирования. [c.77]

Для гибридного дисгенеза нужен полноразмерный Р-элемент. В укороченных Р-элементах последовательности, необходимые для транспозиции и вырезания, делетированы. Однако Р-функции коротких элементов могут восполнять в одних и тех же клетках полноразмерные /и/ янс-элементы. Рассмотрим. например, мутацию sn" в локусе singed, вызванную встраиванием короткого Р-элемента. Мутантные мухи имеют необычные щетинки. С помощью генетических манипуляций можно получить мух, несущих мутацию sn , но не содержащих других Р-элементов. При скрещивании таких самцов с самками из М-линии гибридного дисгенеза не наблюдается, и мутация sn" оказывается стабильной. Одпако при введении в геном полноразмерного Р-элемента эта мутация становится нестабильной. Таким образом, целый Р-элемент обеспечивает вырезание, находясь в г)1ранс-тложеши по отношению к дефектному элементу (рис. 10.16). [c.239]

Если отобранные гибридные клетки выращивать в неселективных условиях, то донорные хромосомы в конце концов утратятся в силу более или менее случайных причин. Но клоны гибридных клеток можно получить в любой момент и идентифицировать резидентные донорные хромосомы по характеру исчерченности, выявлению ранее картированных последовательностей ДНК или ферментативных мар1жров либо (последнее более предпочтительно) с использованием всех трех методов. Таким способом можно получить банки различных линий гибридных оеток, каждая из которых содержит определенный набор донорных хромосом. [c.337]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология