Селенометионин

Рис. 1.43. Факторы аномального рассеяния f, f" кристалла селенометионино-вого тиоредоксина Е. соИ, измеренные вблизи края поглощения селена

Переход к новому источнику рентгеновского излучения ослабил требования, предъявляемые к размерам кристаллов, что особенно важно в структурном анализе высокомолекулярных белков и сложных комплексов, имеющих крупные элементарные ячейки. Сплошной спектр синхротронной радиации и легкость выбора любой длины волны монохроматического излучения сделали возможным подойти к решению фазовой проблемы и разработать метод мультиволновой аномальной дифракции, требующий для решения фазовой проблемы лишь одного кристаллического образца. Существенным дополнением к этому методу стал генно-инженерный способ получения в ауксотрофных клетках аминокислотных последовательностей, в которых все остатки метионина заменены на селенометионин. Использование [8е-Ме1]-белков не только освобождало [c.74]

Поскольку селен и его органические производные играют важную роль в биохимических реакциях, возникла необходимость в разработке метода ускоренного количественного анализа селеноцистина и селенометионина [158—161]. [c.76]

На рис. 9 показана кривая анализа селеноцистина и селенометионина в присутствии других аминокислот. Анализ выполнен при скорости подачи буфера и нингидринового реагента соответственно 70 и 35 мл/ч. В течение всего анализа температура колонки была равна 30 °С, а давление — 23,2 атм. Проба содержала по 0,1 мкмоль каждой аминокислоты результаты анализа регистрировались самописцем со шкалой на 4,5—5,0 мВ. [c.77]

Адапторная гипотеза объясняет также два важных экспериментальных факта. С одной стороны, для любого полипептида, однозначно определяемого соответствующим геном, включение природных, но неподходящих для данного места аминокислот — крайне редкий факт. С другой стороны, многие аналоги аминокислот, например такие, как селенометионин (аналог метионина), тг-фторфенилаланин или тиенилаланин (аналоги фенилаланина), 5-окситриптофан или азатриптофан (аналоги триптофана) и ряд других, легко включаются в места, предназначенные для тех аминокислот, аналогами которых они являются. Таким образом, аминокислоты могут включаться в места, предназначенные для их природных аналогов, только в том случае, если им удастся обмануть активирующий фермент. [c.522]

Рассмотренные в этой главе исследования, по-видимому, не оставляют сомнений в том, что в 1990-е годы рентгеноструктурный анализ белков, по-прежнему сохраняя высокий темп экстенсивного развития, приступил к решению принципиально новых задач, представляющих первостепенный интерес для молекулярной биологии. Основная, если не единственная, причина наметившегося качественного изменения возможностей кристаллографии макромолекул связана с использованием синхротронной радиации. Переход к новому источнику рентгеновского излучения, во-первых, ослабляет требования, предъявляемые к размерам кристаллов, что особенно важно в структурном анализе высокомолекулярных белков и их комплексов, имеющих крупные элементарные ячейки. Во-вторых, сплошной спектр синхротронной радиации и легкость выбора любой длины волны монохроматического излучения дали возможность по-новому подойти к решению фазовой проблемы и разработать метод мультидлинноволновой аномальной дифракции, требующий для фазирования одного кристаллического образца. Существенным дополнением метода МАД стал способ рекомбинантного получения в ауксотрофных клетках белков, в аминокислотных последовательностях которых все остатки метионина заменены на селенометионин. Использование [Se-Met] белков не только освобождает рентгеноструктурный анализ от длительной рутинной процедуры приготовления нескольких изоморфных белковых производных тяжелых атомов, но практически снимает саму проблему изоморфизма. [c.163]

При однократном внутрижелудочном введении 8е, как селенита или селенометионина, животным, содержавшимся на 5е-де-фицитной диете, нормальный уровень активности фермента в плазме, почках, желудке и печени восстанавливался в течение 48 часов [293, 297]. По вопросу о том, каким образом селен включается в состав молекулы фермента, существует две точки зрения. В соответствии с первой, селен модифицирует неактивный белок-предшественник уже после завершения его синтеза (пост-трансляционное включение) [304]. Однако более глубокое экспериментальное подтверждение, по-видимому, имеет точка зрения, что включение Зе в белковую молекулу происходит в ходе нормального трансляционного процесса [293]. [c.41]

Кроме глутатиона, являющегося универсальным донором водорода для селен-содержащих и селен-независимых пероксидаз, в аэробных организмах присутствует ряд других низкомолекулярных соединений, часто объединяемых термином — биоантиоксиданты . Введение данного термина обусловлено тем обстоятельством, что при исследовании биологических объектов выявлены вещества, ингибирующие свободнорадикальные реакции в различных модельных системах и организме в целом, но не обладающие или обладающие в незначительной степени способностью тормозить такие реакции в простых химических системах, т. е. не являющиеся классическими антиоксидантами. В качестве примера могут быть приведены упоминавшиеся выше соединения селена — селенит и селенометионин. Известные в настоящее время биоантиоксиданты могут быть классифицированы по механизму действия следующим образом [c.45]