Цитохимия

Методы биохимии и цитохимии нуклеиновых кислот растений [c.1]

Одной из первоочередных задач современной биохимии и цитохимии НК является разработка методов оценки структурного состояния хроматина непосредственно в клетке. К таким методам можно отнести описанный в книге спектральный люминесцентный микроскопический метод определения состояния [c.18]

В каждом случае, естественно, оснащение лаборатории зависит от аспекта работ и необходимости постановки тех или иных методов. В тех случаях, когда работы по НК ставятся попутно в связи с решением других вопросов биохимии, физиологии или морфологии и использованием готовых более или менее стандартных методов биохимии и цитохимии НК, необходимость в создании специальной лаборатории или группы отпадает. [c.23]

Все эти фракции нуклеиновых кислот отличаются разной растворимостью и экстрагируемостью, неодинаковой доступностью для реагентов, применяемых в цитохимии и т. д. Учитывая это обстоятельство, при количественных цитохимических анализах не следует увлекаться схемами одновременного определения содержания всех форм НК. < [c.129]

Таковы основные особенности цитохимии НК. Четкое представление о них позволит в каждом случае находить рациональную схему исследования и добиваться хороших результатов. [c.130]

Самыми ответственными этапами в цитохимии НК являются обнаружение, идентификация, определение содержания и изучение состояния НК в клетке. [c.130]

Для этой цели особенно широко используются основные красители. В цитохимии ДНК незаменимой является классическая реакция Фельгена. За последнее время все более широкое применение находят методы люминесцентной микроскопии и ауторадиографии НК. [c.130]

Реакция Фельгена, безусловно, представляет собой наиболее специфичный из всех существующих в цитохимии методов идентификации ДНК-Она с успехом может быть применена и в количественной цитохимии ДНК, но для этого необходим очень внимательный и строгий анализ описанных выше условий проведения этой реакции. [c.144]

Цитохимия нуклеиновых кислот с применением основных красителей [c.149]

Таким образом, при работе с основными красителями источниками ошибок количественной цитохимии могут быть 1) неполнота извлекаемости НК экстрагентами и неполнота удаления РНК рибонуклеазой при выявлении неспецифического связывания красителя 2) недоступность части НК красителям вследствие блокирования их фосфатных групп аминогруппами белка или вследствие упаковки молекул НК белками и белково-липид-ными структурами (РНК в рибосомах, РНК и ДНК в компактном хроматине и т, д.) 3) неудачный подбор pH раствора красителя 4) неполная фиксация. [c.151]

Способность метилового зеленого избирательно связываться нативными молекулами ДНК давно используется в цитохимии этой НК. Прямому количественному определению, как отмечалось выше, мешают белки. Для деблокирования НК рекомендуется ацетилирование белковых аминогрупп [11]. [c.154]

При обработке препарата галлоцианин-хромовыми квасцами краситель равномерно проникает во все структуры клетки, содержащие НК, что создает благоприятные условия для фотометрирования окраски. Все это дает основание считать возможным применение галлоцианина в количественной цитохимии НК и особенно ДНК. [c.156]

На яДерной РНК, прочно связанной в хроматине и блокированной белками, Азур В, несомненно, даст спектр поглощения, отличающийся от спектра поглощения этого же красителя, но адсорбированного ядрышковой или цитоплазматической РНК. Все эти обстоятельства говорят за то, что Азур В может быть с успехом использован для изучения структурного состояния НК в клетке. Использование Азура В в количественной цитохимии НК по той же причине пока затруднено. [c.159]

ЦИТОХИМИЯ, изучает хим. особенности клеточных структур. При этом, в отличие от биохим. экспериментов, исследуются точно идентифицированные под микроскопом клетки, сохраняющие свои функциональные связи в ткани. Первые цитохим. работы были выполнены Ф. Распаем в нач. 19 в. Интенсивно Ц. развивается с 50-х гг. 20 в. В то время различали два уровня исследования более точный, клеточный (собственно Ц.), и тканевый (гистохимия). Ныне эти науки сливаются и термины <Ц. и гистохимия часто использ. как сияонимы. [c.687]

Микрохимия, см. Цитохимия Микроцистистоксин 5/1051 Микроэлементы 3/1 , 171-173, 475, 789 1/121, 550 5/54. См. также Микроудобрения и их отдельные виды [c.651]

Адсорбция основных красителей структурами протоплазмы в слабокислой среде происходит главным образом за счет НК. Используя основные красители в сочетании с обработкой препарата нуклеазами, можно выявлять НК в клетке, определять их локализацию и содержание. В цитохимии НК обычно используют пиронин, метиловый зеленый, галлоцианин, толуидиновый синий, метиленовый синий, Азур В. [c.149]

Цнтостатики 1/64 2/1156 4/220 Цитотоксичные вещества 4/1195 Цитофотометрия 5/769 Цитохимия 5/769, 770 Цитохром-с-оксидаза 5/770, 771, 772, 1054 1/558 2/241, 242, 968 3/50, 51, 517, 670 Цитохром-Ьз-редуктаза 3/50 Цитохромы 5/772, 34, 109, 345, 346, 770,771,773 1 /470,472,475 2/241, 968 3/36, 50, 51, 503, 622, 669, 670, 697 4/144, 524, 541,861 Цитраконовая и мезаконовая кислоты 5/773 3/570 [c.752]

Глик Д Методика гисто- и цитохимии М, ИЛ, 1950, стр. 20, 144, 252. [c.177]

С помощью методов радиоавтографии [6, 17] или иммуно-цитохимии [26, 27, 11, 67] удалось определить места на шероховатой эндоплазматической сети (ШЭС), где происходит синтез запасных белков семян. Белки, синтезированные на полирибосомах, связанных с ШЕС, сразу проходят через мембрану сети благодаря наличию на N-конце полипептидов с гидрофобными свойствами короткой последовательности, называемой сигнальной [15, 45]. Существование такой последовательности в настоящее время установлено у бобовых и злаковых [18, 23, 32]. При появлении (в просвете эндоплазматической сети) этой последовательности она отделяется от новосинтезированной цепи специфической пептидазой. В процессе прохождения через мембраны шероховатой эндоплазматической сети некоторые белки могут также становиться гликоксилированными [62, 5, 65]. Таким образом, механизм анаболизма запасных белков очень сходен с механизмами, описанными для секреторных клеток животных [70] и растений [46]. [c.135]

Наиболее разработанными методами количественной цитохимии НК к настоящему времени являются методы цитофотометрии, основанные на изм ерении поглощения света веществами клетки или продуктами гистохимических реакций. [c.130]

Глик Д., Методика гисто- и цитохимии, перев. под ред. В. А. Дорфма- [c.179]

Прочность комплекса ДНК-фуксинсернистая кислота, сте-хиометричность отношения между компонентами этого комплекса и относительная специфичность, казалось бы, придают реакции Фельгена надежность и позволяют использовать ее как стандартный метод во всех случаях количественной цитохимии ДНК. В действительности применение этой реакции в цитохимии не менее сложно, чем использование основных красителей, и связано с рядом обстоятельств. [c.141]

Основные научные работы посвящены изучению ферментов обмена белков и нуклеиновых кислот, энзимологии генетических процессов, цитохимии. Одним из первых доказал существование регуляции синтеза белков на уровне генов. Доказал, что наряду с известным реирессорным механизмом в клетках действует и позитивный механизм регуляции транскринции, основанный на способности белков (в частности, РНК-полимеразы) узнавать определенные нуклео- [c.539]

В основу книги Методы биохимии и цитохимии нуклеиновых кислот растений положены методы и схемы исследований нуклеиновых кислот, разра1ботавные или усовершенствованные в нашей ла боратории. Сюда следует отнести 1) схему анализа нуклеиновых кислот с одновременным определением других фосфорных соединений 2) количественный анализ нуклеиновых кислот по пуриновым основаниям 3) схему фракционного экстрагирования нуклеиновых кислот для выявления гетерогенности ДНК и РНК 4) обнаружение, получение и определение количественного соотношения фракций лабильной, стабильной [c.3]

В изучении НК применяются различные методы молекулярной биохимии и биофизики, электронной микроскопии, изотопного анализа, цитохимии, иммунохимии. Все это накладывает определенный отпечаток на характер организации лабораторных исследований в области НК. Поэтому лаборатория, которая ставит перед собой цель решить ту или иную задачу в области НК, должна иметь специалистов разных отраслей науки. Так, для решения задач биологического характера, например для исследования НК в связи с проблемами устойчивости растений к неблагоприятным факторам питания, эмбриогенеза и т. д., необходимы биохимик, цитохимик и биофизик (или только два первых). [c.22]

Для количественной цитохимии НК целесообразно пользоваться однокомпонентными растворами красителей. При этом предпочтительнее пользоваться метиленовым голубым. Азур В в растворах не подчиняется закону Бера, так как с повышением тонцентрации дает димеры, тримеры и т. д., обладающие своими пиками поглощения. При этом цвет раствора изменяется от светло-голубого через темно-голубой и пурпуровый к красному. [c.158]

В цитохимии НК особенно широко используется смесь двух красителей — пиронина и метилового зеленого. Пиронин лучше адсорбируется РНК наоборот, метиловый зеленый избирательно связывается с ДНК. Это дает возможность сразу же выявлять локализацию РНК и ДНК в клетке., [c.151]

Таким образом, пиронин открывает не всю РНК, а только ту ее часть, у которой свободны фосфатные группы. По этой причине он не может быть использован в количественной цитохимии РНК. В то же время пиронин с успехом используется для определения соотношения свободных и связанных с белками фосфатных групп РНК [5], [8]. [c.152]

Применение метилового зеленого в ноличественной цитохимии и оценка состояния ДНК в клетке [c.154]

В цитохимии НК галлоцианин применяют в виде краплак-ка-тиона — продукта взаимодействия красителя с хромовыми квасцами. В этой форме галлоцианин очень прочно связывается с НК даже при низком значении pH. Максимальной интенсивности окраска галлоцианнном достигает при pH 1,6. Это дает возможность практически полностью исключить участие белковых компонентов в связывании красителя и придает адсорбции его большую специфичность в отношении НК. [c.156]

Метиленовый голубой лишен метахроматичности в отношении НК и для количественной цитохимии более удобен. Он обладает способностью быстро и равномерно насыщать фосфатные группы НК и создавать благоприятные условия для фотометрирования. [c.159]

Химический энциклопедический словарь (1983) -- [ c.687 ]

Большой энциклопедический словарь Химия изд.2 (1998) -- [ c.687 ]

Биохимия нуклеиновых кислот (1968) -- [ c.125 ]

Краткая химическая энциклопедия Том 1 (1961) -- [ c.0 ]

Краткая химическая энциклопедия Том 1 (1961) -- [ c.0 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология