Ферменты изучение

Большая часть белков и ферментов, изученных в ранний период истории белковой химии, была выделена из внеклеточных жидкостей. Причина этого заключается не только в легкости получения материала, но и в том, что внеклеточные белки в основном более стабильны часто благодаря наличию в них дисульфидных мостиков, а также небольшим размерам молекул. Первоначально исследования структуры белков, естественно, сосредоточивались на этих небольших белках. Так, лизоцим, рибонуклеаза и химотрипсин были самыми первыми детально изученными белками, и все они получены из внеклеточных источников. Однако большинство ферментов локализовано внутри клеток. Часто такие белки менее стабильны — у них обычно отсутствуют дисульфидные связи вследствие того, что внутриклеточная среда обладает восстанавливающими свойствами. Цель данного раздела — дать описание методов разрушения клеток и выделения ферментов в водный экстракт , что является первым этапом очистки ферментов. [c.39]

В последние годы все чаще появляются публикации [193—196], из которых следует целесообразность разработки новых катализаторов, моделирующих ферменты. Изучение механизма действия последних ведется уже несколько десятилетий, и на основании полученного обширного экспериментального материала сформулированы некоторые принципы этого механизма. Показано, что в основе ферментативного катализа лежат три основные фактора концентрационный эффект, ориентационный эффект, полифункцио-нальный катализ. [c.179]

Осн. направления совр. исследований Ф.к.- выяснение механизма, обусловливающего высокие скорости процессов, высокую селективность (специфичность действия ферментов), изучение механизмов контроля и регуляции активности ферментов. Оказалось, в частности, что р-ции Ф. к. включают большое число стадий с участием лабильных промежут. соед., времена жизни к-рых изменяются в нано- и миллисекундном диапазонах. На активных центрах ферментов протекают быстрые (нелимитирующие) стадии, в результате чего понижается энергетич. барьер для наиб, трудной, лимитирующей стадии. [c.81]

Для примера в таблице 2.2 представлены ферменты, изученные у основных зерновых культур, с точки зрения их биохимического полиморфизма. [c.49]

Ферменты, изученные у основных культивируемых злаков [c.50]

Ингибирование ферментов. Изучение факторов, которые позволяют ферменту выбирать подходящий ион металла, весьма [c.587]

В данном разделе рассматриваются физические, химические и ферментативные методы, которые используются при исследовании метаболизма бактерий. В последующих главах описаны физические методы и приборы, фракционирование и анализ химических компонентов, выделение и количественное определение ферментов, изучение катализируемых ими реакций, а также исследование проницаемости клеток и транспортных процессов. Все эти вопросы разработаны настолько хорошо, что вполне оправданно опубликование специальных книг, посвященных их методологии и применению. Однако в данном случае авторы ограничились описанием только самых надежных и простых методов, которые могут использовать для достаточно основательного изучения метаболизма бактерий даже начинающие исследователи. [c.166]

Сложившаяся в настоящее время ситуация в энзимологии становится предельно ясной при сопоставлении исследований аспартатных и сериновых протеиназ — ферментов, изученных во всех отношениях наиболее детально. В исследовании аспартатных протеиназ, особенно протеиназ ретровирусов, в конце 1980-х—начале 1990-х годов наблю- [c.106]

Определение активности маркерных ферментов. Фермент может служить маркером определенного типа мембран, если он прочно связан с мембраной, не инактивируется при выделении данной фракции и локализуется исключительно в данных органеллах. Хотя не все эти требования выполняются для большинства маркерных ферментов, изучение их поведения в процессе получения конкретной фракции позволяет довольно точно установить принадлежность выделенных мембран. [c.67]

Примеры экспериментов со сложными ферментами. Изучение сложных ферментов с помощью метода САФ позволяет в некоторых случаях выяснить роль четвертичной структуры в их каталитической функции. [c.185]

Как всяк ий аналитический метод ИФА имеет свои ограничения, связанные, прежде всего, с шумом , который становится все более значимым по мере того, как растет чувствительность детектирующих систем. Этот шум обусловлен биологической природой молекулы детектора (антитела), усилителя (фермента). Изучение природы этих шумов и способов их подавления составляет один-из необходимых этапов разработки высокочувствительных методов ИФА. [c.4]

В настоящее время метод остановленной струи широко приме-ляется для решения многих задач химической кинетики установление механизмов химической реакции, определение стадий, лимитирующих протекание реакции обнаружение промежуточных комплексов, определение кинетики ферментативных реакций, установление числа и концентрации активных центров фермента, изучение быстрых конформационны5( переходов в белках и нуклеиновых кислотах. Метод требует быстрой регистрации это единственное существенное ограничение его применимости. Особое внимание при применении метода остановленной струи необходимо уделять тер-мостатированию, так как разница в температурах в кювете наблюдения и растворе смеси реагентов может привести к большим оптическим ошибкам, затрудняющим установление механизма наблюдаемой реакции. Точность определения констант скоростей данным методом примерно такая, как и при обычных спектрофотометрических измерениях кинетики химических реакций. [c.28]

Метцщл ферментного анализа глюкозы широко применяются для определения активности целлюлолитических ферментов, изучения кинетики и механизма действия целлюлаз. В условиях избытка целлобиазы в реакционной смеси они позволяют определять активность целлюлазного комплекса в целом. [c.133]

В 1927 г. Варбург пришел к выводу, что во всех клетках находится особый термолабильный ж елезосо дер жащий катализатор, активирующий, как думал Варбург, кислород воздуха. Этот катализатор был назван дыхательным ферментом . Изучение его спектра поглощения показало, что этот фермент по своему строению весьма близок к гемоглобину он содержит белок и прочно связанную с ним простетическую группу —гем, в состав которой входит атом железа. Дыхательный фермент получил впоследствии название цитохромоксидаза , так как его функция, как было позднее установлено, сводится к катализу реакции между кислородом и восстановленной формой одного из цитохромов. Никаких других окислительных реакций этот фермент не катализирует. [c.232]

DD-изoмep не рацемизуется этим ферментом. Изучение данной ферментной системы не завершено в частности, до сих пор не [c.244]

Димерные тиминовые фрагменты, образующиеся при УФ-облучении ДНК, расщепляются при их облучении видимым светом в присутствии фотореактивирующих ферментов. Изучению этого процесса посвящено большое количество работ (см., например, обзор ), однако механизм его до настоящего времени окончательно не выяснен. [c.680]

Можно назвать еще следующие направления, по которым развивается современная ферментология изучение роли и действия отдельных факторов, влияющих на процесс,—температуры, pH среды, ее окислительно-восстановительного потенциала, концентрации субстрата и фермента изучение кинетики ферментативных реакций исследование специфичности ферментов — важнейшего свойства, определяющего их биологическую роль и возможности практического использования химического строения и действия ингибиторов ферментов, обратимого и необратимого, специфического и неспецифического торможения ими реакций изучение строения и функций различных кофакторов, в первую очередь специфических коферментов, их роли в каталитическом процессе, в обмене веществ исследование особенностей ферментных белков — состава, числа цепей, гидродинамических и электрохимических свойств, химической структуры далее — строения активных центров, их числа, их низкомолекулярных аналогов изучение механизма действия ферментов действия полифермент-ных систем и, наконец, образования ферментных белков, в том числе их биосинтез и образование из предшественников префер-ментов). [c.46]

Исследования в этой области стимулировали интерес к наиболее активным биологическим катализаторам окислительно-восстановительных процессов. В. В. Воеводский активно участвовал в работе I Всесоюзной конференции по механизму ферментативных реакций и Совещания по моделированию ферментов. Завершающийся в настоящее время цикл работ по выяснению природы биокаталитической активности фермента ка-талазы методом моделирования был выполнен в московской лаборатории при постоянном творческом контакте с В. В. Воеводским. Высказанные В. В. Воеводским представления о коллективном характере взаимодействий в случае биокатализа подобны современным представлениям о полифункциональной структуре активного центра фермента. Изучение ряда комплексов железа — от гидратированного иона до его сложного белковопорфиринового комплекса, каталазы — выявило особую роль димерных образований, ассоциатов ионов металлов в окислительно-восстановительном катализе. Эта форма коллективного участия ионов металла в элементарном акте окислительно-восстановительного катализа оказалась присущей не только биологическим, природным комплексам, но и ряду обычных комплексов, вплоть до аква-иона железа. [c.370]

Этот фермент изучен недостаточно детально, и химизм его действия построен скорее на основе набора брутто-реакций, необходимых с точки зрения общей органической химии для проведения подобного процесса каталитического превращения, чем на анализе элементарных актов ферментативной реакции. Поэтому, как и в предыдущих случаях, проводимые схемы отражают скорее суммарный процесс переноса водорода между различными участками фермента и субстрата и могут не являться элементарными стадиями каталитического процесса. Однако на современном этапе изучения пиридоксалевых ферментов ПJДoбныe сведения представляют определенный интерес, а самое главное, их достаточно для суждения о типе и общем облике кислотно-основного центра этого фермента. Изменения в активном центре катализатора в общем аналогичны предыдущим, и каталитический механизм реакции можно представить в виде [c.236]

Активность пероксидазы, выделенной из растений табака сорта Ксанти, при 60° и pH 7,0 через 90 мин опыта сохраняется в контроле на 12,4% от первоначальной, а пероксидазы из инфицированных ВТМ растений табака — лишь на 5,1%. Такое снижение термостабильности свидетельствует о том, что вирусная инфекция оказывает существенное влияние, при котором изменяются физико-химические свойства фермента. Изучение тер- [c.77]

Сегодня исследование рестриктаз II класса, поиск новых ферментов, изучение способов их взаимодействия с ДНК, их каталитическая активность стали предметом самостоятельной области энзимологии. Все эти вопросы нашли полное изложение и критическое осмысливание в обзоре. Ценность обзора, его выводов, особенно высока в силу того, что автор — А. Янулайтис сам внес очень высокий вклад в изучение рестриктаз II класса, открыл ряд новых ферментов, руководил освоением промышленного выпуска этих ферментов в СССР. С этой точки зрения обзор необходим любому исследователю, который захотел бы приложить свои силы в этой перспективной области науки. [c.3]