Сахара редуцирующие, разделение

Мешающие вещества. При анализе растворов, не прошедших хроматографического разделения, определению суммы редуцирующих сахаров мешает разнообразие их редуцирующих способностей и присутствие посторонних редуцирующих веществ — уроновых кислот, фурфурола и т. д. При анализе элюатов из хроматограмм этих помех нет. [c.85]

Растворимые сахара содержатся в большем или меньшем количестве в любом растении, поэтому качественное их определение не имеет смысла. Тем не менее в процессе исследования и разделения природных соединений может возникнуть необходимость определения сахаров в отдельных фракциях. Надежной реакцией является реакция Бертрана. В пробирке 8—10 мл испытуемого раствора смешивают с равным объемом реактива Фелинга и кипятят 2—3 мин. Оранжево-красный осадок закиси меди указывает на присутствие редуцирующих сахаров. Если результат отрицательный, то в другую пробу раствора, нагретого до кипения, вносят каплю концентрированной соляной кислоты и после этого добавляют фелингову жидкость. Появление осадка указывает на наличие связанных простых сахаров, которые образовались в результате гидролиза дисахаридов, крахмала и гликозидов. [c.319]

Методика опыта. Навеску 3—5 г свежего растительного материала (ячменя, ржи, пшеницы, молодых листьев и т. д.) помещают невысоким рыхлым слоем в фарфоровую чашку и фиксируют паром, для чего чашку помещают в работающий стерилизатор Коха на 20 мин. После этого растительную массу растирают и переносят с 15—20 мл теплой воды в коническую колбу емкостью 50 мл и ставят в водяную баню (для экстракции) при температуре 60— 80° С на 30 мин. Полученную разваренную массу фильтруют вначале через стеклянную вату, а затем через стеклянный фильтр № 4, осадок промывают 3—4 мл дистиллированной воды. Фильтрат и промывные воды собирают в мерную колбу емкостью 25 мл и содержимое ее доводят водой до метки. Отбирают пипеткой Мора 10 мл экстракта и выпаривают в небольшой фарфоровой чашке досуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл воды. На полоску хроматографической бумаги (длина 55—60 см, ширина 5—6 см), отпустив 5 см от нижнего края, наносят в виде поперечной полосы 0,01 мл полученного концентрата. Пятно высушивают на воздухе и конец бумаги опускают в растворитель (насыщенный водой фенол). Хроматографическое разделение ведут нисходящим способом. Влажной камерой служит плотно закрывающийся аквариум, в который налито немного воды. После прохождения по бумаге фронта растворителя на расстояние 400мм (за 24—30 ч) от места нанесения испытуемого раствора хроматограмму подсушивают в вытяжном шкафу при комнатной температуре, а затем в сушильном шкафу при 70—80° С. Сухую хроматограмму проявляют, опрыскивая ее из стеклянного пульверизатора аммиачным раствором А НОз. После опрыскивания хроматограмму снова сушат в сушильном шкафу при 100—105° С. Через 5 мин бумага приобретает светло-коричневый цвет, а в местах расположения редуцирующих сахаров появляются темно-коричневые пятна (рис. 34). Эта реакция основана на восстановлении серебра редуцирующими сахарами. Для получения более четкой хроматограммы рекомендуют [c.156]

Ход анализа. Хроматографирование. Для выделения олигосахаридов из смеси редуцирующих веществ гидролизатов лроводят хроматографирование на пяти-щести полосках хроматографической бумаги (3X30 см) с мащинным расположением волокон так же, как при разделении сахаров. Растворителем служит смесь из н-бутанола, пиридина и воды или смесь ацетона, н-бутанола и воды. Количество растворителя, взятое для лроматографирования, должно быть таким, чтобы его хватило на хроматографирование в течение 50 ч при 20°С. После хроматографирования одну полоску проявляют анилинфталатом, как описано на с. 79. Об относительной длине цепочки олигосахарида судят по его Ятл- Для целлобиозы У гл = = 0,60-ь0,63. Чем меньше / гл, тем длиннее цепочка молекулы олигосахарида, тем больше остатков моноз содержится в его молекуле. [c.92]

Высушенную после разделения хроматограмму опрыскивают реагентом (а) и снова высушивают в течение 5 мин. при 105°. Затем хроматограмму опрыскивают реагентом (б) и высушивают 5 мин. при 90°. После такой обработки хроматограмм гексозамины окрашиваются в вишнево-красный цвет, N-ацетилгексоз-амин — в пурпурно-фиолетовый цвет. Редуцирующие сахара также окрашиваются при обработке хроматограмм описанными реагентами, но окраска полз чается очень слабая и быстро [c.165]

В том случае, когда надо определить количество отдельных сахаров или групп сахаров (гексозы и пентозы), отделив их от других редуцирующих веществ, применяют хроматографический метод. Анализ этим методом состоит из двух частей 1) разделение редуцирующих веществ с помощью хроматографии на бумаге и 2) определение количества сахара, выделенного на бумажной хроматограмме, колориметрическим методом или эбулиостатическим потенциометрическим методом. [c.143]

Хроматографическое разделение редуцирующих веществ. Нарезают 10—12 полосок размером 3x45 см хроматографической бумаги. Один конец каждой полоски вырезают так, чтобы он плотно входил в горлышко колбочки (приемника). На расстоянии 10 СЛ1 от другого конца наносят определенное количество исследуемого раствора, причем, если концентрация всех сахаров не превышает 3%, то наносят 3 раза по 0,01 мл, просушивая бумагу на воздухе после нанесения каждой порции раствора. Точное отмеривание и нанесение анализируемого раствора производят микропипеткой (рис. 46) с помощью специального приспособления, которое состоит из резиновой груши, заключенной в металлический кожух, и микровинта, служащего для регулирования наполнения и вытекания жидкости из пипетки. Цена деления микропипетки 0,001 мл. После нанесения анализируемого раствора полоски бумаги устанавливают в строго вертикальном положении (рис. 47). Конец полоски, на который нанесена проба, загибается в блюдце так, чтобы пятно пробы отстояло от края блюдца на расстоянии не менее 2 см. Второй конец полоски вставляют в горлышко колбы (приемник) так, чтобы его края плотно прилегали к стенкам. В блюдце наливают растворитель и всю установку накрывают стеклянным колпаком. Окружающая [c.143]

Таким путем удается добиться и разделения сахаров. Хроматография на бумаге была применена для качественного анализа редуцирующих сахаров в таких разнообразных материалах,. как яблочный сок, яичный белок и кровь [49, 216]. Для локализации положения отдельных сахаров на бумаге был применен аммиачный раствор окиси серебра, хотя в более поздней работе указывается, что флуоресценция, появляющаяся после конденсации редуцирующего сахара с ж-фенилендиамином, дает более надежные результаты. Как силикагель, так и фильтровальная бумага были применены для хроматографического разделения органических кислот, выделенных из фруктов [99, 139]. На этом же принципе основано определение молочной кислоты в молоке и янтарной — в яичных продуктах [60]. Особый интерес для биохимика представляет применение хроматографии на бумаге для разделения пуринов, пиримидинов и нуклеозидов из гидролизата нуклеиновой кислоты [134]. Удалось улучшить метод определения витамина В в рыбьих жирах и продуктах облучения эргостерина, основанный на измерении характерной абсорбции в ультрафиолетовом свете или интенсивности окраски производных с треххлористой сурьмой точность определения была значительно повышена после хроматографического удаления примесей, мешающих определению [79, 95]. [c.164]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология