Анилинфталат

Полосу, обработанную раствором анилинфталата или анилиноксалата, нагревают при 105—110°. При обработке хроматограммы анилинфталатом глюкоза и галактоза проявляются в течение 5 мин. при 105° в виде желтовато-коричневых пятен пятна пснтоз вишнево-красного цвета. Мальтоза и лактоза дают желто-коричневые пятна при нагревании в течение 20 мин, при 105°. При проявлении анилиноксалатом (110°, 5—6 мин.) пятна альдоз имеют коричневое окрашивание. [c.230]

Анилинфталат Вишнево-красная — альдопентозы Коричневб-нрасная — альдогексозы Розовая — уроновые кислоты В 100 Л4.л этанола или бута-нола, насыщенного водой, растворяют 1,66 г фталевой кислоты и 0.93 г перегнанного анилина. После опрыскивания проявителем хроматограмму нагревают 5—10 мин при 105° С [c.73]

Гидролизаты легко- и трудногидролизуемых полисахаридов исследовались хроматографией иа узких (5X250 мм) лентах хроматографической бумаги с растворителем этилацетат—пиридин—вода (5 1 5). Количество углеводов определялось по соотношению площадей пиков, полученных при записи на денситометре и проявленных анилинфталатом исследуемых хроматограмм и хроматограмм с известным количеством моносахаридов. [c.326]

При заполнении колонки рекомендуется смешивать гидроцеллюлозу с равным количеством порошкообразной целлюлозы для увеличения скорости потока растворителя. Заполненную колонку предварительно промывают растворителем в течение 2 дней, затем разделяют исследуемую смесь. Элюаты из колонки отбирают в пробирки при помощи коллектора, из каждой пробирки берут на бумагу каплю элюата. проявляют анилинфталатом и таким образом устанавливают распределение углеводов в элюате. [c.75]

Для количественного определения углеводов, разделенных хроматографией на бумаге, используют различные методы. Количество моносахарида можно определить непосредственно на хроматограммах измерением денситометром [53] интенсивности окраски пятен, полученных при проявлении, например, анилинфталатом [54] или азотнокислым серебром [55]. Ошибка прямого измерения интенсивности окраски пятен достигает Ю—15%, поскольку окраска часто бывает нестабильной и в сильной степени зависит от условий обработки хроматограмм перед измерением. Однако из-за быстроты определения этот метод находит применение. [c.76]

Более достоверные данные количественного определения углеводов получают элюированием из хроматограмм окрашенных пятен растворителями с последующим колориметрированием окрашенного раствора. Окрашенные пятна моносахаридов на хроматограмме получают обработкой ее анилинфталатом или антроновым реагентом [56]. Ошибка колориметрических определений в отдельных случаях достигает 10%. [c.76]

Предварительно профильтрованные гидролизаты наносят микропипеткой на слой адсорбента. Образовавшееся пятно подсушивают на воздухе 15—20 мш. Хроматографирование проводят в камере, предварительно насыщенной парами растворителя. Нижний край пластинки опускают в растворитель так, чтобы слой гипса был на 5 жж в растворителе. В качестве растворителя применяют хлороформ— метанол (19 3). После того как фронт растворителя пройдет 10—12 см от старта, хроматографирований прекращают. Разделенные на пластинке с гипсом углеводы после подсушивания опрыскивают раствором анилинфталата ( ,66г фталевой кислоты, 48 мл к-бутилового спирта, 48 мл этилового спирта, 2 мл воды, 0,91 г анилина) и помещают на 5—7 мин в сушильный шкаф при 105— 110° С. Пентозы при этом проявляются в виде пятна красного цвета, гексозы — коричневого. Пятна вместе с гипсом снимают шпателем и помещают в центрифужные пробирки, в которые добавляют до 0,5 мл анилинфталаткого реактива, и выдерживают в течение 1 ч в сушильном шкафу при 105—110° С. После того как пробирки остынут, затвердевшую в них массу растирают и добавляют по 4 мл смеси ацетона и конц. H I (100 4) и тщательно перемешивают. Пробирки закрывают пробками и для отделения гипса смесь центрифугируют 3—4 мин при 3000 об/мин. Окрашенные растворы колориметрируют, используя кюветы с рабочей длиной 5 мм. В кюветы сравнения наливают воду. Раствор иэ пробирок в кюветы переносят пипеткой. Пентозы колориметрируют при 1=360 ммк, гексозы — при Я=390 ммк. Количество сахара вычисляется по предварительно построенным калибровочным кривым оптической плотности растворов гексоз и пентоз. Точность метода 12—15%. [c.80]

После разделения моносахаридов ленты снимают, просушивают и проявляют анилинфталатом. Количественно моносахариды могут быть определены по площадям пиков, полученным при записи проявленных электрофорегра15(1м на денситометре. Ниже приведены значения подвижности некоторых моносахаридов при электрофорезе в боратном буфере с pH 9,2 [95] [c.86]

Определение йодометрическим методом проводят следующим образом [123]. С непроявленных хроматограмм вырезают полоски бумаги, содержащие метилированные моносахариды. Контроль за их местоположением осуществляется сравнением с расположением метилированных моносахаридов на аналогичной, но проявленной анилинфталатом хроматограмме, и проявлением участков разрезаемой хроматограммы, граничащих с расположением метилированного моносахарида. С вырезанных полосок хроматограмм метилированные углеводы элюируют водой, злюаты концентрируют под вакуумом. [c.99]

Элюированные с хроматограмм метилированные моносахариды можно определить количественно колориметрическим методом с помощью бензидина [140], tt-анизидина [120], анилинфталата [150], 4-аминодифениламина [151] или фенолсерной кислоты [152]. [c.99]

Относительное содержание метилированных моносахаридов может быть определено непосредственно на проявленных анилинфталатом хроматограммах при помощи денситометра с записывающим устройством. Для повышения прозрачности хроматограмм их пропитывают вазелиновым маслом, а затем производят запись. По величине площадей пик вычисляют относительные количества компонентов метилированного углевода. [c.100]

Для нейтрализации продукт гидролиза пропускают через колонку (длина 15 см, а ширина 1 см) с анионитом (например, можно использовать анионит из опыта 5-13). После этого колонку промывают 50 мл воды. Последние капли промывных вод должны давать отрицательную реакцию на сахар при нанесении на хроматографическую бумагу и последующем проявлении анилинфталатом после высыхания бумаги. В этом случае раствор концентрируют, отгоняя растворитель в вакууме, до объема 5 мл. [c.251]

Разделение продуктов гидролиза проводят методом распределительной хроматографии со смесью бутанола, ацетона и воды (40 50 10). Для этого в стеклянный сосуд наливают растворитель так, чтобы закрыть дно. После того как желоб, закрепленный в верхней части сосуда, заполнится наполовину, закрытый сосуд оставляют на несколько часов для насыщения воздуха внутри сосуда парами растворителя. Только после этого лист бумаги помещают в сосуд, погрузив верхний край листа в желоб и придерживая его тяжелой стеклянной палочкой так, чтобы базисная линия находилась на 3—5 см ниже края желоба. Сосуд закрывают крышкой, и спустя 2—3 ч фронт растворителя должен пройти четверть бумажной полосы. (В зависимости от конструкции сосуда и желоба хроматограммы будут несколько различаться, поэтому оптимальное время распространения фронта растворителя можно установить, только повторяя опыт.) Бумагу вынимают и сушат на воздухе. Затем обрабатывают анилинфталатом и после сушки на воздухе в течение 10 мин ее помещают в сушильный шкаф при 100°С еще на 10 мин для проявления сахарида в виде фиолетово-коричневых пятен. [c.251]

Анилинфталат. См. Углеводы , разд. 22 (пункт 1). Стероиды с группировкой ен-4-он-З в А кольце дают желтые, оранжевые или коричневые пятна на белом фоне. Чувствительность повыщается в 10 раз при замене анилина в составе реагента на и-фенилендиамин. Чувствительность 2-3 мкг. [c.421]

Анилинфталат. В 100 жл этанола или бутанола, насыщенного водой, растворяют 1,66 г фталевой кислоты и 0,93 г перегнанного анилина. [c.191]

Рис. 36. Стандартные кривые для колориметрирования сахаров при использовании анилинфталата

Проявление хроматограмм анилинфталатом [c.80]

Ряс. 14. Бумажная хроматограмма гидролизата. Основной стадии гидролиза. Бумага — Шлейхер-Шюлль 2045в растворитель — бутанол, пиридин, вода проявитель — анилинфталат время 74 часа температура 20 С [c.37]

Рис. 14. Бумажная хроматограмма гидро лизата Основной стадии гидролиза. Бумага — Шлейхер-Шю 1ль 2045в растворитель—бутанол, пиридин, вода проявитель — анилинфталат время 74 часа температура 20°С

Выбирают, однако, наиболее чувствительные реактивы, причем следует убедиться, что они не являются специфичными для данной группы веществ. Хорошие результаты были получены, например, для восстановленных сахаров с анилинфталатом (реактив № 8). После нагревания сахара давали в ультрафиолетовом свете желто-коричневые флуоресцирующие зоны. Пастуска [4] показал, что реактивом 1,3-диоксинафталин (нафторезорцин) — серная кислота (№ 44) можно обнаружить моно- и дисахариды, а также уро-новые кислоты. Минимально определяемое количество, так же как и с анилинфталатом, составляет менее 4 цг. Цветные реакции сахаров приведены в табл. 121. Значительно более чувствительным является применяемый Шталем и Кальтенбахом реактив анисовый альдегид — серная кислота [c.459]

Количественное элюирование метилированных моносахаридов с хроматограмм и последующее их определение с использованием колориметрических методов (с помощью бензидина, трихлораце-тата и-апизидина [183], анилинфталата [23], 4-аминодифенил-амина [200] или реактива фенол — серная кислота [54]) или путем щелочного окисления гипоиодитом [91] позволяют вычислить количество каждого метилированного моносахарида и, следовательно, найти их молярное отношение в гидролизате. [c.331]

Контрольные полосы отрезали и опрыскивали резорцинфосфатом [8] реактивом на кетозы и анилинфталатом [9] реактивом на альдозы (рис. 1). При этом резорцинфосфатом опрыскивали две крайние полосы хроматограммы, что давало [c.427]

Рис. 1. Схема разделения сахаров на хроматограмме и определение положения пятен отдельных сахаров из не подвергавшейся опрыскиванию части хроматограммы а и а — опрыскивание резорцинфосфатом р — рафиноза, с — сахароза, ф — фруктоза) б—не подвергавшаяся опрыскиванию часть хроматограммы в — в нисходящем потоке анилинфталатом ( — глюкоза).

Вещества для проявления хроматограмм. Если осадки или пятна на хроматограмме, полученной методами бумажной или тонкослойной хроматографии, бесцветны, то для их проявления пользуются специальными реактивами, образующими с адсорбированными веществами окрашенные соединения. Число таких реактивов, применяемых в тонкослойной и бумажной хроматографии, более 300. Это, как правило, специфические реактивы на катионы, анионы и функциональные группы органических соединений, обычно применяемые в аналитической практике (см. 7 настоящей главы). Для удобства обработки хроматограмм некоторые реактивы выпускаются в аэрозольной упаковке (анилинфталат, нингидрин, бромкрезоловый зеленый и др.). [c.68]

Для проявления хроматограмм гидролизатов растительных тканей, которые не содержат кетоз, наилучшим проявителем для углеводов признан раствор анилинфталата. В случае необходи- [c.78]

При проявлении хроматограмм а-нафтолом их выдерживают при 100°С в течение 5 мин. Фруктоза с а-нафтолом дает соединение зеленоватого цвета, сахароза и рафиноза — фиолетового. Окраска пятен неустойчива, в течение суток она исчезает. Проявление хроматограмм анилинфталатом проводят при различной температуре и времени проявления. В табл. 5 приведены [c.79]

Приемы идентификации веществ после хроматографирования. Для установления природы веществ, разделенных на бумажной хроматограмме, используют различные свойства этих веществ скорость движения по бумаге, реакции с образованием окрашенных соединений и свидетелей-спутников. Скорость движения каждого вещества по бумаге при употреблении определенного растворителя является постоянной величиной. Зная Rf или разделенных веществ, определяют расположение того или иного вещества на хроматограмме. Применяя различные проявители, устанавливают наличие функциональных групп. Например, при разделении смеси кетоз и альдоз две параллельные хроматограммы проявляют различными проявителями, одну проявляют анилинфталатом, а другую а-нафтолом. При идентификации альдоз, разделенных на хроматограмме, пользуются тем, что анилинфталат дает с гексозами и пентозами соединения различного цвета. [c.80]

Для хроматографирования употребляют полоски размером 3X30 см. Подготавливают пробы и их наносят на хроматограммы как описано на с. 81. Камерой для хроматографирования служит банка с притертой крышкой. Поток растворителя — восходящий (см. рис. 23). В банке диаметром 25 см одновременно можно хроматографировать шесть-семь полосок. Каждую пробу, подлежащую анализу, наносят на одну или несколько полосок в различном количестве. Полоски с нанесенными на них пробами (после просушки пятен проб) нанизывают на стеклянную палочку на расстоянии 2—3 см друг от друга. Затем палочку кладут на стеклянную подставку в ка мере, на дно которой налит растворитель. Слой растворителя должен быть таким, чтобы нижние концы хроматограмм погружались в него на 1— 2 см, а пятна проб были выше уровня растворителя не менее, чем на 2 см. После погружения хроматограмм в растворитель банку закрывают н ждут, когда растворитель поднимется по хроматограммам почти до палочки, на которой они висят. Открыв крышку банки вынимают палочку с нанизанными хроматограммами, просушивают их и проявляют. Если требуется, хроматографирование повторяют несколько раз и только потом проявляют хроматограммы. Хроматограммы проявляют анилинфталатом, а затем, пользуясь данными табл. 3 и 5, проводят идентификацию веществ, выделенных из пробы. [c.83]

Ход анализа. Хроматографирование. Для выделения олигосахаридов из смеси редуцирующих веществ гидролизатов лроводят хроматографирование на пяти-щести полосках хроматографической бумаги (3X30 см) с мащинным расположением волокон так же, как при разделении сахаров. Растворителем служит смесь из н-бутанола, пиридина и воды или смесь ацетона, н-бутанола и воды. Количество растворителя, взятое для лроматографирования, должно быть таким, чтобы его хватило на хроматографирование в течение 50 ч при 20°С. После хроматографирования одну полоску проявляют анилинфталатом, как описано на с. 79. Об относительной длине цепочки олигосахарида судят по его Ятл- Для целлобиозы У гл = = 0,60-ь0,63. Чем меньше / гл, тем длиннее цепочка молекулы олигосахарида, тем больше остатков моноз содержится в его молекуле. [c.92]

Ход анализа. Хроматографирование исследуемой пробы проводят так же, как при количественном определении сахаров (см. с. 83), применяя растворитель — смесь бутанола, пиридина и воды. Через 120—130 ч хроматографирования снимают одну полоску, высушивают и проявляют анилинфталатом. На основании проявленной хроматограммы определяют, достигнуто ли нужное разделение уроновых кислот и отделение их от углеводов. Если результат хроматографирования удовлетворяет исследователя, то все хроматограммы снимают, сушат на воздухе до полного удаления запаха растворителя и, пользуясь дополнительными свидетелями, из хроматограмм вырезают кусочки, содержащие одну или несколько уроновых кислот (см. рис. 31). Извлекают уроновые кислоты из хроматограмм водой и определяют их количество так, как описано на с. 89 для сахаров. [c.93]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология