Ферментативные методы проявления

Глюкоза — галактоза -бутанол —пиридин—вода в соотношении 6 4 3 проявление ферментативным методом. [c.273]

Фруктоза—сорбоза -бутанол—уксусная кислота—вода в соотношении 4 1 5 проявление ферментативным методом. [c.273]

Идентификация аминокислотных остатков, входящих в активный центр того или иного фермента, осуществляется различными методами. Так, применение ингибиторного анализа дает возможность выявить функциональные группы, отвечающие за проявление ферментативной активности. Локализация активного центра возможна также при применении протеолитических ферментов, гидролизующих молекулу фермента на отдельные фрагменты. [c.65]

Согласно Ленинджеру [1], примерно одна треть описанных к 1950 г. ферментов требовала для проявления своей максимальной активности либо добавления иона металла, либо эти ферменты содержали прочно связанный ион металла, по-видимому, принимающий участие в каталитических процессах. С тех пор применение усовершенствованных методов анализа металлов в биологических системах позволило выявить еще большое число ферментов, относящихся к классу металлопротеинов. Кроме того, установлена ферментативная активность ряда металлопротеинов, для которых ранее было показано наличие металла [2]. [c.443]

Следует отметить, что до сих пор внимание обращалось почти исключительно на нерастворимые или набухающие окислительновосстановительные полимеры. Между тем крайне интересным может оказаться использование водорастворимых полимеров, в которых группы, отвечающие за проявление окислительно-восстановитель-ных свойств, находятся в определенных положениях, например соединений, несущих функции ферментов или физиологически активных веществ. С пониманием все более тонких структурных особенностей полимерных молекул, с развитием синтетических методов регулирования их состава и строения появятся и возможности получения сложных, более селективно работающих синтетических высокомолекулярных веществ, способных выполнять ферментативные функции. Естественно, что такого рода редокс-полимеры найдут применение в биологии, биохимии и медицине. [c.10]

Биохимия нуклеиновых кислот лежит в самой основе генетики в.свою очередь использование генетических подходов оказалось плодотворным для многих областей биохимии. Физиология, наука о функционировании организма, очень сильно перекрывается с биохимией. В иммунологии находит применение большое число биохимических методов, и в свою очередь многие иммунологические подходы широко используются биохимиками. Фармакология и фармация базируются на биохимии и физиологии метаболизм большинства лекарств осуществляется в результате соответствующих ферментативных реакций. Яды влияют на биохимические реакции или процессы эти вопросы составляют предмет токсикологии. Как мы уже говорили, в основе разных видов патологии лежит нарушение ряда химических процессов. Это обусловливает все более широкое использование биохимических подходов для изучения различных видов патологии (например, воспалительные процессы, повреждения клеток и рак). Многие из тех, кто занимается зоологией и ботаникой, широко используют в своей работе биохимические подходы. Эти взаимосвязи не удивительны, поскольку, как мы знаем, жизнь во всех своих проявлениях зависит о г разнообразных биохимических реакций и процессов. Барьеры, существовавшие ранее между биологическими науками, фактически разрушены, и биохимия все в большей степени становится их общим языком. [c.11]

Скорость течения жидкости (скорость элюции) можно регулировать наклоном пластины (обычно в диапазоне 5—20°). Для проявления результатов фракционирования удобнее всего воспользоваться методом снятия реплики. На влажный гель на 1 мин кладут листок толстой фильтровальной бумаги ( Whatman 3 ММ ) и прижимают его стеклянной пластиной. За это время жидкость из пространства между гранулами переходит на бумагу, а вместе с ней — и макромолекулы, находившиеся в подвижной фазе каждой хроматографической зоны. Фильтровальную бумагу затем подсушивают и пятна на ней выявляют одним из многочисленных методов окраски белков или НК, путем регистрации ферментативной активности, радиоактивности, иммунными методами и т. д. Все эти методы выявления были подробно рассмотрены при описании электрофореза и иммуноэлектрофореза [Остерман, 1981, 1983]. [c.163]

При разделении менее сложных смесей (10—15 пептидоа) часто опускается стадия ионообменной хроматографии. Выбор схемы разделения проаодится на основании анализа так называемых пептидных карт. Для получения пептидной карты (рис. 10) смесь пептидоа, образовавшаяся в результате ферментативного или химического гидролиза белка, наносится в анде небольшой полоски на лист хроматографической бумаги или пластинки с тонким слоем целлюлозы и подвергается электрофорезу или хроматографии во взаимно перпендикулярных направлениях. После проявления пептидной карты специфичным реактивом иа бумаге или пластинке образуется характерный для данного белка набор пятен, их взаимное расположение позволяет оценить эффективность использованных методов разделения и выбрать оптимальный вариант. [c.53]

Попытки непосредственно показать взаимопревращение пи-ридоксаминфосфат-ферменга и пиридоксальфосфат-фермента до сих пор были безуспешными , по-видимому, вследствие ряда экспериментальных трудностей, обусловленных тем, что в соединение с ферментом вступает лишь очень небольшое количество кофермента и при этом отсутствует достаточно хороший метод количественного отщепления и определения связанного с ферментом кофермента. Задача осложняется еще и тем, что добавленный синтетический кофермент может присоединяться к белковой молекуле фермента не только там, где он необходим для проявления ферментативной активности, но и в других ее участках. Исследования с применением кофермента, меченного радиоактивным фосфором, позволили обнаружить неспецифическое [c.251]

Конечно, можно возразить, что физиологический аппарат организма не способен выявлять различия в активности между аллоферментами, показанные in vitro, или что они настолько компенсированы, что изменчивость такого порядка не отражается на приспособленности. Возможно, что наши лабораторные методы гораздо чувствительнее, чем природа. Если в организме обычно имеется избыток фермента, так что реакции лимитируются только количеством субстрата, то изменения ферментативной активности не должны отражаться на цепях биохимических реакций. Это обычная модель доминирования, и если какой-либо аллель с резким проявлением (например, леталь или полулеталь) рецессивен, то это потому, что организм вполне может обходиться только половиной нормального количества фермента. Если рассуждать таким образом, то одна гомозигота по аллоферменту должна обладать приблизительно половиной активности другой, прежде чем разница в активности начнет сказываться на приспособленности даже у гомозигот. [c.270]

Улучшенный скрининг становится возможным в том случае, если объекты, составляющие клонотеку, различаются фенотипически, например, по наличию у них потенциальной ферментативной активности. Примером улучшенного скрининга является обнаружение окрашенных бактериальных колоний, что может быть следствием экспрессии в бактериальных клетках искомого фермента. Хотя при таком качественном тесте все равно приходится анализировать все объекты клонотеки, которые будут затеряны среди ненужных представителей (в нашем примере -большого числа неокрашенных бактериальных клеток), улучшенный скрининг существенно облегчает процесс поиска требуемых молекулярных объектов. Тем не менее, эта группа методов, как правило, характеризуется низкими значениями отношения сигнала к шуму, а также имеет место конкуренция (в том числе и неспецифическая) за ресурсы (в частности, компоненты питательной среды или субстрат реакции) со стороны ненужных компонентов клонотеки, что может блокировать проявление фенотипического признака. [c.333]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология