Парафиновые срезы

Парафиновые срезы получают с помощью микротома. Срезы наклеивают на предметное стекло и депарафинируют ксилолом. Последний затем вытесняется спиртом проводкой через смеси ксилол — спирт, при необходимости спирт вытесняется водой проводкой через смесь спирт —вода. Подготовленный таким образом препарат используют для гистохимических исследований. [c.128]

Обработка материала. При обработке инфицированных насекомых необходимо получать материал для изготовления сухих и влажных мазков, для парафиновых и ультратонких срезов, а также материал для дальнейшего инфицирования. Все это достигается, если инфицированный экземпляр достаточно большой и еще живой или когда есть несколько зараженных экземпляров. Если материал представлен мертвыми насекомыми, то из него нельзя приготовить влажные мазки или парафиновые срезы, но возможно сделать сухие мазки и даже ультратонкие срезы, хотя только с деталями содержимого спор, а также по.лучить инфекционный материал, если он не высох и не находился на солнце более 2—3 месяцев. Вскрытие инфицированного хозяина целесообразно только в тех случаях, когда мы располагаем большим количеством пораженных экземпляров. Если в нашем распоряжении имеется только один экземпляр, его тело надо разделить на три части из первой трети приготовить мазки, вторую треть зафиксировать с целью дальнейшей гистологической обработки, последнюю оставить в воде для экспериментальных заражений. [c.282]

При окрашивании парафиновых срезов парафин удаляют с помощью растворителя, а срез перед окрашиванием частично обводняют. [c.214]

Быстрая заливка в парафин (вакуумный сушильный шкаф) парафиновые срезы прикрепляют небольшим количеством смеси белок—глицерин на предметное стекло. [c.90]

Фиксация в формалине приготовление замороженных или парафиновых срезов. [c.250]

Фиксация в формалине, замороженные или парафиновые срезы. [c.267]

Реакция после обработки парами концентрированной соляной кислоты может быть проведена также на парафиновых срезах Проверенный метод для тканей беспозвоночных [c.268]

Наклейка парафиновых срезов на предметные стекла [c.81]

Наклейка парафиновых срезов. Подготовив предметные стекла, можно приступить к наклеиванию парафиновых срезов. Для этого вынимают пинцетом одно стекло из сосуда с [c.81]

Пропитка парафином в вакууме (вакуумный ппсаф или водоструйный насос) при температуре от -f 54 до -f 56 С, 30 мин, с последующей заливкой. Приготовление парафиновых срезов, расправление на плите с подогревом (не выше -f40 ), удаление воды фильтровальной бумагой и просушивание среза в термостате при 37°С, 30 мин. Депарафинирование срезов и их проводка до дистиллированной воды по следующей схеме [c.222]

Сморщенные парафиновые срезы надо расправить. Для этого предметные стекла со срезами, плавающими в воде, переносят на ровную поверхность нагревательного столика (приспособление для сушки и расправления парафиновых срезов на предметных стеклах, рис. 32), имеющего латунную пластинку с подогревом от электротока. Во время расправления срезов следят, чтобы со стекол не испарилась вода. Срезы можно расправить и под лампой, а также на подогретых асбоцементных пластинках. Теплые предметные стекла с расправленными срезами переносят на черную поверхность стеклянной пластинки (можно ИС пользовать фотопластинки). [c.82]

Фиксацию, заливку в парафин и последующее депарафини-рование срезов проводят согласно общепринятой гистологической технике с учетом следующего обстоятельства. Парафиновые срезы наклеивать на белок, как это принято при обычных гистохимических исследованиях, нельзя из-за сильной адсорбции красителя денатурированным белком. Поэтому готовят слабый водный раствор белка (примерно 1 капля белка на 1 мл воды), который и используется при нанесении парафиновых срезов на тщательно обезжиренное предметное стекло. Такое количество белка не вносит заметных искажений в свечение флуорохромированных препаратов. Вместе с тем его достаточно для прочного приклеивания среза к стеклу. [c.180]

Приготовление исследуемых образцов. Наибольшее распространение метод микрорадиоавтографии нашел при изучении биологических объектов. В случае мягких тканей готовят парафиновые срезы обычным гистологическим способом и затем обезвоживают их с последующей окраской или без окраски. [c.204]

Колебания толщины гистологических срезов могут быть весьма значительными, так как конструкция микротомов (особенно санных) не рассчитана на прецизиоппые задачи. Однако за последние годы выпущены модели ротационных микротомов, которые при квалифицированном использовании обеспечивают равную толщину срезов. Как показали наши измерения, колебания толщины парафиновых срезов, полученных на ротационном микротоме фирмы Райхерт (Австрия), таковы, что средняя ошибка для группы около 100 срезов составляет не более 3%, т. е. не превышает общей ошибки цитоспектрофотометрического метода ( + 5—10%). При этом срезы не подвергали предварительной оценке под микроскопом с целью выбраковывания нестандартных по толщине. Следовательно, такой источник ошибок, как колебания толщины срезов, может быть доведен до величины, вполне приемлемой для решения конкретных задач количественной цитохимии. [c.141]

Дальнейшие исследования возможностей использования моноклональных антител неожиданно встретили затруднения, обусловленные распознаванием моноклональными антителами только нативной формы антигена. Например, моноклональные антитела к клеточным антигенам часто не распознают антиген, перенесенный на нитроцеллюлозную мембрану с полиакриламидных гелей после проведения электрофореза растворимых клеточных экстрактов в присутствии ДСН. В данном случае антиген денатурируется и поэтому не связывается с антителами. Подобным образом моноклональные антитела, которые окрашивают клетки в суспензии, могут оказаться непригодными для иммуногистологических исследований парафиновых срезов зафиксированного формалином материала. Эти соображения наводят на мысль, что как выбор метода скрининга, так и природа материала, используемого для иммунизации мышей, являются важными факторами, влияющими на свойства полученных в конечном итоге моноклональных антител. [c.149]

Хромовая кислота и хромат калия окисляют ненасыщенные жирные кислоты, что ведет к стабилизации липидов. Окисленные липиды менее растворимы в растворителях жиров, чем неокисленные. от фактор используется при выявлении липидов на парафиновых срезах. Характерной реакцией для хроматов является комплексообразова-ние с водой и способность таких комплексов, подобно формальдегиду, образовывать связи с реакционноспособными группами белка. На окисляющем действии хроматов основана так называемая хромаффинная реакция , которая выражается в побурении. Этот окислительный процесс ведет образованию биогенными аминами (например, адреналином, норадреналином, окситриптамином) коричневого пигмента с последующей полимеризацией продуктов окисления. [c.41]

Сокращения Ф-формалин Са-Ф - кальций-формол Са-Сс1-Ф - кальций-кадмий-формол П - парафиновые срезы 3 - замороженные срезы- К - криостатные срезы. [c.155]

Фиксация в кальций-формоле по Бейкеру, приготовление замороженных или парафиновых срезов. [c.166]

Фосфолипиды, за исключением сфингомиелина, окрашиваются в синий цвет. Окрашиваются также ганглиозиды, а возможно, и цереброзиды. Сфингомиелин удается окрасить лишь при использовании в качестве растворителя хлороформа вместо этанола. При этом, однако, усиливается неспецифическое окрашивание. Этот метод рекомендуется лишь для парафиновых срезов. [c.166]

Лиофилизированные парафиновые срезы толщиной 10 мкм переносят для депарафииирования непосредственно в петролейный эфир (срезы к предметн( 4у стеклу не прикреплять ). [c.273]

Парафиновые срезы, наклеенные иа предметные стекла, непосредственно изучать под микроскопом трудно. Для выявления отдельных [(омпонеитов клетки необходимо освободить их от парафина, а затем окрасить. Последовательность работы следующая. [c.83]

Следует иодчеркнугь, что приготовление парафиновых срезов из культур, в которых остеогенная дифференцировка привела к образованию хорошо развитой минерализованной костной ткани, представляет существенные трудности. Чтобы избежать выкрашивания кости, богатой нерастворимыми солями кальция, культуры приходится предварительно декальцинировать, что в дальнейшем не позволяет производить на срезах реакцию ван Косса. [c.280]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология